白芍總苷聯(lián)合復(fù)方甘草酸苷治療斑禿療效評(píng)價(jià)及對(duì)血清TNF－α、TGF－β1和IL－12的影響

周 敏 萬慧穎 劉楊英 陳 金

白芍總苷聯(lián)合復(fù)方甘草酸苷治療斑禿療效評(píng)價(jià)及對(duì)血清TNF－α、TGF－β1和IL－12的影響

周 敏 萬慧穎 劉楊英 陳 金

目的: 評(píng)價(jià)白芍總苷聯(lián)合復(fù)方甘草酸苷治療斑禿療效及對(duì)血清TNF－α、TGF－β1和IL－12的影響。方法: 84例斑禿患者隨機(jī)分為治療組(43例)和對(duì)照組(41例)。治療組給予口服白芍總苷及復(fù)方甘草酸苷，局部外用倍他米松溶液，對(duì)照組僅給予口服復(fù)方甘草酸苷及外用藥物，3個(gè)月后評(píng)價(jià)療效并采用ELISA法檢測(cè)患者血清TNF－α、TGF－β1及IL－12水平。結(jié)果: 治療組和對(duì)照組治療有效率分別為83.7%和63.4%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療組TNF－α、TGF－β1及IL－12水平較對(duì)照組明顯降低(P＜0.05)。結(jié)論: 白芍總苷聯(lián)合復(fù)方甘草酸苷可能通過調(diào)節(jié)血清細(xì)胞因子達(dá)到治療斑禿的作用。

斑禿； 白芍總苷； 復(fù)方甘草酸苷

斑禿是一種頭部的常見皮膚病，其病因和發(fā)病機(jī)理尚未完全明了，目前多數(shù)學(xué)者傾向于認(rèn)為斑禿是在遺傳易感性的基礎(chǔ)上，在各種激發(fā)因素作用下由T細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫功能失調(diào)所致的針對(duì)生長(zhǎng)期毛囊，以Th1型反應(yīng)為特征的器官特異性自身免疫性疾病。1目前針對(duì)該病的治療方法和藥物很多，療效不一。我們采用白芍總苷與復(fù)方甘草酸苷聯(lián)合治療斑禿，觀察其療效及治療前后對(duì)患者血清TNF－α，TGF－β1和IL－12的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本組84例斑禿患者均來自我科門診，臨床表現(xiàn)符合斑禿診斷標(biāo)準(zhǔn)。2將患者隨機(jī)分成兩組。其中治療組43例，男22例，女21例；年齡16～58歲，平均31.5歲；病程10天～1年，平均21.42周。對(duì)照組41例，其中男24例，女17例；年齡18～56歲，平均29.8歲；病程5～11個(gè)月，平均22.64周。皮損多表現(xiàn)為1～3片邊界清楚的圓形或橢圓形禿發(fā)斑，直徑1～7 cm。治療組與對(duì)照組兩組患者的年齡、性別、病情程度及病程經(jīng)組間t檢驗(yàn)，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，具有可比性。對(duì)治療組和對(duì)照組治療前后均進(jìn)行血清TNF－α、TGF－β1及IL－12水平檢測(cè)，10名健康人血清作為對(duì)照。排除標(biāo)準(zhǔn):嚴(yán)重心、肝、腎功能不全者；高血壓、糖尿病、醛固酮癥，肌病，低鉀血癥等患者；假性斑禿、拔毛癖、麻風(fēng)脫發(fā)、頭癬、梅毒性禿發(fā)患者；1個(gè)月內(nèi)系統(tǒng)或局部應(yīng)用過糖皮質(zhì)激素；妊娠及哺乳婦女；對(duì)治療所用藥物過敏者；依從性差者。實(shí)驗(yàn)試劑、試劑盒購(gòu)自深圳晶美生物工程有限公司

1.2 治療方法 對(duì)照組予復(fù)方甘草酸苷片口服，每次50mg，日3次，予本院自配制劑倍他米松溶液(主要成分:倍他米松、二甲基亞砜)外用。治療組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上口服白芍總苷日3次，每次600 mg。1個(gè)月為1個(gè)療程，每月隨訪1次，3個(gè)療程后評(píng)價(jià)療效。觀察患者病變區(qū)域治療前后毛發(fā)再生情況判斷療效，觀察治療期間不良反應(yīng)判斷治療安全性。

