養(yǎng)胃顆粒對實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍大鼠血清SOD活性和MDA含量的影響

祁大慶，張曉麗，傅迎

養(yǎng)胃顆粒對實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍大鼠血清SOD活性和MDA含量的影響

祁大慶，張曉麗，傅迎

目的觀察養(yǎng)胃顆粒對實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍大鼠潰瘍愈合的療效，并探討其可能的作用機(jī)制。方法采用醋酸致胃潰瘍大鼠模型，并分別設(shè)立正常對照組、模型組、養(yǎng)胃顆粒低中高劑量組以及雷尼替丁陽性對照組，于術(shù)后連續(xù)給藥14 d，評價潰瘍愈合百分率，測定大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)。結(jié)果養(yǎng)胃顆粒能顯著減小模型大鼠潰瘍面積(＜0.05)，提高胃潰瘍愈合百分率；并能顯著升高模型大鼠血清的SOD活性(＜0.05)，降低血清MDA的含量(＜0.05)。結(jié)論養(yǎng)胃顆粒對模型大鼠的胃潰瘍具有一定的治療作用，其作用機(jī)制可能與其提高機(jī)體抗脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的能力有關(guān)。

胃潰瘍；養(yǎng)胃顆粒；超氧化物歧化酶；丙二醛

養(yǎng)胃顆粒由白芍、黃芪、黨參、山藥、烏梅、甘草、香附和陳皮八味藥材組成，具有養(yǎng)胃健脾、理氣止痛及和中生津之功效，是臨床治療慢性胃炎和慢性萎縮性胃炎的常用藥物。前期研究結(jié)果已表明，養(yǎng)胃顆粒對胃潰瘍也有很好的療效，但對其作用機(jī)制尚未明確[1]。本研究采用醋酸致胃潰瘍大鼠模型，觀察了不同劑量組養(yǎng)胃顆粒對模型大鼠胃潰瘍的影響，通過對大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的分析，初步探討了其可能的藥物作用機(jī)制，為其臨床應(yīng)用提供了進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)依據(jù)?，F(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 動物健康Wistar大鼠120只，體質(zhì)量180～230 g，雌雄各半，由浙江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，按清潔級要求飼養(yǎng)[實(shí)驗(yàn)動物許可證號SYXK(浙) 2008-0115]。

1.2 藥品與試劑養(yǎng)胃顆粒由正大青春寶藥業(yè)有限公司生產(chǎn)（批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字Z33020174）；雷尼替丁由江蘇黃河藥業(yè)有限公司生產(chǎn)（批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H32025011）；SOD測定試劑盒和MDA測定試劑盒均購置于南京建成生物工程研究所。

1.3 儀器UV-2100分光光度計(jì)產(chǎn)自日本島津，J2-HS型低溫超速離心機(jī)為美國BECKMAN公司產(chǎn)品。

1.4 模型制備醋酸致胃潰瘍大鼠模型制備參照Okabe法[2]。實(shí)驗(yàn)大鼠禁食

不禁水24h，3%戊巴比妥鈉1 ml/kg腹腔注射麻醉，自劍突正中向下沿腹中線剪約2 cm開口，輕輕拉出胃，將直徑5 mm、長30mm的玻管垂直放于胃前壁竇體交界漿膜面上，向管內(nèi)加入冰醋酸0.1ml，接觸1min后用棉簽吸干，0.9%氯化鈉注射液沖洗后，將胃輕輕送回，并以大網(wǎng)膜包裹，逐層縫合腹膜、腹壁肌層及皮膚，再次消毒。

1.5 分組和給藥將手術(shù)成功的100只大鼠隨機(jī)分成5組，即模型組(給予0.9%氯化鈉溶液)，養(yǎng)胃顆粒低中高劑量組（1.5、3.0、4.5 g/kg）以及雷尼替丁陽性對照組（5 mg/kg），每組20只。未進(jìn)行手術(shù)的20只大鼠作為空白對照組(給予0.9%氯化鈉溶液)。所有大鼠正常飼養(yǎng)，術(shù)后第2天開始給藥，每天給藥1次，給藥體積為10 ml/kg，連續(xù)給藥14 d。

