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    影響羊胚胎移植受胎率的主要因素

    2014-03-08 07:08:16袁東波尹念春陳家樹
    養(yǎng)殖與飼料 2014年9期

    袁東波尹念春陳家樹

    1.四川省南充市動物疫病預(yù)防控制中心,四川南充 637000;2.四川省遂寧市動物疫病預(yù)防控制中心,四川遂寧 629000;3.四川省南充市農(nóng)牧局,四川南充 637000

    影響羊胚胎移植受胎率的主要因素

    袁東波1尹念春2陳家樹3

    1.四川省南充市動物疫病預(yù)防控制中心,四川南充 637000;2.四川省遂寧市動物疫病預(yù)防控制中心,四川遂寧 629000;3.四川省南充市農(nóng)牧局,四川南充 637000

    近年來,為大力發(fā)展養(yǎng)羊產(chǎn)業(yè),豐富我國優(yōu)質(zhì)羊品種資源,減少從國外直接引種的風險,羊胚胎移植技術(shù)廣泛應(yīng)用于養(yǎng)羊生產(chǎn)實踐,在羊純種快速擴繁中取得了良好的效果,然而羊胚胎移植受胎率一直是制約羊純種快速擴繁的重要因素,受到大家的關(guān)注。本文針對影響羊胚胎移植受胎率的主要因素進行了分析。

    1 供卵及胚胎質(zhì)量

    供卵及胚胎質(zhì)量對移植能否成功關(guān)系密切。即使密切同期化的供受體,如果移植了異常胚胎,如細胞卵裂不規(guī)則、細胞固縮、細胞發(fā)育遲緩等,移植后也會失敗。因此,在胚胎移植過程中,對胚胎質(zhì)量的鑒定十分重要。

    1.1 供體羊的年齡不同,卵的質(zhì)量不同

    成年母羊排卵移植后的成功率大于育成羊。在體外培養(yǎng)條件下,成年母羊的胚胎比初情期前幼齡母羊(5~7月齡)的胚胎正常發(fā)育的比例大,發(fā)育快,有較強的生命力。

    1.2 成年母羊處理前的激素內(nèi)環(huán)境

    在性周期的第16天注射孕馬血清促性腺激素(PMSG)后獲得的卵,有90%以上為受精卵,而在性周期的第10天注射PMSG后獲得的卵,其受精卵則低于90%。所以成年母羊處理前的激素內(nèi)環(huán)境決定排卵時的卵泡刺激發(fā)生時間。當卵泡受刺激時,孕酮水平及其存在的時間長短,可能是決定卵質(zhì)量的重要因素。

    1.3 誘發(fā)超數(shù)排卵時的卵巢反應(yīng)

    超數(shù)排卵后卵受精率低,則胚胎采集率和移植妊娠率也低。受精率低經(jīng)常發(fā)生在某一頭供體所排的卵中,甚至出現(xiàn)所有卵都不受精的現(xiàn)象。卵子不受精的原因,可能由于超數(shù)排卵時引起母畜內(nèi)分泌紊亂,排出不成熟的卵子。就胚胎質(zhì)量而言,每個卵巢排8~10個卵為合適。

    1.4 哺乳期泌乳母羊排卵數(shù)較少

    帶羔哺乳母羊的胚胎比干乳期母羊胚胎的生命力低,把這兩種母羊的胚胎相互交換移植后結(jié)果表明,不育的原因出現(xiàn)在供體。

    1.5 不同個體對激素的反應(yīng)差異

    在相同的飼養(yǎng)管理條件下,當注射同等劑量的促性腺激素時,有的個體超排效果很好,排卵很多;有的起不到超數(shù)排卵的效果,只排1個卵;有的沒有發(fā)情表現(xiàn),甚至不排卵。從胚胎培養(yǎng)實驗表明,不同個體的卵,雖處于相同的發(fā)育階段,且在同樣的培養(yǎng)條件下,但卵的活力差異大。經(jīng)驗認為一只供體經(jīng)過超數(shù)排卵處理后,當采集到較多的受精卵,且卵的發(fā)育階段較為一致時,把這些胚胎移植后,常可獲得較高的受胎率,對這樣的母羊可重復(fù)采卵和移植。