1.3 血清TNF－α、TGF－β1及IL－12測(cè)定 采集靜脈血3mL，離心收集血清，－70℃保存。采用雙抗夾心ELISA法，操作步驟按試劑盒說明進(jìn)行。療效評(píng)價(jià)方法3:痊愈，新發(fā)全部生長(zhǎng)，分布密度、毛發(fā)粗細(xì)、色澤同正常毛發(fā)，拔發(fā)試驗(yàn)陰性；顯效，脫發(fā)區(qū)普遍毳毛生長(zhǎng)，毛發(fā)停止脫落，終毛覆蓋率50%以上，有較多毳毛變?yōu)榻K毛，拔毛試驗(yàn)陰性；好轉(zhuǎn)，新發(fā)生長(zhǎng)10%以上(包括毳毛)，但生長(zhǎng)緩慢，拔發(fā)試驗(yàn)陰性或陽性；無效，無新發(fā)生長(zhǎng)或新發(fā)生長(zhǎng)低于10%或繼續(xù)脫發(fā)。總有效率＝痊愈率＋顯效率。觀察指標(biāo)及療效評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)分別于開始治療的當(dāng)天、治療后3個(gè)月進(jìn)行。同時(shí)觀察記錄不良反應(yīng)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 定性資料結(jié)果采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料數(shù)據(jù)用(ˉx±s)表示，各組資料間采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 治療結(jié)束時(shí)，治療組與對(duì)照組有效率分別為83.7%和63.4%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05，χ2＝8.24)，見表1。

表1 兩組治療斑禿療效比較

治療過程中兩組均未發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)，治療期間治療組有2例有輕微腹瀉自行緩解，亦不影響治療。

2.2 血清TNF－α、TGF－β1及IL－12水平變化 見表2。治療前患者TNF－α水平明顯高于正常人組及治療后，治療前后及與正常對(duì)照比較，t值分別為2.16、2.78和3.42，均P＜0.05，治療組同對(duì)照組相比有明顯降低，t＝2.08，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；患者對(duì)照組及治療組治療前后TGF－β1水平與正常對(duì)照比較，t值分別為3.25、5.12和6.87，均P＜0.05，治療組同對(duì)照組相比亦有明顯降低，t＝2.68，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；患者對(duì)照組及治療組治療前后IL－12水平與正常對(duì)照比較，t值分別為2.08、2.34和4.43，均P＜0.05，但治療組同對(duì)照組相比t＝1.38，P＞0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2 兩組治療前后患者血清TNF－α、TGF－β1及IL－12水平

3 討論

斑禿是一種常見多發(fā)的疾病，影響人的外觀及社交生活，其發(fā)病機(jī)制目前尚不完全清楚。既往已經(jīng)針對(duì)斑禿開展了較多研究，4目前認(rèn)為該病是在遺傳易感性的基礎(chǔ)上，由T細(xì)胞介導(dǎo)的、在各種刺激因素作用下自身免疫功能失調(diào)所致的針對(duì)生長(zhǎng)期毛囊以Th1型反應(yīng)為特征的器官特異性自身免疫性疾病。大量臨床和實(shí)驗(yàn)室的研究顯示，細(xì)胞因子是造成斑禿的關(guān)鍵因素。在斑禿患者的皮損和血循環(huán)中發(fā)現(xiàn)有多種細(xì)胞因子的異常表達(dá)，并通過干涉毛發(fā)的生長(zhǎng)周期使毛發(fā)提前抑制，從而導(dǎo)致脫發(fā)。TNF－α、TGF－β1及IL－12是Th1細(xì)胞因子中具有代表性的幾種。TNF5是一種主要由單核巨噬細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，影響多種組織和細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化，在免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)的不同水平起著重要的調(diào)節(jié)作用。TNF－α能誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)ICAM－1，促進(jìn)炎癥細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞的相互作用，可產(chǎn)生多種細(xì)胞因子，可抑制毛囊生長(zhǎng)，使毛乳頭凝聚和毛基質(zhì)的前皮質(zhì)細(xì)胞異常角化；TGF－β16是細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的多功能調(diào)節(jié)因子，在細(xì)胞生長(zhǎng)負(fù)調(diào)節(jié)中起主要作用，具有可抑制上皮細(xì)胞生長(zhǎng)和免疫系統(tǒng)的功能。TGF－β1作為一種角質(zhì)形成細(xì)胞增殖的抑制劑和細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)劑，在毛發(fā)生長(zhǎng)退化期調(diào)節(jié)中可能起重要作用。IL－127是已知的誘導(dǎo)Th1反應(yīng)的主要因子，能增強(qiáng)細(xì)胞免疫應(yīng)答，如促進(jìn)細(xì)胞毒性T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用和增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞的殺傷作用，并誘導(dǎo)其分泌IFN－γ；還能誘導(dǎo)TNF－α、IL－3等細(xì)胞因子的表達(dá)，促進(jìn)Th1細(xì)胞發(fā)育。我們的研究結(jié)果顯示斑禿患者治療前這幾種細(xì)胞因子均高于正常人對(duì)照，治療后均下降，證明這幾種細(xì)胞因子在斑禿的發(fā)病中起到了一定的作用，與既往研究結(jié)果一致。

