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    不同性別BALB/c裸小鼠血液學(xué)及臟器系數(shù)觀測

    2014-03-04 05:58:18劉盛來邱毅文鄺少松
    關(guān)鍵詞:小鼠差異

    劉 科, 劉盛來, 楊 林, 邱毅文, 鄺少松, 王 剛

    (廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心, 佛山 528248)

    不同性別BALB/c裸小鼠血液學(xué)及臟器系數(shù)觀測

    劉 科, 劉盛來, 楊 林, 邱毅文, 鄺少松, 王 剛

    (廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心, 佛山 528248)

    目的 測定SPF級BALB/c裸小鼠血液學(xué)參數(shù),臟器重量、臟器系數(shù),并進(jìn)行性別間比較。方法 選取10周齡SPF級BALB/c裸小鼠80只,雌雄各半。40只采集血液,運(yùn)用血液分析儀測定血液常規(guī)指標(biāo);40只活體稱重,采集血液,運(yùn)用全自動生化分析儀測定血生化指標(biāo),并采集臟器測定臟器重量,計(jì)算臟器系數(shù)。結(jié)果 雌雄裸小鼠測定項(xiàng)目比較,①雄性白細(xì)胞數(shù)、平均血紅蛋白量、血小板、淋巴細(xì)胞顯著高于雌性、紅細(xì)胞顯著低于雌性(P<0.01),紅細(xì)胞平均體積、血小板壓積與雌性差異達(dá)到顯著水平(P<0.05)。②雄性堿性磷酸酶、肌酸激酶、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶顯著高于雌性(P<0.01),白蛋白顯著高于雌性(P<0.05)。③雄性體質(zhì)量、腎、膀胱臟器重量顯著高于雌性,差異達(dá)到極顯著水平(P<0.01),肝臟器重量顯著高于雌性,差異達(dá)到顯著水平(P<0.05);雌雄裸小鼠臟器系數(shù)相比較,雄性裸鼠的心、脾臟器系數(shù)顯著低于雌性,差異達(dá)極到顯著水平(P<0.01),雄性腎的臟器系數(shù)顯著高于雌性,肺、腎上腺的臟器系數(shù)顯著低于雌性(P<0.05)。結(jié)論 性別對SPF級BALB/c裸小鼠血液學(xué)參數(shù)、臟器重量和臟器系數(shù)有一定的影響。

    裸小鼠; 血液學(xué)參數(shù); 臟器重量; 臟器系數(shù)

    裸小鼠是先天性的免疫缺陷動物,目前已成為醫(yī)學(xué)、生物學(xué)研究領(lǐng)域不可缺少的實(shí)驗(yàn)動物模型,特別在腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、藥品與生物制品的安全性評價及有效藥品的篩選等實(shí)驗(yàn)方面,有重要的應(yīng)用價值[1,2]。BALB/c裸小鼠發(fā)現(xiàn)較早,使用量較多的小鼠品系,也是我國使用最廣泛的裸小鼠品系。本中心2007年從國家嚙齒類實(shí)驗(yàn)動物種子中心上海分中心引進(jìn)BALB/c裸小鼠,通過保種和擴(kuò)群繁育,已建立裸小鼠規(guī)模化生產(chǎn)種群,并向科研、企事業(yè)單位規(guī)?;a(chǎn)和供應(yīng)。目前,有關(guān)SPF級BALB/c裸小鼠血液學(xué)指標(biāo)和臟器系數(shù)報(bào)道較少。為建立成年SPF級BALB/c裸小鼠生物特性數(shù)據(jù),本研究測定了10周齡不同性別裸小鼠的血液學(xué)指標(biāo)、臟器重量、臟器系數(shù),并進(jìn)行了比較分析,以供醫(yī)學(xué)、生物學(xué)研究時參考。

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)動物

    SPF級BALB/c 裸小鼠80只,10周齡,雌雄各半,由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供[SCXK(粵) 2008-0002]。飼養(yǎng)在屏障設(shè)施中,空氣潔凈度7級,室溫20℃~25℃, 濕度40%~70%, 每日光照12 h,動物自由采食和飲水。飼料主要營養(yǎng)成分: 粗蛋白23.5%, 粗纖維3.8%, 粗灰分7.3%, 粗脂肪5.4%,鈣1.2%,磷0.85%,鈉0.25%。飼料60Co輻照滅菌、墊料經(jīng)高壓消毒處理,飲用水是凈化水系統(tǒng)制備的純凈水(RO水),添加鹽酸酸化處理,pH=2~3。

