中藥復(fù)方劑對小鼠抗應(yīng)激作用的研究

晏文梅，郭玲玲，張曉秋，王 璐，徐曉陽，陳熠夕,張玉紅，陳 夢，杜改梅

(金陵科技學(xué)院動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，江蘇 南京 210038)

應(yīng)激一詞由Selye 1936年第一次提出，應(yīng)激的過程就是全身適應(yīng)性綜合癥。機體在其生命過程中不斷經(jīng)受著應(yīng)激,從一個穩(wěn)態(tài)向另一個穩(wěn)態(tài)轉(zhuǎn)變，這也是生物進化的必要過程。但在畜牧研究中更加關(guān)注的是應(yīng)激帶來的危害，并努力尋找解決的辦法，這對動物的生產(chǎn)和福利都有重要的意義。動物的應(yīng)激行為可能與動物飼養(yǎng)環(huán)境和飼養(yǎng)管理人員等有關(guān)。畜牧業(yè)中的動物應(yīng)激大多是人為造成的。應(yīng)激有熱應(yīng)激、冷應(yīng)激等，其中又以熱應(yīng)激最為常見，溫度是一項十分重要的環(huán)境指標(biāo)，極端環(huán)境(高溫或低溫)都可能會導(dǎo)致動物體產(chǎn)生應(yīng)激狀態(tài)，并且能導(dǎo)致死亡率升高和生產(chǎn)性能下降，鑒于熱應(yīng)激對動物造成的危害，國內(nèi)外學(xué)者廣泛研究了熱應(yīng)激給動物造成的規(guī)律性變化，為防止熱應(yīng)激的產(chǎn)生和緩解熱應(yīng)激的不良后果，積累了大量的基礎(chǔ)資料[1]。應(yīng)激所帶來的社會問題日漸受到關(guān)注，而隨著中藥的再次崛起，越來越多的研究將中藥復(fù)方劑和應(yīng)激聯(lián)系起來[2-3]。無論是在自然熱應(yīng)激條件下，還是在人工熱應(yīng)激條件下，抗熱應(yīng)激中藥雖然顯著提高了飼料轉(zhuǎn)化率，緩解了熱應(yīng)激對動物的不良反應(yīng)，提高了動物的免疫功能和生產(chǎn)性能，但這其實是在熱應(yīng)激條件下進行的試驗，屬治未病的既病防變，而非未病先防。而且，中西醫(yī)結(jié)合的研究應(yīng)用尤其多，所以抗熱應(yīng)激中藥未病先防的作用在動物生產(chǎn)中的應(yīng)用前景廣泛，中西醫(yī)結(jié)合仍可能成為研究熱點。

本試驗在小鼠的飼料中添加中草藥復(fù)方劑，通過對應(yīng)激條件下和對照組的各種生理生化反應(yīng)的系統(tǒng)進行研究，探索熱應(yīng)激以及抗熱應(yīng)激中草藥復(fù)方劑的作用機理，為更好地解決動物生產(chǎn)中的應(yīng)激現(xiàn)象和開發(fā)中草藥資源提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

選取健康剛斷奶昆明小鼠，平均體重約為(17±0.3) g，采用自然通風(fēng)，自由采食和飲水。

1.2 試驗方法

將斷奶小鼠隨機分成3組，每組7只，對照組1(C1)、對照組2(C2)、試驗組(G2)，試驗期為15 d，試驗開始前稱小鼠體重和飼料總量，記錄、標(biāo)記與組號一致的標(biāo)號在飼料袋中。將試驗用由遠(yuǎn)志等多種藥物配伍組合而成的中藥復(fù)方制劑采用常規(guī)方法進行煎制，使其終濃度達到1 mg/mL。對照組飼喂正?；A(chǔ)飼糧與飲水，試驗組除此之外還飼喂中藥，每天灌服3 mL，連續(xù)飲用10 d。每天觀察試驗動物的采食及死亡情況。試驗后10 d，對照組C2和試驗組均進行10 min噪音刺激和15 min熱水運動(30 ℃)，連續(xù)刺激5 d，對照組C1不做任何處理。觀察記錄小鼠逃避反應(yīng)，游泳維持時間。試驗期間，每間隔5 d稱重1次，稱量飼料剩余量并記錄。

1.3 樣品采集

將小鼠進行乙醚麻醉后處死，稱量體重、日增重、采食量和料肉比。

2 結(jié)果與分析

2.1 中藥復(fù)方劑對應(yīng)激小鼠體重的影響

由圖1可見，灌服中藥復(fù)方制劑組的小鼠體重與對照組相比,有一定的升高趨勢,但差異不顯著,這可能與動物模型的選擇及處理時間等因素有關(guān)。

圖1 中藥復(fù)方劑對應(yīng)激小鼠體重的影響Fig.1 The effect of traditional Chinese medicine compound on body weight of stressed mice

2.2 中藥復(fù)方劑對應(yīng)激小鼠體增重的影響

由圖2可見，與對照組相比，試驗組小鼠的體增重在3個時間段均有升高趨勢，且在10～15 d和0～15 d顯著高于對照組C2。對照組C2在試驗后期體增重明顯降低，也可能與應(yīng)激處理有關(guān)。

