導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)在女性生殖道人乳頭狀瘤病毒檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值

田玉旺，許春偉，王東陽(yáng)，陳 曦

導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)在女性生殖道人乳頭狀瘤病毒檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值

田玉旺，許春偉，王東陽(yáng)，陳 曦

目的評(píng)價(jià)導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)在女性生殖道人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值，探討女性生殖道感染最常見的HPV基因型及好發(fā)年齡。方法 采用導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)對(duì)545例患者的宮頸細(xì)胞學(xué)標(biāo)本進(jìn)行宮頸細(xì)胞21種HPV-DNA基因分型檢測(cè)。比較細(xì)胞學(xué)正常組(n=120)、細(xì)胞學(xué)異常組(n=425)及細(xì)胞學(xué)異常各類型［宮頸慢性炎癥174例、宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)Ⅰ級(jí)102例、CINⅡ級(jí)74例、CINⅢ級(jí)36例、宮頸癌16例和尖銳濕疣23例］組HPV陽(yáng)性率。將細(xì)胞學(xué)異常組分為4個(gè)年齡組:20～歲組85例、31～歲組140例、41～歲組90例、51～歲組110例，比較各年齡組HPV陽(yáng)性率。結(jié)果 細(xì)胞學(xué)正常組HPV陽(yáng)性率為22．5%(27/120)，細(xì)胞學(xué)異常組為87．3%(371/425)。細(xì)胞學(xué)異常組及細(xì)胞學(xué)異常類型6組HPV陽(yáng)性率分別與細(xì)胞學(xué)正常組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。細(xì)胞學(xué)正常組中6種最為常見的HPV基因型按陽(yáng)性率遞減依次為HPV16、68、18、52、58、11;細(xì)胞學(xué)異常組中6種最常見的HPV基因型依次為HPV 16、52、58、18、33、31。31～歲組、41～歲組HPV陽(yáng)性率顯著高于51～歲組(P＜0.01)，31～歲組HPV陽(yáng)性率最高，41歲后隨年齡的增長(zhǎng)逐漸降低。結(jié)論 采用導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)一次試驗(yàn)?zāi)苈?lián)合檢測(cè)出多種HPV亞型感染及型別分布，從而提高由HPV感染引起的婦科腫瘤的防治水平。

基因芯片技術(shù);乳頭狀瘤病毒感染;宮頸疾病;DNA指紋法

宮頸癌是目前常見的婦科惡性腫瘤之一，在全球婦女癌癥病死率中居第2位，人乳頭狀瘤病毒(human papillomavirus，HPV)感染已被公認(rèn)為是引起宮頸癌及其癌前病變的主要原因，幾乎所有的宮頸癌細(xì)胞中均可檢測(cè)到HPV-DNA的存在。HPVDNA檢測(cè)已成為宮頸癌篩查的重要方法之一。HPV是一組DNA病毒，可引起人類上皮細(xì)胞增生及乳頭狀瘤樣改變。在已知的100多種HPV亞型當(dāng)中，有30余種亞型可以感染人的生殖器官［1］。HPV感染具有很強(qiáng)的地域性，在不同國(guó)家和地區(qū)其陽(yáng)性率及其型別分布存在著較大的差別。因此，準(zhǔn)確檢測(cè)宮頸病變患者HPV陽(yáng)性率及其型別，有助于為宮頸病變的防治提供重要依據(jù)。本研究采用導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)對(duì)545例行宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查的女性患者進(jìn)行HPV-DNA檢測(cè)，以探討HPV感染與宮頸病變的關(guān)系及其型別分布特點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 2011年10月—2012年10月自北京軍區(qū)總醫(yī)院婦科門診行宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查的患者中選取545份標(biāo)本，采集標(biāo)本的患者年齡20～73歲，平均36．5歲。其中宮頸細(xì)胞學(xué)檢查正常者120例(細(xì)胞學(xué)正常組)，異常者425例(細(xì)胞學(xué)異常組)，對(duì)細(xì)胞學(xué)異常組均行宮頸活檢，按組織病理學(xué)分組:宮頸慢性炎癥組174例、宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)Ⅰ級(jí)組102例、CINⅡ級(jí)組74例、CINⅢ級(jí)組36例、宮頸癌組16例和尖銳濕疣組23例。將細(xì)胞學(xué)異常組分為4個(gè)年齡組:20～歲組85例，31～歲組140例，41～歲組90例，51～歲組110例。