    1.2 主要儀器

    德國賽多利斯電子分析天平(BS223S), 上海安亭科學(xué)儀器廠生產(chǎn)的低速大容量離心機(jī)(TDL-5-A),日本光電公司生產(chǎn)的全自動血液分析儀(CelltacEMEK-7222K)和意大利愛康公司生產(chǎn)的全自動血液生化分析儀(ECHO),用激光計(jì)數(shù)法檢驗(yàn)。

    1.3 測定方法

    血液生化值測定: SPF級BALB/c裸小鼠40只,10周齡,雌雄各半,空腹12 h,麻醉后摘眼球采血,靜置0.5 h,然后3 000 r/m in離心10 m in,取血清,測定血液生化指標(biāo); 血液學(xué)指標(biāo)測定: SPF級BALB/c 裸小鼠40只,10周齡,雌雄各半,空腹12 h,然后活體稱重,麻醉后摘眼球采血,放入EDTA 抗凝管,立即測定血常規(guī)參數(shù)值; 體質(zhì)量和臟器系數(shù)測定: 血液學(xué)指標(biāo)采集裸小鼠頸椎脫臼處死,迅速解剖取出主要臟器(心、肝、脾、肺、胃、腎、腎上腺、膀胱、睪丸、子宮、卵巢),剔除脂肪和筋膜,用濾紙吸干表面的液體,心臟需剪開,用濾紙吸干血液,稱重并計(jì)算臟器系數(shù)。臟器系數(shù)(%)=臟器重量(g)/體質(zhì)量(g)×100。

    1.4 統(tǒng)計(jì)方法

    所有測定值均以(x-± s)表示,采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),取α=0.05作為檢驗(yàn)水平。

    2 結(jié)果

    2.1 血液常規(guī)值

    血液常規(guī)值測定結(jié)果如表1和表2所示,22個測定項(xiàng)目,雄性裸鼠的白細(xì)胞數(shù)(WBC)、平均血紅蛋白量(MCH)、血小板(PLT)、淋巴細(xì)胞(LY)顯著高于同齡雌性,紅細(xì)胞顯著低于雌性,差異達(dá)到極顯著水平( P<0.01),雄性裸鼠的紅細(xì)胞平均體積(MCV)、血小板壓積(PCT)于雌性差異達(dá)到顯著水平(P<0.05),其余差異無顯著性(P>0.05)。

    2.2 血液生化值

    血液常規(guī)值測定結(jié)果如表3所示, 12個測定項(xiàng)目, 雄性裸鼠的堿性磷酸酶(ALP)、肌酸激酶(CK)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)顯著高于雌性,差異達(dá)到極顯著水平(P<0.01), 雄性裸鼠的白蛋白(ALB)顯著高于雌性,差異達(dá)到顯著水平(P<0.05), 其余8項(xiàng)生化指標(biāo)差異無顯著性(P>0.05)。

    2.3 臟器重量和臟器系數(shù)

    裸小鼠臟器重量、臟器系數(shù)測定結(jié)果見表4,雌雄裸小鼠體質(zhì)量相比較,雄性裸小鼠體質(zhì)量顯著高于雌性, 差異達(dá)到極顯著水平(P<0.01)。雌雄裸小鼠臟器重量相比較, 雄性裸鼠的腎、膀胱顯著高于雌性, 差異達(dá)極到極顯著水平(P<0.01), 雄性裸鼠的肝顯著高于雌性, (P<0.05), 其他臟器差異無顯著性(P>0.05)。雌雄裸小鼠臟器系數(shù)相比較, 雄性裸鼠的心、脾顯著低于雌性(P<0.01), 雄性裸鼠的腎顯著高于雌性, 肺、腎上腺顯著低于雌性。差異達(dá)到顯著水平(P<0.05), 其他臟器系數(shù)差異無顯著性(P>0.05)。