圖2 中藥復(fù)方劑對應(yīng)激小鼠體增重的影響Fig.2 The effect of traditional Chinese medicine compound on body weight gain of stressed mice

2.3 中藥復(fù)方劑對應(yīng)激小鼠日增重的影響

由圖3可見，試驗組小鼠在0～5 d日增重與對照組相近，但在5～10 d和10～15 d試驗組小鼠的日增重明顯高于對照組C2；對照組C2在10～15 d日增重較前日明顯減少，這可能是應(yīng)激或更換飼料所致。

圖3 中藥復(fù)方劑對應(yīng)激小鼠日增重的影響Fig.3 The effect of traditional Chinese medicine compound on daily body weight gain of stressed mice

2.4 中藥復(fù)方劑對應(yīng)激小鼠采食量的影響

由圖4可見，小鼠采食量日趨減少，尤其是應(yīng)激試驗期間(10～15 d)，3組小鼠采食量均有減少。整個試驗期間0～15 d中藥處理組小鼠的采食量較對照組高，這表明中藥可以抑制應(yīng)激對消化能力的影響。

圖4 中藥復(fù)方劑對應(yīng)激小鼠采食量的影響Fig.4 The effect of traditional Chinese medicine compound on food consumption of stressed mice

2.5 中藥復(fù)方劑對應(yīng)激動物飼料轉(zhuǎn)化率的影響

由圖5可見，中藥處理組小鼠的飼料轉(zhuǎn)化率在5～10 d時明顯高于對照組C1和C2，10～15 d時明顯高于對照組C2。這表明中藥復(fù)方劑可以抑制小鼠的應(yīng)激反應(yīng)，可以提高小鼠的生產(chǎn)性能。

圖5 中藥復(fù)方劑對應(yīng)激小鼠飼料轉(zhuǎn)化率的影響Fig.5 The effect of traditional Chinese medicine compound on feed conversion ratio of stressed mice

3 結(jié)論與討論

熱應(yīng)激對動物采食量的影響因動物種類、年齡和應(yīng)激程度存在較大差異。一般認(rèn)為，熱應(yīng)激往往導(dǎo)致動物采食量明顯下降。研究報道使用具有開胃健脾、清熱解暑的中草藥飼料添加劑可以緩解熱應(yīng)激對豬生產(chǎn)性能的影響，提高豬的飼料轉(zhuǎn)化率[4]。本研究結(jié)果也表明，中草藥飼料添加劑可以緩解應(yīng)激所導(dǎo)致的飼料轉(zhuǎn)化率降低，這與報道相一致。處于熱應(yīng)激期間的動物，其免疫、生產(chǎn)和繁殖性能降低，而保持呼吸、物質(zhì)循環(huán)和體溫調(diào)節(jié)等基本功能；因此，導(dǎo)致機體營養(yǎng)物質(zhì)和身體儲備從具有競技意義的形狀轉(zhuǎn)向維持基本生存急需的基礎(chǔ)功能，進而影響動物的生產(chǎn)性能。持續(xù)熱應(yīng)激將造成采食量下降，動物機體營養(yǎng)不良，體重下降，機體儲備能量耗竭，免疫力遭到破壞，此不僅影響生產(chǎn)性能，甚至?xí)鸺膊∩踔了劳鯷5-6]。本研究也表明這樣的結(jié)果，對照組應(yīng)激處理后的小鼠在試驗后期采食量和日增重等生產(chǎn)性能明顯下降。而中藥處理后小鼠的抗應(yīng)激能力增強，日增重和采食量不會受到應(yīng)激的影響，與對照組相比顯著升高，這充分表明了該中藥復(fù)方劑的作用是明顯的，可以有效抑制應(yīng)激對小鼠生產(chǎn)性能和消化功能的影響。

熱應(yīng)激可使蛋雞的血鈉、血鉀、血氯、血磷的含量降低，而使用中藥復(fù)方劑能有效緩解蛋雞的熱應(yīng)激[7]。夏季高溫高濕可以降低母豬采食量，營養(yǎng)不足從而導(dǎo)致一系列疾病。而利用清熱解毒、除濕、益氣養(yǎng)陰等中藥方劑可減輕熱應(yīng)激對母豬的影響[8-9]。研究報道表明，在日糧中添加一些去熱、瀉火、解毒、涼血解暑的中草藥(如石膏、板藍根、蒲公英等)可促進體表毛細(xì)血管擴張，加速體熱釋放，增加血管通透性，減少血容量，降低腦顱內(nèi)壓，稀釋血液達到降低應(yīng)激的作用[3,10]。而在飼料中添加中藥復(fù)方劑，可以緩解熱應(yīng)激對機體的影響，降低死亡率。本試驗研究發(fā)現(xiàn)，小鼠應(yīng)激處理后采食量和體重有下降趨勢，但中藥復(fù)方劑處理組小鼠體重和采食量均顯著高于對照組，這可能是由于應(yīng)激會導(dǎo)致動物的消化能力降低，從而導(dǎo)致體重和采食量降低，而抗應(yīng)激中藥復(fù)方劑能緩解這種應(yīng)激反應(yīng)，使小鼠的采食量和體重高于對照組。本研究表明，該中藥復(fù)方制劑具有較好的抗應(yīng)激作用，但其作用機制尚不清楚，有待進一步深入研究。

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