高致病性禽流感滅活疫苗免疫抗體消長規(guī)律研究

韓慶安等

高致病性禽流感是由高致病性禽流感病毒引起的對養(yǎng)禽業(yè)危害極其嚴(yán)重的一類動物疫病。該病的暴發(fā)流行，不僅沉重打擊養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展，而且對人類的生命安全也造成了極大的危害，已經(jīng)引起了全世界各國的密切關(guān)注。目前，我國對H5亞型高致病性禽流感實(shí)行強(qiáng)制免疫政策，但隨著疫苗免疫的多年開展，H5亞型禽流感病毒也在不斷發(fā)生著變異。為了有效保護(hù)禽群不受禽流感病毒的侵害，禽流感國家參考實(shí)驗(yàn)室適時推出新的重組禽流感H5亞型疫苗。2011年底，河北省引進(jìn)重組禽流感H5N1（Re-4株+Re-6株）二價疫苗，為了摸清其免疫原性，從而制定出更加合理的免疫程序推薦給廣大的養(yǎng)禽戶，我們于2012年初開展了該疫苗免疫抗體消長規(guī)律研究，現(xiàn)將結(jié)果匯報如下，供大家參考。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 疫苗和檢測試劑

重組禽流感H5N1（Re-4株+Re-6株）二價疫苗，H5亞型禽流感Re-4株、Re-6株HI標(biāo)準(zhǔn)抗原以及相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)陽性血清，均由哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司生產(chǎn)。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)動物

保定徐水某規(guī)模蛋雞場，1日齡海蘭褐雛雞2000只。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

定期檢測母源抗體，當(dāng)母源抗體降至4lg2以下，群體抗體合格率低于國家規(guī)定的70%時進(jìn)行首次免疫，免疫劑量為0.3 mL/羽，頸部皮下注射；首免后，根據(jù)免疫抗體監(jiān)測結(jié)果，確定二免日齡，免疫劑量為0.5 mL/羽，胸部肌肉注射。定期采集血樣，每次采30份，分離血清進(jìn)行抗體檢測。

1.2.2 檢測方法

按照國標(biāo)《高致病性禽流感診斷技術(shù)》（GB/T 18936-2003）中血凝和血凝抑制試驗(yàn)（HA-HI）進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 母源抗體監(jiān)測結(jié)果

表1結(jié)果顯示，雞母源抗體可持續(xù)2周左右。雛雞到10日齡時，其群體抗體合格率已經(jīng)接近70%，根據(jù)抗體下降速度進(jìn)行推算，雞群首免日齡定在12日齡。

2.2 首免后免疫抗體監(jiān)測結(jié)果

檢測結(jié)果表明，首免后直到37日齡，H5N1（Re-6株）抗體始終不高，群體免疫合格率一直低于70%；H5N1（Re-4株）抗體平均值和群體合格率雖然始終符合國家規(guī)定的要求，但37日齡時，其抗體離散度達(dá)到63.35%，抗體值極其不整齊，故將雞群二免日齡定在40日齡。結(jié)果見表2。

2.3 二免后免疫抗體監(jiān)測結(jié)果

表3和表4結(jié)果表明，到130日齡，雞群其免疫抗體值依然很高，免疫保護(hù)率較好。但考慮到抗體離散度值及雞群開產(chǎn)后再進(jìn)行疫苗免疫影響產(chǎn)蛋，建議雞場在120～130日齡時進(jìn)行第三次免疫。開產(chǎn)前雞群禽流感抗體消長情況見圖1。

3 小結(jié)與討論

由于H5N1（Re-6株）是新開發(fā)的重組禽流感疫苗株，故未進(jìn)行母源抗體檢測。正因?yàn)槠涫切乱呙纾u群機(jī)體對其免疫識別較差，故在整個試驗(yàn)期，其免疫抗體值始終低于Re-4株的抗體值。