    1.6 季節(jié)對超排效果和卵質(zhì)量的影響

    實驗表明秋末冬初效果最佳,早春次之,夏季最差。

    2 胚胎發(fā)育階段與移植部位

    2.1 受體的妊娠率隨移植胚胎日齡的增加而相應(yīng)提高

    3日齡胚胎的移植妊娠率最低,5日齡以后的胚胎對逆境(如溫度的驟變)的耐受力較好。有研究表明,實際胚齡(或者說是子宮環(huán)境)4日齡胚胎移植到受體發(fā)情3天的子宮中比3日齡胚胎移植到發(fā)情3天的子宮中有更高的胚胎存活率。

    2.2 母羊發(fā)情的生殖道內(nèi)部形態(tài)和生理機能變化

    羊的早期胚胎在輸卵管內(nèi)運行滯留的時間約72 h左右,所以72 h前采到的早期胚胎應(yīng)移入輸卵管內(nèi);超過72 h,胚胎進入子宮,由子宮采到的早期胚胎應(yīng)移入子宮內(nèi)。有實驗指出為了提高輸卵管移植胚胎的生存率,滿足在發(fā)情后72 h或更晚時間采胚、受體發(fā)情開始時間與供體相差不超過早晚12 h、移植8細胞胚等條件,大約75%的受體能夠成功妊娠。

    2.3 胚胎移植的部位

    在胚胎移植中,要根據(jù)移入胚胎的日齡、原來所處的部位來決定移植的部位。一般移植部位往往和采集胚胎的部位相對應(yīng)。即從輸卵管采集的胚胎移植到輸卵管,從子宮角采集的胚胎移植到子宮角,才能獲得較好的移植結(jié)果。胚胎移植到輸卵管時,移植到輸卵管深部受胎率高。胚胎移植到子宮角時,5~6日齡的胚胎移植到輸卵管一側(cè)子宮角接合部附近(即子宮角項部)比子宮角中部有較高的存活率,以后隨日齡的增加,胚胎移植的部位可以相應(yīng)移向子宮角基部。胚胎移植到子宮,達到較好受胎率的同步差范圍較輸卵管寬。移植子宮的胚胎,一般是桑椹胚和囊胚。在母羊發(fā)情后的第7天,孕酮在卵巢靜脈內(nèi)的濃度達到最大濃度,并相對恒定地維持到第15天,因此,在母羊發(fā)情稍后時期,供體與受體將可能有一段幅度較大的同步時間,移植成功率較大。

    3 胚胎移植數(shù)量

    移植時胚胎的數(shù)量對受胎率有很大的影響。一般雙胚移植比單胚移植可以獲得更高的受胎率。

    4 胚胎的體外保存

    鮮胚移植時,胚胎從供體取出后到移植給受體之前,在體外有短暫停留和保存的時間,這期間胚胎及其保存液應(yīng)放在密閉的容器內(nèi),防止保存液的蒸發(fā)和污染,維持保存液與胚胎之間的滲透壓和無菌,并在適宜溫度條件下保存胚胎。無論保存時間長短,要求保存后再移植的胚胎有繼續(xù)發(fā)育的能力。在體外培養(yǎng)和保存過程中,pH值的變化對胚胎的生存有較大害處。移植時胚胎在體外的溫度迅速下降,移植成功率隨之下降。受體在25~30℃環(huán)境中,移植的成功率較高,而在5~15℃環(huán)境中,移植的成功率低。

    凍胚移植時,胚胎從超低溫環(huán)境(如液氮罐)中取出后要迅速放到37℃(經(jīng)驗表明解凍溫度調(diào)至38~40℃時有較好緩沖溫度變化的作用)環(huán)境中解凍,以迅速越過低溫打擊區(qū),移植后的成功率才高。

    [1]桑潤滋.動物繁殖生物技術(shù) [M].2版.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2010.6.

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    2014-07-10

    袁東波,男,1980年生,預(yù)防獸醫(yī)學碩士。

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