1.2 主要儀器與試劑 醫(yī)用核酸分子快速雜交儀、KP-TC48型PCR基因擴(kuò)增儀和HPV基因分型檢測(cè)試劑盒均由潮州凱普生物化學(xué)有限公司提供。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本采集:將專用宮頸刷緊貼宮頸口黏膜，輕輕搓動(dòng)宮頸刷使其順時(shí)針旋轉(zhuǎn)5圈，取得宮頸分泌物或脫落細(xì)胞，將取樣后的宮頸刷放入標(biāo)有患者編號(hào)加專用細(xì)胞保存液的取樣管中，擰緊瓶蓋立即送病理科檢測(cè)。不能在24 h內(nèi)檢測(cè)的樣本置－4℃冰箱保存，2周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。

1.3.2 導(dǎo)流雜交法檢測(cè)HPV基因型:①樣本DNA分離 提 取:吸 取 送 檢 標(biāo) 本 0．5 ml，離 心(13 000 r/min)15 min，棄上清液，用核酸提取試劑盒抽提DNA;②PCR擴(kuò)增:將PCR Mix及DNA Taq酶按比例混合后，每支反應(yīng)管加入24μl，再加入DNA模板1μl，混合后進(jìn)行PCR擴(kuò)增;③分子導(dǎo)流雜交:在雜交平臺(tái)上放入標(biāo)記寡核苷酸探針的低密度基因芯片，一次可同時(shí)檢測(cè)15個(gè)臨床樣本，按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行導(dǎo)流雜交;④酶標(biāo)顯色:導(dǎo)流雜交法一次可檢測(cè) 6、11、42、43、44、16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、CP8304 21 種 HPV基因型。

1.3.3 陽(yáng)性結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn):用肉眼觀察檢測(cè)結(jié)果，陽(yáng)性點(diǎn)呈現(xiàn)清晰可見的藍(lán)紫色圓點(diǎn)，根據(jù)導(dǎo)流雜交膜HPV各基因亞型位點(diǎn)分布示意圖(圖1)判斷陽(yáng)性點(diǎn)HPV病毒類型。每張雜交膜上設(shè)有Biotin對(duì)照點(diǎn)和內(nèi)對(duì)照點(diǎn)(inner control，IC)各1個(gè)，Biotin點(diǎn)為雜交反應(yīng)質(zhì)控點(diǎn)，雜交失敗時(shí)不顯示，IC為PCR反應(yīng)質(zhì)控點(diǎn)，PCR反應(yīng)失敗時(shí)不顯示。若上述兩對(duì)照點(diǎn)為陽(yáng)性，其他點(diǎn)為陰性，應(yīng)判定HPV分型DNA檢測(cè)結(jié)果為陰性;如果有1個(gè)或1個(gè)以上HPV分型點(diǎn)為陽(yáng)性，代表該類型HPV檢測(cè)陽(yáng)性，結(jié)果為單一或混合HPV感染。

圖1 導(dǎo)流雜交膜人乳頭狀瘤病毒各基因亞型位點(diǎn)分布示意圖

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 10．0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。不同組別HPV陽(yáng)性率差異采用χ2檢驗(yàn)，對(duì)多重感染患者，各基因型HPV陽(yáng)性率重復(fù)計(jì)算。α=0．05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 HPV檢出概況 細(xì)胞學(xué)正常組HPV陽(yáng)性率為22．5%(27/120)，細(xì)胞學(xué)異常組陽(yáng)性率為87．3%(371/425)。細(xì)胞學(xué)異常組及細(xì)胞學(xué)異常類型6組HPV陽(yáng)性率分別與細(xì)胞學(xué)正常組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，見表1。

表1 545例宮頸篩查患者HPV-DNA檢測(cè)結(jié)果

2.2 HPV-DNA分型檢測(cè)結(jié)果 在細(xì)胞學(xué)正常組及異常組中不同類型組，HPV各基因型的陽(yáng)性率略有不同(表2)。細(xì)胞學(xué)正常組6種最為常見的HPV基因型按陽(yáng)性率遞減依次為 HPV16、68、18、52、58、11;細(xì)胞學(xué)異常組6種最為常見的HPV基因型依次為 HPV16、52、58、18、33、31，其中慢性宮頸炎組組 6種最為常見的 HPV 基因型依次為16、18、58、52、31、53，CINⅠ級(jí)組依次為 58、16、52、18、33、68，CIN Ⅱ級(jí)組依次為 16、52、58、18、33、CP8304，CIN Ⅲ級(jí)組依次為 16、58、52、18、31、33;宮頸癌組依次為 16、18、52、58、33、66;尖銳濕疣組最常見的基因型為HPV11，其次是 HPV6，HPV18、16 和 53 型位居其后，HPV16和(或)18陽(yáng)性者多數(shù)伴隨HPV11或6陽(yáng)性。

