范 微, 劉巴睿, 劉海青, 張發(fā)榮, 徐小青, 加 洛, 王忠東, 陶元清, 薛紅梅
(1. 青海省地方病預(yù)防控制所, 西寧 811602; 2. 青海省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物協(xié)會(huì), 西寧 811602)
人工飼養(yǎng)喜馬拉雅旱獺主要臟器重量及臟器系數(shù)的測定
范 微1,2, 劉巴睿1, 劉海青1, 張發(fā)榮1, 徐小青1, 加 洛1, 王忠東1,2, 陶元清1,2, 薛紅梅1
(1. 青海省地方病預(yù)防控制所, 西寧 811602; 2. 青海省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物協(xié)會(huì), 西寧 811602)
目的 對(duì)人工飼養(yǎng)成年喜馬拉雅旱獺的體質(zhì)量和主要臟器重量、臟器系數(shù)進(jìn)行測定。方法 選用成年喜馬拉雅旱獺20只,雌雄各半,分別測定體質(zhì)量和15個(gè)臟器重量,計(jì)算臟器系數(shù)。結(jié)果 性別間比較體質(zhì)量無明顯差異(P>0.05),腦重量雄性顯著大于雌性旱獺(P<0.01);雌雄個(gè)體間心臟、胸腺、褐色脂肪等器官組織重量雄性略大于雌性,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);膽囊重量雄性略小于雌性,也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);其余各臟器重量差異均不顯著(P>0.05)。喜馬拉雅旱獺各臟器系數(shù)雌雄個(gè)體間差異均不顯著(P>0.05)。結(jié)論 成年喜馬拉雅旱獺雌雄間腦重量差異顯著,而體質(zhì)量、其他臟器重量及各臟器系數(shù)差異不顯著。
喜馬拉雅旱獺; 人工飼養(yǎng); 臟器重量; 臟器系數(shù)
在生物醫(yī)學(xué)研究中,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的臟器重量和臟器系數(shù)是評(píng)價(jià)動(dòng)物健康與否的重要指標(biāo)和鑒定動(dòng)物遺傳品質(zhì)的重要依據(jù),是其主要的生物學(xué)特性之一,可用來衡量和反映動(dòng)物的功能狀態(tài),同時(shí)也是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常用的重要基礎(chǔ)數(shù)據(jù),并對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬標(biāo)準(zhǔn)化鑒定有一定意義[1~2]。
青藏高原特有動(dòng)物—喜馬拉雅旱獺(Marmota himalayana), 屬哺乳綱(Mammalia)、嚙齒目(Rodentia)、松鼠科(Scim idae)、旱獺屬(Marmota),是松鼠科中體型最大的一種,具冬眠性。近年來,喜馬拉雅旱獺實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化研究已取得明顯成效,人工條件下繁殖的喜馬拉雅旱獺已經(jīng)在人類乙肝動(dòng)物模型、藥物線粒體毒性替代模型、低氧適應(yīng)動(dòng)物模型的建立方面顯現(xiàn)獨(dú)特作用,正在成為生物醫(yī)學(xué)科研工作中的重要實(shí)驗(yàn)材料,已經(jīng)得到廣泛關(guān)注[3~8]。
本文對(duì)人工飼養(yǎng)3年以上成年喜馬拉雅旱獺主要臟器重量和臟器系數(shù)進(jìn)行了測定分析,為喜馬拉雅旱獺的種質(zhì)資源保護(hù)及作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的廣泛應(yīng)用和研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
1.1 動(dòng)物來源
喜馬拉雅旱獺指名亞種(Marmota himalayana, Hodgson,1841)20只,捕自青海同仁多哇地區(qū),雌雄各半,體質(zhì)量4.5~7.0 kg,年齡5~7歲,人工飼養(yǎng)于青海省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心3年以上。
1.2 飼養(yǎng)條件
動(dòng)物室內(nèi)溫度控制在10~15℃, 相對(duì)濕度40%~60%,光照為自然光或白熾燈。飼養(yǎng)室定時(shí)抽風(fēng),降低室內(nèi)氨氣濃度。每日6∶00、12∶00、18∶00定時(shí)飼喂; 早晨供給品種多樣、鮮嫩的可食綠草, 中午和晚餐供給由玉米粉、小麥粉、麩皮、苜蓿草粉、食鹽、微量元素及少量魚粉組成的復(fù)合半干粉料或顆粒飼料。營養(yǎng)成分指標(biāo)為: 粗蛋白12%、粗脂肪3%、粗纖維40%、粗灰分6%、水分30%; 飲水供給pH 2.5~2.8的酸化水。每天上午清掃室內(nèi)衛(wèi)生; 隔周用2%來蘇爾、2%過氧乙酸或強(qiáng)力消毒靈等消毒液輪換消毒飼養(yǎng)設(shè)施一次。
1.3 儀器及測定方法
