我國(guó)部分地區(qū)牛羊弓形蟲血清流行病學(xué)調(diào)查

周昕薛，周 歡，寧曉冬，李 靜，菅復(fù)春，張龍現(xiàn)，趙青玉，寧長(zhǎng)申

（1.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院，鄭州 450002；2.河南省人獸共患病國(guó)際聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室，鄭州 450002）

疾病防控

我國(guó)部分地區(qū)牛羊弓形蟲血清流行病學(xué)調(diào)查

周昕薛1，2，周 歡1，2，寧曉冬1，2，李 靜1，2，菅復(fù)春1，2，張龍現(xiàn)1，2，趙青玉1，2，寧長(zhǎng)申1，2

（1.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院，鄭州 450002；2.河南省人獸共患病國(guó)際聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室，鄭州 450002）

為了解我國(guó)牛羊弓形蟲病流行情況，應(yīng)用間接血凝試驗(yàn)（IHA）對(duì)河南、山東、山西、內(nèi)蒙古、云南、貴州6省區(qū)151份牛血清、50份奶樣、490份羊血清進(jìn)行了弓形蟲病血清流行病學(xué)調(diào)查。結(jié)果顯示：151份被檢牛血清和50份牛奶樣品，弓形蟲抗體均為陰性。490份羊血清弓形蟲抗體總陽(yáng)性率5.71%，其中母羊、公羊血清陽(yáng)性率分別為4.03%和9.79%；山羊、綿羊、雜交羊血清陽(yáng)性率分別為6.58%、4.81%和5.13%；陽(yáng)性率最高的為公山羊（13.2%），最低的為母綿羊（2.96%）。28份陽(yáng)性羊血清中，75%的抗體滴度為1:64，25%的抗體滴度為1:256。1歲后的羊，隨年齡增長(zhǎng)，血清陽(yáng)性率升高。

牛；羊；弓形蟲；血清抗體陽(yáng)性率；間接血凝試驗(yàn)

弓形蟲（Toχoplasma gondii）是一種世界性分布的人獸共患弓形蟲病病原，可自然感染人和羊、豬、牛、馬、狗、貓等多種動(dòng)物。據(jù)報(bào)道［1］，江蘇動(dòng)物弓形蟲病血清陽(yáng)性率5%。弓形蟲主要侵害幼畜，羔羊發(fā)病后表現(xiàn)為免疫力低下、生長(zhǎng)緩慢、消瘦、貧血以及呼吸和神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，嚴(yán)重時(shí)可引起死亡，懷孕母羊感染后常因廣泛病變而導(dǎo)致流產(chǎn)、不孕、死胎，造成繁殖障礙［2］。通常情況下，免疫功能正常的人感染并不引起明顯的臨床癥狀，但當(dāng)機(jī)體免疫功能受損或受到抑制時(shí)，如AIDS、器官移植、腫瘤等，可引起弓形蟲性腦炎、視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜炎等，甚至危及生

命［3］，孕婦輕度感染即可引起嚴(yán)重后果［4］，是一種重要的機(jī)會(huì)性致病原蟲病。而牛羊作為人們主要的奶產(chǎn)品和肉食品來(lái)源，其感染弓形蟲后易通過(guò)食物鏈傳播給人。為了解當(dāng)前國(guó)內(nèi)牛羊弓形蟲感染情況，于2013年3月至2014年3月，應(yīng)用間接血凝（IHA）進(jìn)行了牛羊弓形蟲血清學(xué)檢測(cè)。

1 材料與方法

1.1 樣品來(lái)源及采樣方法

牛血清151份和牛奶樣品50份來(lái)自內(nèi)蒙古自治區(qū)以及河南省的鄭州市和焦作市；羊血清490份來(lái)自云南、貴州、河南、山東、山西、內(nèi)蒙古6省區(qū)。每群羊、牛分別按2%～5%的比例逐只（頭）頸靜脈采血2 mL，置5 mL離心管中，室溫靜置，分離血清，凍存待檢。逐頭采集泌乳奶牛的中段牛奶50 mL，除脂后凍存待檢。

1.2 診斷試劑

弓形蟲IHA抗原、標(biāo)準(zhǔn)陰性血清、標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清、稀釋液均購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所，批號(hào)20131030，標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清效價(jià)≥1:1024；96孔V型反應(yīng)板。

1.3 檢測(cè)方法

應(yīng)用微量間接血凝（IHA）試驗(yàn)檢測(cè)弓形蟲抗體，操作程序及判定標(biāo)準(zhǔn)均按照農(nóng)業(yè)部頒布的規(guī)程進(jìn)行。

1.4 結(jié)果判定

在弓形蟲標(biāo)準(zhǔn)陰性血清、陽(yáng)性血清及稀釋液對(duì)照均成立的情況下，被檢血清抗體效價(jià)達(dá)到或超過(guò)1:64者判為陽(yáng)性。

