浙北部分地區(qū)豬偽狂犬病血清學(xué)調(diào)查

何家梁，李江濤，張金衛(wèi)，胡 亮，沈群華

（1.浙江大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，浙江杭州 310058；2.湖州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，浙江湖州 313000；3.湖州市畜牧獸醫(yī)局，浙江湖州 313000；4.湖州市吳興區(qū)農(nóng)林局，浙江湖州 313002）

浙北部分地區(qū)豬偽狂犬病血清學(xué)調(diào)查

何家梁1，3，李江濤2*，張金衛(wèi)2，胡 亮4，沈群華3

（1.浙江大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，浙江杭州 310058；2.湖州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，浙江湖州 313000；3.湖州市畜牧獸醫(yī)局，浙江湖州 313000；4.湖州市吳興區(qū)農(nóng)林局，浙江湖州 313002）

應(yīng)用IgG抗體ELISA檢測(cè)方法，對(duì)浙北部分地區(qū)的1 080份豬血清進(jìn)行偽狂犬病病毒抗體檢測(cè)。結(jié)果顯示，692份育肥豬血清樣本中共檢出101份陽性樣本，陽性率達(dá)到14.60%，388份種豬血清樣本中檢出32份陽性樣本，陽性率達(dá)到8.25%。結(jié)果表明，浙北部分地區(qū)養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）存在豬偽狂犬病感染的潛在危害，應(yīng)及時(shí)采取必要的綜合防控措施。

豬偽狂犬?。谎鍖W(xué)調(diào)查；ELISA；綜合防控

豬偽狂犬?。≒seudorabies）是由皰疹病毒科、α-皰疹病毒亞科的偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）感染引起的多種家畜和野生動(dòng)物以發(fā)熱、奇癢（豬除外）和腦脊髓炎等為主要特征的一種急性、高度接觸性傳染病，其中以豬的感染最為普遍，其主要引起母豬的繁殖障礙，主要表現(xiàn)為流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎等；新生仔豬發(fā)生感染時(shí)，死亡率可高達(dá)100%；此外，育肥豬感染往往致使其生長(zhǎng)緩慢，種公豬感染則導(dǎo)致精液品質(zhì)下降甚至喪失種用價(jià)值［1］。近年該病的發(fā)生呈不斷上升的趨勢(shì)，已成為當(dāng)前嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)的重要疫病之一，給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。近年來的一些研究表明，育肥豬的偽狂犬病血清陽性率為20%～97%［2-3］，為了了解浙北地區(qū)豬偽狂犬病的感染流行情況，筆者在浙北部分地區(qū)養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）采集豬血清1 080份，應(yīng)用IgG抗體檢測(cè)ELISA試劑盒進(jìn)行PRV抗體的檢測(cè)，根據(jù)結(jié)果提出相應(yīng)的防控措施。

1 材料與方法

1.1 待檢血清

采血前詢問場(chǎng)（戶）畜主，選擇未注射豬偽狂犬病疫苗的養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）的豬只，經(jīng)前腔靜脈采血，編號(hào)記錄，血樣置3 000 r·min-1離心5 min，分離血清，并分裝于經(jīng)滅菌后的Eppendorf管中，置于-20℃冷凍保存待檢。本次共采集1 080份血清樣品，其中育肥豬血清樣品692份，種豬血清樣品388份。

1.2 主要試劑

豬偽狂犬病毒IgG抗體檢測(cè)ELISA試劑盒，購(gòu)自深圳市康百得生物科技有限公司。

1.3 PRV陽性抗體的檢測(cè)

按照IgG抗體檢測(cè)ELISA試劑盒（酶聯(lián)免疫法）說明書操作，按待檢血清稀釋、加樣、37℃恒溫避光反應(yīng)、洗滌、加酶標(biāo)記物和顯示反應(yīng)，最后以空白對(duì)照調(diào)零，用酶標(biāo)儀于450 nm波長(zhǎng)讀取各孔吸光度（D）值。