糖皮質(zhì)激素可以通過抑制免疫、抗炎作用控制斑禿的發(fā)展，促進(jìn)毛發(fā)的再生，但由于其不良反應(yīng)，不宜系統(tǒng)及長(zhǎng)期使用。局部注射治療有一定的療效，但增加患者痛苦及感染風(fēng)險(xiǎn)，且毛發(fā)再生具有不穩(wěn)定性。復(fù)方甘草酸苷近年應(yīng)用于治療斑禿取得了良好的療效。研究表明，8其在體內(nèi)具有較強(qiáng)的抑制補(bǔ)體和抗體的作用，能抑制組胺、激肽、白三烯等炎性介質(zhì)的釋放，具有類激素的抗炎、抗過敏作用，還能調(diào)節(jié)免疫和抗病毒等，治療以Th1型反應(yīng)為特征的器官特異性自身免疫性疾病時(shí)與糖皮質(zhì)激素的作用一致，但卻減輕長(zhǎng)期應(yīng)用糖皮質(zhì)激素的副作用因此運(yùn)用復(fù)方甘草酸苷片治療斑禿，能通過類激素的免疫調(diào)節(jié)作用，從而達(dá)到中止斑禿發(fā)展，促使毛發(fā)生長(zhǎng)的目的。白芍總苷是從白芍干燥根中提取的有效成份，9主要成分包括芍藥苷、羥基芍藥苷、芍藥花苷、芍藥內(nèi)酯苷以及苯甲酰芍藥苷等，其中芍藥苷占總苷量的90%。具有抗炎、鎮(zhèn)痛、保肝、護(hù)腎、調(diào)節(jié)脂代謝及調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖與凋亡等作用，能通過多種途徑抑制自身免疫反應(yīng)，對(duì)免疫細(xì)胞的增殖、免疫活性物質(zhì)的產(chǎn)生具有低濃度促進(jìn)和高濃度抑制的雙向調(diào)節(jié)作用，還具有調(diào)節(jié)細(xì)胞因子如腫瘤壞死因子，白細(xì)胞介素等的作用。目前廣泛用于治療干燥綜合征、扁平苔蘚、濕疹、銀屑病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等自身免疫性疾病且取得一定的療效，但將其用于治療斑禿尚報(bào)道不多。10在我們的觀察中，治療組痊愈率及有效率均明顯高于對(duì)照組，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，證明這兩種藥物結(jié)合治療斑禿具有良好的療效，可以縮短病程，且在治療過程中未發(fā)現(xiàn)明顯不良反應(yīng)。中醫(yī)認(rèn)為斑禿多屬肝腎不足，陰血不足或肝氣郁結(jié)，氣機(jī)不暢所致。11治療重在滋補(bǔ)肝腎，益精養(yǎng)血，這兩種藥物都具有相關(guān)的作用。在本研究中，通過這兩種藥物的治療，患者升高的Th1細(xì)胞因子TNF－α、TGF－β1及IL－12均降低，且治療組同對(duì)照組相比，TNF－α及TGF－β1的降低更為顯著，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明二者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)這兩種細(xì)胞因子的抑制作用更為明顯，間接說明可能這兩種細(xì)胞因子對(duì)于斑禿的發(fā)病起著更為重要的作用。綜上所述，復(fù)方甘草酸苷與白芍總苷聯(lián)用具有良好的臨床效果，且不良反應(yīng)少。通過治療，這三種升高的細(xì)胞因子明顯降低，提示這兩種藥物聯(lián)用可能通過其抗炎及雙向調(diào)節(jié)免疫作用，糾正外周血Th1/Th2平衡失調(diào)，可能具有協(xié)同作用，但其具體機(jī)理還需深入研究。