    表1 10周齡SPF級BALB/c 裸小鼠血液學(xué)常規(guī)數(shù)值測定結(jié)果

    表2 10周齡SPF級BALB/c裸小鼠白細(xì)胞分類測定結(jié)果

    表3 10周齡SPF級BALB/c裸小鼠血液生化值測定結(jié)果

    表4 10周齡SPF級BALB/c 裸小鼠臟器重量、臟器系數(shù)測定結(jié)果

    3 討論

    目前,國內(nèi)報(bào)道有關(guān)SPF級BALB/c裸小鼠的主要臟器系數(shù),血液及血生化等指標(biāo)正常值的文獻(xiàn)報(bào)道較少,而這些指標(biāo)是實(shí)驗(yàn)動物重要的生物特性,是實(shí)驗(yàn)所需的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)及科學(xué)研究與應(yīng)用的重要依據(jù),對病理、毒理、藥理等相關(guān)實(shí)驗(yàn)有重要的參考意義[3~4]。其中血液生理生化指標(biāo)與代謝、營養(yǎng)及健康狀況有著密切的聯(lián)系,能反映動物機(jī)體生理機(jī)能,健康狀況[5]。本實(shí)驗(yàn)對不同性別成年SPF級裸小鼠血液生理生化值測定結(jié)果顯示,雌、雄裸小鼠之間大多血液學(xué)指標(biāo)趨于一致,但有一些指標(biāo)差異有顯著性。其中雄性裸小鼠的白細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞、平均血紅蛋白量、血小板顯著高于雌性(P<0.01), 這可能與雌雄裸小鼠生長快慢,生理狀態(tài)有關(guān)。3周齡后, 雄性增長速度高于雌性, 10周齡時雄性體質(zhì)量顯著高于雌性,差異達(dá)到顯著水平。生化指標(biāo)堿性磷酸酶、肌酸激酶、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、白蛋白差異有顯著性,且雌性均值低于雄性,可能與雌雄裸小鼠營養(yǎng)水平差異或測定樣本個數(shù)偏少有關(guān)。張修彥等[6]對6~8周SPF級BALB/c小鼠血常規(guī)和血生化測定結(jié)果也表明,雌雄白細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞、血紅蛋白、白蛋白差異達(dá)到極顯著水平。以上結(jié)果說明,性別對裸小鼠血液學(xué)指標(biāo)有一定的影響。

    動物臟器重量及臟器系數(shù)可衡量動物功能狀態(tài),并能反映動物發(fā)育狀況[7~8]。本實(shí)驗(yàn)10周齡雌性裸小鼠體質(zhì)量顯著小于雄性,差異達(dá)到極顯著水平,雌性心、肝、肺、胃、腎、膀胱臟器重量小于雄性臟器重量,雌雄臟器重量與體質(zhì)量大小之間相一致,一些研究也表明實(shí)驗(yàn)動物的體質(zhì)量與主要臟器存在線性關(guān)系[9~10]。雌雄裸鼠臟器系數(shù)心、脾差異達(dá)到極顯著水平,腎、肺、腎上腺差異達(dá)到顯著水平。練有文等[11]報(bào)道, 5~6周齡SPF級BALB/c裸小鼠雌雄臟器重量體質(zhì)量、心、肝、腎差異達(dá)到顯著水平,臟器系數(shù)腎、腎上腺差異達(dá)到顯著水平, 與本文一致, 臟器重量和臟器系數(shù)其他差異指標(biāo)變化與本文有所不同,可能是動物年齡、飼養(yǎng)方式、動物數(shù)量、檢測方法不同有關(guān)。

    本實(shí)驗(yàn)測定10周齡雌雄SPF級裸小鼠血液生理生化值、臟器重量、臟器系數(shù), 并進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明, 不同性別對血液生理生化值、臟器重量、臟器系數(shù)有一定的影響。實(shí)驗(yàn)實(shí)測數(shù)據(jù)及差異比較結(jié)果提供給科研人員參閱、參考。而動物血液生理生化值、臟器重量、臟器系數(shù)除受性別的影響, 還受年齡、營養(yǎng)水平、生活環(huán)境、生理狀況等影響[12], 這些影響因素有待進(jìn)一步研究。

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    Q95-33

    B

    1674-5817(2014)01-0065-03

    10.3969/j.issn.1674-5817.2014.01.015

    2013-06-13

    廣東省科委嚙齒類實(shí)驗(yàn)動物種子中心-華南分中心的建設(shè)(2008A060202002)

    劉 科(1981-), 男, 畜牧師, 碩士, 現(xiàn)從事實(shí)驗(yàn)動物研究工作, E-mail: kygene123@126.com

    王 剛, 高級獸醫(yī)師, E-mail: wangzhy2005@21cm.com

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