2 結(jié)果

2.1 不同地區(qū)牛、羊弓形蟲血清流行病學(xué)情況

來(lái)自河南省和內(nèi)蒙古自治區(qū)的151份被檢牛血清樣品和50份牛奶樣品中，弓形蟲抗體檢測(cè)均為陰性。來(lái)自云南、貴州、河南等地區(qū)的490份羊血清樣品中，陽(yáng)性28份，陽(yáng)性率5.71%，其中21份樣品抗體滴度為1:64，占總陽(yáng)性數(shù)的75%，7份抗體滴度1:256，占總陽(yáng)性數(shù)的25%。內(nèi)蒙古、河南、山西、山東、云南、貴州6省區(qū)中，5個(gè)省區(qū)的羊均檢出弓形蟲抗體。河南省的11個(gè)地市中，9個(gè)地市的羊血清檢出了弓形蟲抗體。不同地區(qū)羊血清弓形蟲抗體陽(yáng)性率存在差異，以內(nèi)蒙古和河南濟(jì)源的陽(yáng)性率最高，分別為13.33%和11.11%。結(jié)果如表1所示。

表1 不同地區(qū)牛羊血清弓形蟲抗體檢測(cè)結(jié)果

2.2 不同性別、品種羊弓形蟲血清學(xué)調(diào)查結(jié)果

490 份羊血清中，母羊血清樣品347份，陽(yáng)性率4.03%；公羊血清樣品143份，總陽(yáng)性率9.79%。山羊血清樣品243份，陽(yáng)性率6.58%；綿羊血清樣品208份，陽(yáng)性率4.81%；雜交羊血清樣品39份，陽(yáng)性率5.13%；公山羊的弓形蟲血清陽(yáng)性率最高，為13.2%，其次是公綿羊（8.22%），母綿羊陽(yáng)性率最低（2.96%）。結(jié)果如表2所示。

表2 不同性別、品種羊弓形蟲血清學(xué)調(diào)查結(jié)果

2.3 不同年齡羊弓形蟲血清學(xué)調(diào)查結(jié)果

1～6 月齡羊弓形蟲血清抗體陽(yáng)性率6.80%，7～12月齡羊陽(yáng)性率3.42%。12月齡以后，隨著年齡的增長(zhǎng)，羊弓形蟲血清抗體陽(yáng)性率又逐漸升高。大于25月齡成年羊的弓形蟲陽(yáng)性率達(dá)7.58%。結(jié)果見表3。

表3 不同年齡羊弓形蟲血清學(xué)調(diào)查結(jié)果

3 討論

3.1 羊弓形蟲感染在我國(guó)不同地區(qū)普遍存在

本次調(diào)查的我國(guó)6個(gè)省區(qū)的490只肉羊樣品，共有28份檢出弓形蟲血清抗體，總陽(yáng)性率5.71%；其中5個(gè)省區(qū)均檢出弓形蟲抗體陽(yáng)性樣品，表明弓形蟲感染在我國(guó)羊群中普遍存在。不同地區(qū)羊弓形蟲抗體陽(yáng)性率存在差異，尤其內(nèi)蒙古自治區(qū)的羊血清樣品弓形蟲抗體陽(yáng)性率高達(dá)13.33%，且4份陽(yáng)性中有2份血清抗體滴度較高。弓形蟲病作為重要的人獸共患病，對(duì)人畜危害嚴(yán)重，且感染途徑多樣，因此對(duì)羊弓形蟲病的防控應(yīng)給予高度重視。本次調(diào)查內(nèi)蒙古自治區(qū)和河南省的151份牛血清和50份牛奶樣品均未檢測(cè)出弓形蟲抗體。羊弓形蟲感染率高于牛，這種差異與國(guó)外牛羊弓形蟲血清流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果相似［5-6］。

檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，弓形蟲可以感染任何年齡階段的羊。其中1～6月齡的羊群中弓形蟲血清抗體陽(yáng)性率6.80%，7～12月齡3.42%，而12月齡以后隨著年齡的增長(zhǎng)羊弓形蟲病陽(yáng)性率又逐漸升高，這與西印度群島、葡萄牙、瑞士、阿根廷、伊朗等國(guó)家的羊弓形蟲血清流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果相一致［5-9］。本次血清學(xué)調(diào)查還發(fā)現(xiàn)，不同性別、品種羊弓形蟲感染率也不同：公羊比母羊易感，雜交羊比純種羊易感。而山羊和綿羊的血清陽(yáng)性率在不同的報(bào)道中結(jié)果不同。如Diakou等［10］對(duì)希臘50個(gè)綿羊和山羊混養(yǎng)農(nóng)場(chǎng)458份綿羊和375份山羊血清用ELISA方法檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)山羊的弓形蟲陽(yáng)性率高于綿羊；而Derakhshan等［9］用免疫熒光法對(duì)伊朗羊群的弓形蟲血清調(diào)查結(jié)果為山羊陽(yáng)性率1.7%，綿羊3.3%。而本次調(diào)查山羊和綿羊的血清陽(yáng)性率分別為6.58%和4.81%，差異不大。本次調(diào)查還發(fā)現(xiàn)，公羊總陽(yáng)性率9.79%，公山羊血清陽(yáng)性率達(dá)13.2%（7/53）。這或許與山羊的好動(dòng)，以放牧為主的生活習(xí)性有關(guān)，尤其是活動(dòng)范圍和強(qiáng)度較大，增加了公羊感染機(jī)會(huì)。此外，據(jù)國(guó)外文獻(xiàn)［11-12］報(bào)道，不同養(yǎng)殖方式，羊的生活地理環(huán)境，如海拔、降水量、氣溫等因素也影響弓形蟲在羊群的傳播。