1.4 結(jié)果判定

空白對(duì)照孔D值＜0.05，陰性對(duì)照孔D值≤0.10，陽性對(duì)照孔D值≥0.3時(shí)，實(shí)驗(yàn)成立。計(jì)算Cut-off值（COV），COV=陰性對(duì)照平均D值× 2.1（陰性對(duì)照均D值＜0.08時(shí)按0.08計(jì)）。檢測(cè)樣本D值≥COV值時(shí)，判為樣品豬偽狂犬病毒抗體陽性；檢測(cè)樣本D值＜COV值時(shí)，判為樣品豬偽狂犬病毒抗體陰性。

2 結(jié)果和分析

本次檢測(cè)1 080份豬血清樣品，共檢出144份PRV抗體陽性血清樣本，平均陽性率為13.33%，結(jié)果詳見表1和表2。

表1 育肥豬血清樣品PRV抗體檢測(cè)結(jié)果

表2 種豬血清樣品PRV抗體檢測(cè)結(jié)果

3 小結(jié)與討論

3.1 血清學(xué)調(diào)查結(jié)果分析

偽狂犬病仍然是我國(guó)當(dāng)前養(yǎng)豬業(yè)的主要威脅性疫病之一，近年來我國(guó)不少地區(qū)暴發(fā)流行性偽狂犬病，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。從血清學(xué)調(diào)查結(jié)果來看，所有采集血清樣品的規(guī)模場(chǎng)、散養(yǎng)戶都有不同程度的偽狂犬病病毒感染，從692份育肥豬血清樣本中共檢出101份陽性樣本，陽性率達(dá)到14.60%，338份種豬血清樣本中檢出43份陽性樣本，陽性率達(dá)到11.08%。從實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)數(shù)據(jù)來看，規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)陽性率略低于散養(yǎng)戶陽性率，這估計(jì)與散養(yǎng)戶普遍存在的生豬飼養(yǎng)條件差、忽視消毒防疫及防疫技術(shù)力量薄弱等因素有關(guān)。Duffy等［4］的研究證實(shí)，偽狂犬病病毒在育肥豬群中的循環(huán)是該病擴(kuò)散的危險(xiǎn)因素，因此，養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）應(yīng)對(duì)育肥豬的偽狂犬病毒感染情況足夠重視。

在本次調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)種豬和后備種豬也存在著不同程度的偽狂犬病病毒感染，從388份血清樣本中共檢出32份陽性樣本，平均陽性率達(dá)到8.25%。由于規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)一般都是采取“自繁自養(yǎng)”方式，若種豬感染偽狂犬病則該病將在養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)持續(xù)存在［5-6］。種豬感染多呈隱性感染狀態(tài)且長(zhǎng)期帶毒，帶毒豬可通過唾液、尿液、鼻分泌物、乳汁及精液等持續(xù)向外排毒，從而成為規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)偽狂犬病無法徹底凈化的根源。

3.2 綜合防控措施

加強(qiáng)新豬引進(jìn)管理。散養(yǎng)戶一般都是購(gòu)入豬苗進(jìn)行育肥，一批豬出售后購(gòu)入第二批，為了降低豬偽狂犬病感染風(fēng)險(xiǎn)，散養(yǎng)戶應(yīng)在一批豬售出后對(duì)場(chǎng)地徹底消毒，在豬偽狂犬病凈化的豬場(chǎng)引進(jìn)豬苗，同時(shí)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，降低養(yǎng)殖密度。規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)在引進(jìn)新豬時(shí)，必須先隔離，在引進(jìn)前或到圈后2周內(nèi)采血作血清學(xué)檢查，確定是未受PRV感染豬再混群飼養(yǎng)。隨著畜牧業(yè)產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程的發(fā)展，規(guī)模豬場(chǎng)應(yīng)嚴(yán)格落實(shí)引種隔離檢疫制度和偽狂犬病凈化措施，堅(jiān)持自繁自養(yǎng)，實(shí)行全進(jìn)全出。