電子天平JJ200,分度值0.01 g(常熟雙杰測試儀器廠生產(chǎn)),用于稱量臟器重量; ACS-20-YE 電子?jì)雰撼?,最大稱量20 kg,最小分值度10 g(上海益聯(lián)科教設(shè)備有限公司),稱量動(dòng)物體質(zhì)量; 常規(guī)手術(shù)器械。
測量方法參考文獻(xiàn)[9]。測量前動(dòng)物禁食12 h。測量時(shí), 動(dòng)物經(jīng)鹽酸氯胺酮麻醉[10], 稱體質(zhì)量,腹主動(dòng)脈放血處死。迅速分離心、肝、脾、肺、腎、腦、甲狀腺、腎上腺、胰腺、胸腺、睪丸、子宮、卵巢、膽囊、胃等器官和腋下褐色脂肪。用眼科剪和鑷子仔細(xì)分離,剔除和清除附著在器官表面的淤血、脂肪和結(jié)締組織,胃等中空性臟器沿器官長軸剪開,生理鹽水洗凈內(nèi)容物,用濾紙吸去臟器內(nèi)外表面血液或體液后稱重,計(jì)算臟器系數(shù)(臟器系數(shù)=臟器重量/體質(zhì)量×100%)。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
所得數(shù)據(jù)用SPSS17.0軟件統(tǒng)計(jì)分析,數(shù)據(jù)用(x-± s)表示, 進(jìn)行t檢驗(yàn), P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 臟器重量
喜馬拉雅旱獺成年雌雄個(gè)體間體質(zhì)量無明顯差異(P>0.05); 各臟器重量比較顯示,旱獺雌雄個(gè)體間心臟、胸腺、褐色脂肪等器官組織重量雄性略大于雌性,但差異不顯著(P>0.05); 膽囊重量雄性略小于雌性,但也無顯著性(P>0.05); 腦重量雄性顯著大于雌性旱獺(P<0.01); 其余各臟器重量雖有略微差異,但差異均不顯著(P>0.05)(表1)。
2.2 臟器系數(shù)
喜馬拉雅旱獺臟器系數(shù)比較顯示,雌雄個(gè)體間心臟、胸腺、褐色脂肪及腦系數(shù)雄性均大于雌性,但無顯著性差異(P>0.05); 同臟器重量比較結(jié)果類似,膽囊系數(shù)雄性略小于雌性,但也沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05); 其余各臟器系數(shù)雌雄個(gè)體間差異皆不顯著(P>0.05)(表2)。
依據(jù)臟器重量、臟器系數(shù)可大體確定臟器病變的性質(zhì)和程度,所以,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物臟器重量、臟器系數(shù)是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常用的重要基礎(chǔ)數(shù)據(jù)[11]。由于對(duì)喜馬拉雅旱獺研究起步較晚,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化仍處于研究階段,因此未見臟器重量、臟器系數(shù)的相關(guān)報(bào)道,本研究結(jié)果填補(bǔ)了這方面的空白,為生物醫(yī)學(xué)研究提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
表1 喜馬拉雅旱獺臟器重量
表2 喜馬拉雅旱獺臟器系數(shù) %
國內(nèi)對(duì)大鼠和豚鼠等臟器重量及臟器系數(shù)測定報(bào)道中,均表明性別對(duì)臟器系數(shù)影響較小[12~13]。本研究結(jié)果表明人工飼養(yǎng)成年喜馬拉雅旱獺雌雄個(gè)體間腦重量雄性顯著大于雌性(P<0.01), 其它臟器重量及臟器系數(shù)不因性別不同而有所不同。
哺乳動(dòng)物體內(nèi)存在褐色脂肪組織,初步推斷對(duì)于動(dòng)物的體溫調(diào)節(jié)、冬眠覺醒、抵抗寒冷、防止肥胖、調(diào)節(jié)能量平衡以及抵抗感染等方面有著重要的生理意義。生活在青藏高原的長爪沙鼠、高原鼠兔適應(yīng)寒冷環(huán)境的有效產(chǎn)熱方式是非顫抖性產(chǎn)熱, 其主要產(chǎn)熱源是褐色脂肪組織, 這兩種動(dòng)物褐色脂肪在冬季和枯草期最重[14~15]。作者對(duì)冬眠前10月份成年喜馬拉雅旱獺腋下褐色脂肪進(jìn)行稱重,約占體質(zhì)量的0.29%,其重量與冬季和枯草期是否存在差異,還有待于今后補(bǔ)充相關(guān)資料后再進(jìn)行討論。
到目前為止,本研究中的喜馬拉雅旱獺均為成年,所涵蓋年齡范圍較大,年齡間的差異不能完全消除;在解剖過程中,肉眼觀察到有臟器明顯病變的測定的數(shù)據(jù)不統(tǒng)計(jì)在內(nèi),但也有可能存在一些潛在感染和自發(fā)性疾病,一定程度上影響了測定的數(shù)據(jù); 另外,受條件限制,我們沒能測定野生狀態(tài)下喜馬拉雅旱獺的臟器重量和臟器系數(shù),無法對(duì)野外和人工飼養(yǎng)旱獺的臟器指標(biāo)進(jìn)行比較。這些要求我們要進(jìn)一步深入探討其生物學(xué)參數(shù),在制定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物臟器重量及臟器系數(shù)正常值參考范圍時(shí),應(yīng)該綜合考慮各種可能的影響因素并加以標(biāo)準(zhǔn)化,才能得到較為可靠的結(jié)果。隨著喜馬拉雅旱獺相關(guān)研究的不斷拓展,有關(guān)喜馬拉雅旱獺生物學(xué)特性的研究也將不斷深入,因此研究喜馬拉雅旱獺主要臟器重量和臟器系數(shù)統(tǒng)一的參考值具有重要意義。