3.2 規(guī)?；犸暱赡苡欣跍p少肉羊感染弓形蟲

本次檢測(cè)弓形蟲病陽(yáng)性率低于國(guó)內(nèi)一些報(bào)道。李永光［13］報(bào)道，青海省民和縣陶賽特羊弓形蟲陽(yáng)性率5.77%～11.48%，平均陽(yáng)性率8.45%；羅才慶等［14］應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)羊血清弓形蟲IgG抗體，得出福建省龍巖市部分地區(qū)牛和羊血清弓形蟲IgG抗體陽(yáng)性率分別為0和22.86%；任忠奎等［15］報(bào)道，遼寧省蓋州市絨山羊弓形蟲血清陽(yáng)性率4.17%；王承民等［16］運(yùn)用間接血凝實(shí)驗(yàn)檢測(cè)羊血清，發(fā)現(xiàn)河南省新鄉(xiāng)市綿羊弓形蟲血清抗體陽(yáng)性率16.0%。究其原因，除了檢測(cè)方法不同導(dǎo)致的數(shù)據(jù)差別外，其主要原因可能是羊規(guī)模化舍飼模式逐漸改變了以往家庭散養(yǎng)的方式，牛、羊與終末宿主貓、鼠、犬等其他常見弓形蟲宿主動(dòng)物接觸的機(jī)會(huì)減少，從而減少了感染弓形蟲的機(jī)會(huì)。

3.3 應(yīng)加強(qiáng)對(duì)肉羊弓形蟲病的監(jiān)測(cè)和防控

弓形蟲的宿主廣泛，人和動(dòng)物感染率均較高，危害嚴(yán)重。其在羊群中不僅危害養(yǎng)羊生產(chǎn)，導(dǎo)致羊流產(chǎn)、不孕等，也危及人類健康。為此，應(yīng)加強(qiáng)羊群的飼養(yǎng)管理和對(duì)陽(yáng)性羊群的監(jiān)測(cè)和防治，這將對(duì)保護(hù)人體健康和保障養(yǎng)羊業(yè)健康發(fā)展均具有重要意義。

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Seroprevalence of Toxoplasma Gondii in Cattle，Sheep and Goats in Partial Area of China

Zhou Xin-xue1，2，Zhou Huan1，2，Jian Fu-chun1，2，et al
（1.College ofAnimal Science and VeterinaryMedicine，Henan Agricultural University，Zhengzhou 450002，China；2.InternationalJointResearchLaboratoryforZoonoticDiseaseofHenan，HenanAgriculturalUniversity，Zhengzhou450002，China）

The objectives of this study were to determine the seroprevalence of Toχoplasma gondii in cattle，sheep and goat.151 serum samples from cattle，50 milk samples from cows，490 serum samples from sheep and goats were collected from Henan，Shandong，Shanxi，Neimenggu，Yunnan，Guizhou provinces.These samples’anti-T.gondii antibodies were examined usinga commercial indirect hemagglutination assaykits.The result showed that specific IgGagainst T.Gondii of151 samples from cattle were all negative；while in 490 samples from sheep and goats，the overall seroprevalence rate was 5.71%，the female and the male had different seroprevalences surprisingly（4.03%and 9.79%respectively）；the goats，sheep，mixed-breed had comparable seroprevalences（6.58%，4.81%and 5.13%，respectively），the male goats had the highest seroprevalence of T.gondii（13.2%）and the female sheep had the lowest one（2.96%）.In 28 positive samples，75%serumantibodytiter was 1:64 and the 25%was 1:256.Seroprevalence ofT.gondii infection increased significantlywith the age ofthe assessed sheep or goats after 1-year-old.

sheep cattle；Toχoplasma gondii；seroprevalence；IHA

S858.23

A

2095-3887（2014）05-0043-04

10.3969/j.issn.2095-3887.2014.05.013

2014-06-04

國(guó)家現(xiàn)代肉羊產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系（nycytx-39）

周昕薛（1988-），女，碩士研究生。

菅復(fù)春，Email：jfchun2008@163.com