加強(qiáng)免疫。疫苗接種是預(yù)防本病發(fā)生的重要手段。在本次采集樣本的養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）中，有部分規(guī)模豬場(chǎng)無嚴(yán)格的防疫管理制度和生物衛(wèi)生安全體系，對(duì)該病的危害性缺乏了解，常年只注重豬口蹄疫、豬瘟等常規(guī)強(qiáng)制免疫病種的免疫，實(shí)施的免疫病種沒有根據(jù)疫情實(shí)際作相應(yīng)的調(diào)整，本次血清學(xué)調(diào)查涉及到的養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）均有不同程度的豬偽狂犬病病毒感染，建議將PRV疫苗納入基礎(chǔ)免疫計(jì)劃中，同時(shí)建立健全防疫管理制度和疫病檢疫檢測(cè)體系，制定科學(xué)合理的免疫程序，選擇合適的疫苗，定期開展免疫成效檢測(cè)、分析，血清學(xué)陽性或病原學(xué)檢測(cè)陽性但未見明顯臨床癥狀的養(yǎng)豬場(chǎng)，盡可能淘汰帶毒豬只，力爭(zhēng)使豬群長(zhǎng)期處于有效免疫狀態(tài)。

加強(qiáng)日常飼養(yǎng)管理。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，改善日糧營(yíng)養(yǎng)水平，控制養(yǎng)殖密度，改善飼養(yǎng)環(huán)境；加強(qiáng)外來人員和運(yùn)輸車輛的管理，禁止飼養(yǎng)員串棟；防止飼料發(fā)霉；做好豬瘟、藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒病、傳染性胃腸炎和流行性腹瀉等傳染病的控制，防止繼發(fā)、病發(fā)疫?。粚?duì)病死豬進(jìn)行無害化處理，開展滅源、消毒、滅鼠、防暑降溫等綜合防治措施。

［1］ 殷震，劉景華.動(dòng)物病毒學(xué)［M］.2版.北京：科學(xué)出版社，1997：329-330.

［2］ 王科文，楊漢春.我國(guó)重點(diǎn)養(yǎng)豬區(qū)域偽狂犬病毒感染血清學(xué)調(diào)查報(bào)告［J］.養(yǎng)豬，2010（2）：45-47.

［3］ HallW F，Weigel R M，Siegel A M，et al.Prevalence of pseudo rabies virus in fection and associated infections in six large swine herds in Illinois［J］.Journal of American Veterinary Medical Association，1991，198（11）：1927-1931.

［4］ Duffy S J，Morrison R S，Thaw ley D G.Spears of pseudo rabies virus among breeding swine in quarantined herds［J］. Journal of American Veterinary Medical Association，1991，199（1）：61-65.

［5］ 劉秀清，郭鑫，趙榮茂，等.豬偽狂犬病野毒感染的血清學(xué)調(diào)查［J］.中國(guó)獸醫(yī)雜志，2006，42（7）：27.

［6］ 王瓊秋，李阿黑，蘇寶昆，等.綠春縣2003-2008年豬偽狂犬病血清流行病學(xué)調(diào)查［J］.中國(guó)畜禽種業(yè)，2009（3）：35-36.

（責(zé)任編輯：盧福莊）

S 851.31+3

A

0528-9017（2014）09-1457-02

2014-04-01

何家梁（1986-），男，浙江湖州人，在職研究生，研究方向?yàn)閯?dòng)物疫病綜合防控。

李江濤。E-mail：ljt9322@163.com。

文獻(xiàn)著錄格式：何家梁，李江濤，張金衛(wèi)，等.浙北部分地區(qū)豬偽狂犬病血清學(xué)調(diào)查［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014（9）：1457-1458.