1.6 各項(xiàng)指標(biāo)的檢測在給藥結(jié)束后禁食不禁水1 d，水合氯醛麻醉，腹腔靜脈采血于抗凝管中，離心分離血清，－20℃貯存，留待測定SOD、MDA。大鼠剖腹，分別結(jié)扎賁門、幽門端后取出胃，沿胃大彎剪開，將其外翻倒掉內(nèi)容物，再用吸管輕輕沖掉食物殘?jiān)?，將胃平置于平皿上，在顯微鏡下觀察潰瘍情況，測量潰瘍長徑(DL)和短徑(DS)。

1.6.1 潰瘍面積(S)和潰瘍愈合百分率計(jì)算按照公式計(jì)算S=1/4×DL×DS×，式中取3.14。用潰瘍的最長徑和最短徑的均值表示潰瘍指數(shù)，計(jì)算潰瘍愈合百分率。潰瘍愈合百分率=(對照組潰瘍指數(shù)均值總和―實(shí)驗(yàn)組潰瘍指數(shù)均值總和)/對照組潰瘍指數(shù)均值總和×100%。

1.6.2 大鼠血清SOD和MDA測定將采集的血清離心，檢測操作按試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.7 統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較多組比較采用檢驗(yàn)，多組間兩兩比較采用LSD-檢驗(yàn)。＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 養(yǎng)胃顆粒對胃潰瘍大鼠潰瘍愈合百分率的影響?zhàn)B胃顆粒各劑量組大鼠潰瘍面積均較模型組顯著降低（＜0.05），并與給藥劑量呈現(xiàn)反比；潰瘍愈合百分率則隨著養(yǎng)胃顆粒給藥劑量的增加而升高。其中養(yǎng)胃顆粒高劑量組對潰瘍面積和潰瘍愈合百分率的影響與陽性對照雷尼替丁組相似，見表1。

2.2 養(yǎng)胃顆粒對胃潰瘍大鼠血清SOD活性和MDA含量的影響模型組大鼠血清SOD活性較正常對照組顯著降低，而MDA含量則相反，表現(xiàn)為顯著升高（＜0.01）。養(yǎng)胃顆粒各劑量組大鼠血清SOD活性均較模型組顯著升高（＜0.05），并呈現(xiàn)劑量依賴性。而血清MDA含量則隨著養(yǎng)胃顆粒給藥劑量的增加而減少（＜0.05)。同時，養(yǎng)胃顆粒高劑量組對胃潰瘍大鼠血清SOD活性和MDA含量的影響與陽性對照雷尼替丁組相似。見表2。

3 討論

胃潰瘍的發(fā)生是對黏膜的侵襲因素和黏膜的防御機(jī)制平衡失調(diào)所致[3]。胃黏膜具有豐富的血供，在各種應(yīng)激反應(yīng)、胃黏膜缺血或化學(xué)物質(zhì)作用時，可產(chǎn)生大量的氧自由基，很容易造成微循環(huán)障礙。在胃黏膜損害中，酶系統(tǒng)和非酶系統(tǒng)產(chǎn)生大量氧自由基，氧自由基與膜內(nèi)多價不飽和脂肪酸結(jié)合造成脂質(zhì)過氧化損害，產(chǎn)生MDA等脂質(zhì)過氧化物。同時胃黏膜含有高濃度非蛋白質(zhì)巰基，氧自由基可作用于巰基使蛋白質(zhì)變性、酶失活，從而導(dǎo)致黏膜損傷。SOD廣泛存在于體內(nèi)各組織中，是清除氧自由基的主要酶。SOD能有效地清除氧自由基從而抑制胃黏膜中的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，并能穩(wěn)定細(xì)胞膜。機(jī)體內(nèi)SOD活性與脂質(zhì)過氧化反應(yīng)產(chǎn)生的分解產(chǎn)物如MDA濃度之間的比例，不僅可以反映機(jī)體局部或整體的炎癥反應(yīng)情況，也可反映機(jī)體抗氧化反應(yīng)的能力。目前大多通過檢測外周血中SOD活性及MDA濃度的變化來反映整個機(jī)體的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)和抗脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的能力。本實(shí)驗(yàn)通過冰醋酸破壞胃竇壁制成大鼠胃潰瘍模型，結(jié)果表明模型組大鼠胃潰瘍面積較大，損傷嚴(yán)重，說明實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭苽涑晒?。同時，模型大鼠的外周血中SOD活性顯著低于正常大鼠，MDA含量顯著高于正常大鼠，進(jìn)一步證實(shí)胃潰瘍的發(fā)病機(jī)理中，氧自由基誘發(fā)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)起著重要作用。