1 Lit LC，Wong CK，Li EK，et al.Elevated gene expressionof Th1/Th2 associated transcription factors is correlated with disease activity in patients with systemic lupus erythematosus.J Rheumatol，2007，34(1):89－96.

2朱學(xué)駿.現(xiàn)代皮膚病性病診療手冊(cè).北京:北京醫(yī)科大學(xué)出版社，2001.241.

3鄒德明.中西醫(yī)結(jié)合治療斑禿療效觀察.當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2010，16 (12):148－149.

4 Katagiri K，Arakawa S，Hatano Y.In vivo levels of IL－4，IL－10，TGF－beta1 and IFN－gamma mRNA of the peripheralblood mononuclear cells in patients with alopecia areatain comparison to those in patients with atopic dermatitis.Arch Dermatol Res，2007，298(8):397－401.

5Ettehadi P，GreavesW，Wallach D，et al.Elevated tumor necrosis factor－alpha(TNF－alpha)biological activity in psoriasis skin lesions.Clin Exp Immnunol，1994，96:146－151.

6 LiMO，Wan YY，San JB，et al.Transforming growth factor－β regulation of immune responses.Annu Rev Immunol，2006，24: 99－146.

7 Gately MK，Renzetti LM，Magram J，et al.The interleukin－12/ interleukin－12－receptor system:role in normal and pathologic immune responses.Annu Rev Immunol，1998，16:495－521.

8黃衛(wèi)寧，黃卓輝，盧肖霞，等.甘草酸苷對(duì)重型斑禿外周血Th1/Th2細(xì)胞因子的調(diào)控研究.皮膚性病診療學(xué)雜志，2011，18(5):321－323.

9彭友華，李建軍.白芍總苷在皮膚科的應(yīng)用及研究進(jìn)展.皮膚性病診療學(xué)雜志，2010，17(3):250－252.

10馮志平，黨林.白芍總苷膠囊聯(lián)合地蒽酚軟膏治療斑禿50例療效觀察.中國(guó)美容醫(yī)學(xué)，2012，21(12):390.

11談煜俊，王小平.皮膚病實(shí)用方.南京:江蘇科學(xué)技術(shù)出版社，1994.303.

(收稿:2013－12－10 修回:2013－12－25)

Assessm ent of therapeutic efficacy and effects of total paeony glucosides combined w ith com pound glycyrrhizin on TNF－α，TGF－β1 and IL－12 in patien tsw ith alopecia areata

ZHOU Min，WAN Hui-ying，LIU Yang-ying，etal.Sichuan Academy ofMedical Science.People's Hospital of Sichuan，Chengdu，610031

Objective:To assess the efficacy and determine the possiblemechanism of total paeony glucosides combined with compound glycyrrhizin in the treatmentof alopecia areata.Methods:Eighty－four patients were random ly divided into experimental group(43 patients)and control group(41 patients).In addition to the therapy of compound glycyrrhizin and betamethasone liquid in control group，the total paeony glucosides was given to the patients in experimental group.After 3－months treatment，the therapeutic effectswere evaluated and the levels of TNF－α，TGF－β1 and IL－12 weremeasured by ELISA immunosorbent assay.Results: The effective rate in experimental group and control group were 83.7%and 63.4%，with a significant difference(P＜0.05).The levels of TNF－α，TGF－β1and IL－12 were reduced in experimental group(P＜0.05).Conclusion:The treatmentmechanism of total paeony glucosides combined with compound glycyrrhizin in the treatmentof alopecia areatamay be by regulation of NF－α、TGF－β1 and IL－12.

alopecia areata；total paeony glucosides；compound glycyrrhizin

四川省醫(yī)科院·四川省人民醫(yī)院皮膚病性病研究所，四川成都，610031