監(jiān)測結(jié)果表明，新飼養(yǎng)的雞群經(jīng)過二次免疫后，到開產(chǎn)前（130日齡），其免疫抗體值依然維持在較高水平，但考慮到雞群開產(chǎn)后再進(jìn)行疫苗免疫影響產(chǎn)蛋，建議雞場在120～130日齡時進(jìn)行第三次免疫。

抗體離散度值是反映抗體整齊度的指標(biāo)。離散度值越高，抗體越不整齊，反之越整齊。在評價某一階段雞群禽流感免疫效果時，單純憑借群體免疫合格率來分析是片面和不準(zhǔn)確的，只有將抗體離散度值和群體免疫合格率二者結(jié)合起來綜合分析，其評價的結(jié)果才能比較準(zhǔn)確。通常，當(dāng)抗體離散度值超過60%時，即使群體免疫合格率符合國家規(guī)定的要求，雞群也必須立即進(jìn)行疫苗免疫，才能確保其得到有效保護(hù)。

本次試驗(yàn)只對開產(chǎn)前雞群禽流感免疫抗體消長情況進(jìn)行了研究，至于雞群開產(chǎn)后疫苗免疫保護(hù)期如何，我們又單獨(dú)進(jìn)行了試驗(yàn)研究。2012年5-12月份，我們對當(dāng)年河北省中標(biāo)的9個廠家生產(chǎn)3種不同類型14個批次禽流感疫苗在產(chǎn)蛋后雞群中進(jìn)行免疫效果的比對試驗(yàn)，結(jié)果其免疫保護(hù)期為4～6個月。

自2004年H5亞型高致病性禽流感在我國爆發(fā)流行以來，我國對其實(shí)行強(qiáng)制免疫政策。但隨著疫苗免疫的逐年開展，禽流感病毒也在不斷發(fā)生著變異。對此，國家也不斷推出新型毒株疫苗來應(yīng)對。截至2011年底，國家陸續(xù)推出了禽流感H5N1（N28株）滅活疫苗、重組禽流感H5N1（Re-1株）滅活疫苗、重組禽流感H5N1（Re-4株）滅活疫苗、重組禽流感H5N1（Re-5株）滅活疫苗、重組禽流感H5N1（Re-6株）滅活疫苗、重組禽流感H5N1（Re-4株+Re-5株）二價滅活疫苗、重組禽流感H5N1（Re-4株+Re-6株）二價滅活疫苗以及相應(yīng)的禽流感H5+H9二聯(lián)滅活苗。每種疫苗在河北投入使用前或使用初期，我們均對其免疫效果進(jìn)行評價，試驗(yàn)結(jié)果表明，其在雞群的首免和二免時間相差不大，免疫保護(hù)期也基本一致。雖然H9禽流感對雛雞的致病力不強(qiáng)，但對青年雞的危害較大，并且嚴(yán)重影響蛋雞的產(chǎn)蛋率，故我們也對其免疫效果進(jìn)行了多次評價。經(jīng)過多年的試驗(yàn)數(shù)據(jù)積累，考慮到地方高致病性禽流感病毒主導(dǎo)流行株，結(jié)合雞場的定位及經(jīng)濟(jì)效益，我們分別對蛋（肉）種雞場和商品蛋雞場制定了參考免疫程序。

蛋（肉）種雞：7～14日齡注射禽流感H5N1滅活疫苗，35～42日齡注射禽流感H5N1滅活疫苗和H9滅活疫苗，75～80日齡時注射禽流感H9滅活苗，120～130日齡注射禽流感H5N1和H9滅活疫苗，以后每隔4～6個月注射一次禽流感H5N1和H9滅活疫苗。

商品蛋雞：7～14日齡注射禽流感H5N1滅活疫苗，35～42日齡注射禽流感H5N1滅活疫苗，75～80日齡時注射禽流感H5+H9二聯(lián)滅活疫，120～130日齡注射禽流感H5N1和H5～H9滅活疫苗，以后每隔4～6個月注射一次禽流感H5N1滅活疫苗。（編輯：郭遠(yuǎn)）