養(yǎng)胃顆粒主要由黃芪、白芍、玄胡及甘草等中藥組成?，F(xiàn)代藥理研究證實(shí)[4]，黃芪所含成分黃芪多糖具有明顯提高白細(xì)胞介素-2(IL-2)活性、增強(qiáng)調(diào)節(jié)機(jī)體免疫能力、促進(jìn)細(xì)胞生長和再生、改善機(jī)體微循環(huán)、促進(jìn)黏膜修復(fù)等多種功能[5]；白芍的有效成分芍藥苷具有抗炎作用，并可增強(qiáng)機(jī)體免疫功能；玄胡的主要成分去氫延胡索甲素能減少胃液分泌，降低胃酸及胃蛋白酶的量，對胃潰瘍有很好的治療作用，并且延胡索乙素具有較好

表1 養(yǎng)胃顆粒對胃潰瘍大鼠潰瘍愈合百分率的影響

表2 養(yǎng)胃顆粒對胃潰瘍大鼠血清SOD活性和MDA含量的影響

的鎮(zhèn)痛鎮(zhèn)靜作用；而甘草中的有效成分甘草次酸具有保護(hù)胃黏膜的作用。因此將上述藥物配伍組成制劑具有修復(fù)胃黏膜和抑制胃液分泌的作用，從而有治療胃潰瘍之功效。而本實(shí)驗(yàn)結(jié)果則進(jìn)一步表明，養(yǎng)胃顆粒對冰醋酸所致大鼠潰瘍具有明顯的治療作用，能顯著減小潰瘍面積，提高潰瘍愈合百分率；其作用機(jī)制可能與其升高血清SOD活性，降低血清MDA含量，從而提高機(jī)體抵抗脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的能力有關(guān)。當(dāng)然，對于這一效應(yīng)是否是由單一組分所致，亦或是聯(lián)合效應(yīng)所致還有待進(jìn)一步研究。本研究進(jìn)一步為養(yǎng)胃顆粒用于臨床胃潰瘍治療提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，具有一定的臨床意義。

[1]都興東.養(yǎng)胃顆粒對胃潰瘍模型鼠的治療作用研究[J].醫(yī)藥導(dǎo)報,2006,25(11): 1125-1126.

[2]Okabe S,Roth JL,Pfeiffer CJ.A method for experimental,penetrating gastric and duodenal ulcer in rats[J].Am J Dig Dis, 1971,16(3):277-284.

[3]Banic M,Malfertheiner P,Babic Z,et al. Historical impact to drive research in peptic ulcer disease[J].Dig Dis,2011,29(5): 444-453.

[4]沈映君.中藥藥理學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:880.

[5]王辰,侯連兵,黃芪新劑型的臨床應(yīng)用[J].醫(yī)藥導(dǎo)報,2006;25(6):526-528.

10.3969/j.issn.1671-0800.2014.04.035

R332

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1671-0800(2014)04-0432-03

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