[1] 惲?xí)r鋒, 胡玉紅, 田小蕓, 等. 不同品種實(shí)驗(yàn)兔主要臟器重量及臟器系 數(shù) 的 研 究[J]. 中 國 比 較 醫(yī) 學(xué) 雜 志, 2004, 14(6):350-354.
[2] 施新猷. 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)[M]. 北京: 人民軍醫(yī)出版社, 2000:30-34.
[3] 王忠東. 喜馬拉雅旱獺實(shí)驗(yàn)籠具的設(shè)計(jì)與應(yīng)用[J]. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與比較醫(yī)學(xué), 2012, 32(4):356-357.
[4] 范微, 王忠東, 陶元清, 等. 喜馬拉雅旱獺肝穿刺方法的建立[J]. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與比較醫(yī)學(xué), 2011, 31(4):287-289.
[5] 范薇, 王忠東, 陶元清. 青海省野生動(dòng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化研究進(jìn)展[J]. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)與管理, 1997, 14(4):60-63.
[6] 黃孝龍. 大型冬眠動(dòng)物喜馬拉雅旱獺的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化研究[J]. 中國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)雜志, 1996, 6(2):70-72.
[7] 馮雪梅, 尹瑩, 李安意. 一種HBV研究的新動(dòng)物模型-喜馬拉雅旱獺β-actin基因的克隆及序列分析[J]. 醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志, 2011, 8(2):95-99.
[8] 張?jiān)u滸, 陶元清, 江振洲. 喜馬拉雅旱獺作為藥物線粒體毒性替代模型的可行性分析[J]. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與比較醫(yī)學(xué), 2012, 32(5):436-440.
[9] 賀爭鳴. 嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物學(xué)特性數(shù)據(jù)測定技術(shù)規(guī)程[M]. 北京: 中國標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2006:53-54.
[10] 范薇. 喜 馬 拉 雅 旱 獺 制 動(dòng) 性 麻 醉 方 法[J]. 四川動(dòng)物, 2008, 27(6):1139-1140.
[11] 王蔭槐. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)[M]. 北京: 中國建材工業(yè)出版社. 1999: 43-59.
[12] 王海霞, 李永明, 郭守利, 等. DA大鼠的繁殖性能及部分生物學(xué)特性參數(shù)的測定[J]. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志, 2007, 17 (12):710-713.
[13] 詹純列, 王洪濤, 李建軍, 等. 封閉群FMMU白化豚鼠主要臟器重量及臟器系數(shù)的測定[J]. 中國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào), 1997, 5(1):33-36.
[14] 張志強(qiáng), 劉全生, 李紀(jì)元, 等. 長爪沙鼠褐色脂肪組織和肝臟產(chǎn)熱特征的季節(jié)[J]. 動(dòng)物學(xué)報(bào), 2006, 52(6):1034-1041.
[15] 柳勁松, 李慶芬. 高原鼠兔褐色脂肪組織及肝臟產(chǎn)熱的季節(jié)性變化[J]. 獸類學(xué)報(bào), 1996, 16(1):155-157.
Q95-33
B
1674-5817(2014)01-0059-03
10.3969/j.issn.1674-5817.2014.01.013
2013-11-01
青海省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2012-T-Y20)
范 微(1964-), 女, 副研究員, 研究方向: 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與動(dòng)物實(shí)驗(yàn), 野生動(dòng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化研究, E-mail: fanweiqy@163.com
王忠東(1962-), 男, 研究員, 研究方向: 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理與研究, E-mail: wangzhongdong@163.com