在細(xì)胞學(xué)異常組6種最為常見的HPV基因型中，除CINⅠ級(jí)組外，HPV16在細(xì)胞學(xué)正常組及異常各組中均居第1位，且陽(yáng)性率隨病變程度的加重明顯升高;HPV18陽(yáng)性率隨病變程度的加重也呈升高趨勢(shì)，在CINⅠ級(jí)、Ⅱ級(jí)和Ⅲ級(jí)組中居第4位，但在宮頸癌組居第2位;HPV52、58陽(yáng)性率隨病變程度的加重呈總體上升趨勢(shì);HPV33陽(yáng)性率隨病變程度的加重呈總體上升趨勢(shì)，在宮頸癌組居第5位;HPV31陽(yáng)性率波動(dòng)較大，雖然在CINⅠ級(jí)、Ⅱ級(jí)和Ⅲ級(jí)組隨病變程度的加重呈升高趨勢(shì)，但在宮頸癌組較低。

表2 HPV各基因型在細(xì)胞學(xué)正常組及異常組中的分布情況［陽(yáng)性例數(shù)(%)］

2.3 細(xì)胞學(xué)異常組HPV陽(yáng)性率與年齡的關(guān)系 20～歲組與51～歲組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，31～歲組、41～歲組HPV陽(yáng)性率高于51～歲組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，31～歲組感染率最高，41歲后隨年齡的增長(zhǎng)HPV陽(yáng)性率逐漸降低，見表3。

表3 細(xì)胞學(xué)異常組HPV陽(yáng)性與年齡的關(guān)系(n=425)

3 討論

研究顯示，HPV的持續(xù)感染是引發(fā)宮頸癌的重要原因之一［2］，對(duì)HPV感染的檢測(cè)和分型是處理宮頸病變的重要依據(jù)，也是宮頸癌篩查中不可缺少的內(nèi)容［3］。根據(jù)病毒致病力大小，HPV分為高危型和低危型，高危型HPV持續(xù)感染可導(dǎo)致CIN及宮頸癌。因此，近年來(lái)國(guó)內(nèi)外婦產(chǎn)科專家建議對(duì)30歲及以上婦女進(jìn)行HPV檢測(cè)及細(xì)胞學(xué)聯(lián)合的宮頸篩查［4］。目前實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)HPV亞型感染多采用斑點(diǎn)印跡法、熒光原位雜交法、Southern雜交法、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)法、第2代雜交捕獲(hybrid capture 2，HC-2)法［5-6］及導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)［7-10］。傳統(tǒng)的HPV分型方法操作較復(fù)雜、雜交效率低，目前臨床公認(rèn)的HPV檢測(cè)方法當(dāng)屬HC-2試驗(yàn)，但其缺點(diǎn)是不能具體對(duì)HPV進(jìn)行基因型分型，高危型和低危型不能同時(shí)檢測(cè)，不能判斷多重感染［11-12］。本文采用的導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)是HPV基因型分型檢測(cè)的新方法，該方法集導(dǎo)流雜交及基因芯片技術(shù)于一身，分析通量大，能同時(shí)對(duì)21種HPV基因型進(jìn)行快速分型檢測(cè)，包括5 種低危型:6、11、42、43、44，13 種高危型:16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68，3 種中國(guó)人群常見感染亞型:53、66、CP8304。除HC-2能檢測(cè)的18種基因型外，還包括66、53、81基因型，檢測(cè)的型別更多且可判斷多重感染，彌補(bǔ)了HC-2等其他檢測(cè)方法的不足，是目前最前沿的HPV分型檢測(cè)手段。導(dǎo)流雜交的技術(shù)原理為:將探針固定于膜纖維中，使目標(biāo)分子主動(dòng)導(dǎo)流穿過(guò)固定有探針的薄膜并與互補(bǔ)探針相結(jié)合，形成復(fù)合物而被固定下來(lái)，未被結(jié)合固定的分子穿過(guò)薄膜后被除去，加速了互補(bǔ)分子之間的相互作用，將雜交時(shí)間從幾個(gè)小時(shí)降至幾分鐘，比傳統(tǒng)雜交法省時(shí)幾百倍。

本研究采用導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)對(duì)545份宮頸細(xì)胞學(xué)標(biāo)本進(jìn)行了HPV-DNA分型檢測(cè)及分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞學(xué)正常組HPV陽(yáng)性率為22．5%，細(xì)胞學(xué)異?；颊逪PV陽(yáng)性率為87．3%，CIN及宮頸癌患者HPV陽(yáng)性率明顯高于細(xì)胞學(xué)正常組，且隨宮頸病變程度的加重，HPV陽(yáng)性率逐漸上升，宮頸癌組HPV陽(yáng)性率為100.0%，與文獻(xiàn)報(bào)道一致［13-14］，說(shuō)明HPV感染與宮頸病變嚴(yán)重程度密切關(guān)系，是導(dǎo)致宮頸癌前病變和宮頸癌的主要因素。

