高效液相色譜法檢測(cè) (S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽的純度

郝玉紅 朱力敏 薛韌婕 / 上海市計(jì)量測(cè)試技術(shù)研究院

高效液相色譜法檢測(cè) (S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽的純度

郝玉紅 朱力敏 薛韌婕 / 上海市計(jì)量測(cè)試技術(shù)研究院

用高效液相色譜法定量分析(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽的純度。用Agilent 1100型高效液相色譜儀，色譜柱Xterra C18（5 μm，4.6 mm×250 mm），流動(dòng)相為20%乙腈—80%，緩沖液: 1000 mL水+ 5.0 g庚烷磺酸鈉；檢測(cè)波長(zhǎng)為210 nm，流量為0.7 mL·min-1，柱溫30 ℃，對(duì)(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽純度進(jìn)行定量測(cè)定。相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差0.15%，標(biāo)準(zhǔn)回收率99.8%～100.2%，方法重復(fù)性好，定量準(zhǔn)確度高。

高效液相色譜法；(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽

0 引言

(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽（簡(jiǎn)稱(chēng)ABAH），為白色或類(lèi)白色固體粉末，主要用于抗癲癇、抗驚厥藥物中間體。本文采用高效液相色譜法測(cè)定其含量，方法可靠，操作簡(jiǎn)單，靈敏度高，重現(xiàn)性好，為控制(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽的質(zhì)量提供了切實(shí)可行的方法。

1 材料與方法

1.1 材料、儀器和試劑

材料：樣品(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽由杭州瑞旭產(chǎn)品技術(shù)有限公司提供；

高效液相色譜儀：美國(guó)安捷倫科技有限公司Agilent 1100，配QuatPump (G1311A)四元梯度輸液泵，VWD (G1314A)可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器，自動(dòng)進(jìn)樣器；

水為二次蒸餾水；乙腈為色譜純；(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品為進(jìn)口品。

1.2 分析方法

1.2.1 色譜條件

色譜柱：Xterra C18，5 μm，4.6 mm×250 mm；柱溫：30 ℃；流量：0.7 mL·min-1；進(jìn)樣量：20 μL；檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm；流動(dòng)相：A：緩沖液: 1 000 mL水+ 5.0 g庚烷磺酸鈉；B：乙腈。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

精密稱(chēng)取干燥至恒重的(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品50 mg，置50 mL容量瓶中，加流動(dòng)相配制成質(zhì)量濃度為1 000 mg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液。取適量經(jīng)針式過(guò)濾器過(guò)濾后，備用。

1.2.3 試樣溶液的配制

與1.2.2同樣方法配制試樣。

1.2.4 測(cè)試步驟

按1.2.1所列色譜條件，待儀器穩(wěn)定后，注入20 μL經(jīng)1.2.2處理好的已知純度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，根據(jù)其已知濃度和測(cè)出的色譜峰面積，計(jì)算出校正因子，然后再按同樣的方法進(jìn)行試樣溶液，進(jìn)行試樣純度測(cè)定。

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

使用紫外分光光度計(jì)，通過(guò)對(duì)樣品溶液的波長(zhǎng)掃描發(fā)現(xiàn)，(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽在波長(zhǎng)210 nm處有特征峰，遂選檢測(cè)波長(zhǎng)為210 nm。

2.2 流動(dòng)相的選擇與方法優(yōu)化

(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽具有很好的水溶性和較強(qiáng)的極性。初篩儀器條件時(shí)，以10%乙腈-90%緩沖液（1 000 mL水+ 5.0 g庚烷磺酸鈉）的流動(dòng)相比例進(jìn)行試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)試樣保留時(shí)間僅3.7 min（如圖1所示），在液相柱上基本沒(méi)有保留。為了更好地分離試樣和雜質(zhì)，重新調(diào)整流動(dòng)相初始比例為20%乙腈，保留時(shí)間延長(zhǎng)至5.7 min（如圖2所示），在保證試樣和雜質(zhì)、溶劑分離度的前提下，峰型尖銳，對(duì)稱(chēng)性好。因此，確定以20%乙腈-80%緩沖液為流動(dòng)相比例。

圖1 10%乙腈為流動(dòng)相的(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽的高效液相色譜圖

圖2 20%乙腈為流動(dòng)相的(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽的高效液相色譜圖

2.3 精密度試驗(yàn)

使用該分析方法對(duì)3個(gè)試樣各進(jìn)行5次測(cè)定，RSD在0.12%～0.18%之間，精密度高，重復(fù)性好。

2.4 回收率試驗(yàn)

取相同量的同一批(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽試樣6份，分別加入精密稱(chēng)量的(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品適量，進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽回收率在99.8%～100.2%之間。

3 結(jié)語(yǔ)

采用C18柱，以20%乙腈-80%緩沖液（1 000 mL水+5.0 g庚烷磺酸鈉）為流動(dòng)相的比例，檢測(cè)波長(zhǎng)210 nm,流速0.7 mL·min-1，柱溫30 ℃的色譜條件下，對(duì)(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽純度進(jìn)行測(cè)定。本方法簡(jiǎn)便、快速、結(jié)果可靠而且重復(fù)性好，可作為(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽常規(guī)檢測(cè)方法。

[1] 于世林. 高效液相色譜方法及應(yīng)用[M]. 北京: 化學(xué)工業(yè)出版社, 2000.

[2] 盧佩章, 張玉奎, 梁鑫淼. 高效液相色譜法及其專(zhuān)家系統(tǒng)[M]. 沈陽(yáng):遼寧科學(xué)技術(shù)出版社, 1992.

[3] 朱彭齡, 云自厚, 謝光華. 現(xiàn)代液相色譜[M]. 蘭州: 蘭州大學(xué)出版社, 1989.

Purity of （S）-2-Aminobutyramide hydrochloride by high performance liguid chromatograph

Hao Yuhong，Zhu Limin，Xue Renjie
（Shanghai Institute of Measurement and Testing Technology）

Purity analysis of (S)-2-Aminobutyramide hydrochloride was established by high performance liquid chromatography with Agilent 1100, Xterra C18（5 μm, 4.6 mm×250 mm）column, mobile phase was acetonitrile-water, detection wavelength was 210 nm, flow rate was 0.7 mL·min-1, column temperature was 30 ℃. The method showed repeatability and relative standard deviation was 0.15%, and the standard recoveries were 99.8%-100.2%. These quantitative results showed high accuracy.

high performance liguid chromatograph；(S)-2-Aminobutyramide hydrochloride；purity