不同的地區(qū)HPV流行的基因型有所不同。有文獻(xiàn)報(bào)道，中國(guó)宮頸癌患者HPV16、18最常見，58和52 居第 3、4 位，再次為 31、33 和 45［15］;HPV52、58在上海地區(qū)宮頸癌患者中的陽(yáng)性率甚至高于HPV16、18，且HPV52、58的陽(yáng)性率南方地區(qū)較北方高［16］。本研究中，宮頸病變患者最常見的HPV基因型為 HPV16、18、52、58、33、31，與文獻(xiàn)報(bào)道一致［17］。國(guó)外學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌患者最常見的感染基因型為 HPV16、18、45、31、33、58、52，亞洲地區(qū)的 HPV58、52 型的感染率遠(yuǎn)高于 HPV45、31、33［18］，本文結(jié)果與報(bào)道相符。本研究中HPV43型的檢出率極低(0)，符合亞洲地區(qū)高危 HPV的流行狀況［7］。上述結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)，導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)檢測(cè)HPV分型結(jié)果的可靠性。

有研究認(rèn)為，HPV 的感染率與年齡有關(guān)［4，19］，HPV陽(yáng)性率在25歲以前出現(xiàn)第1個(gè)高峰，隨后下降，在圍絕經(jīng)期或絕經(jīng)后出現(xiàn)第2個(gè)高峰［20］。還有學(xué)者認(rèn)為，HPV感染與性行為密切相關(guān)，主要包括較早年齡初次性行為、性伴侶數(shù)和性伴侶的性行為等因素［21］。目前認(rèn)為，HPV感染的高危因素有性行為、年齡和吸煙等，HPV感染好發(fā)于18～30歲女性，但大多數(shù)為一過(guò)性的感染。若高危型HPV感染持續(xù)存在，則發(fā)生CIN與宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)將大大提高。本研究結(jié)果顯示，細(xì)胞學(xué)異常組31～歲、41～歲組HPV陽(yáng)性率顯著高于51～歲組，31～歲組感染率最高，但41歲后隨著年齡的增長(zhǎng)HPV陽(yáng)性率逐漸降低。提示31～41歲年齡段是育齡女性宮頸病變HPV感染的高發(fā)期，對(duì)30歲以上育齡女性進(jìn)行宮頸陰道細(xì)胞學(xué)檢查和HPV篩查意義更大。

總之，采用導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)檢測(cè)HPVDNA具有較高的特異性、敏感性、有效性、重復(fù)性和靈敏度，對(duì)判斷疾病類型、進(jìn)行治療后的隨訪及HPV流行狀況的分析都具有重要意義。

［1］ 廖丹梅，黃明春．HPV感染與子宮頸癌的研究現(xiàn)狀［J］．廣西醫(yī)學(xué)，2006，28(3):396-398．

［2］ McLachlin C M．Human Papillomavirus in cervical neoplasia．Role，risk factors，and implications［J］．Clin Lab Med，2000，20(2):257-270．

［3］ 郎景和．迎接子宮頸癌預(yù)防的全球挑戰(zhàn)與機(jī)遇［J］．中華婦產(chǎn)科雜志，2002，37(3):129-131．

［4］ 周紅，王秋偉，朱自強(qiáng)，等．宮頸病變?nèi)巳轭^狀瘤病毒分子檢測(cè)及分型的意義［J］．中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2011，21(4):438-441．

［5］ 程嬌影，卞美璐，馬莉，等．雜交捕獲二代與核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)宮頸癌前病變及宮頸癌的臨床價(jià)值［J］．中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2010，26(5):365-367．

［6］ Chen F，Shen Y H，Liu B，et al．Research of HC2 in HPV test［J］．NatMed JChi，2005，85(2):129-130．

［7］ 陶萍萍，卞美璐，歐華，等．導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)在人乳頭狀瘤病毒檢測(cè)中應(yīng)用的研究［J］．中華婦產(chǎn)科雜志，2006，41(1):43-47．

［8］ Tao P P，Bian M L，Ou H，et al．Application research on the flow-through hybridization and gene chip in human papilloma virus detection［J］．Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi，2006，41(1):43-47．

［9］ Lee S A，Kang D，Seo S S，et al．Multiple HPV infection in cervical cancer screened by HPV DNA chip［J］．Cancer Lett，2003，198(2):187-192．

［10］崔芳，黃永芳，趙文霞．上海市虹口區(qū)人乳頭狀瘤病毒亞型與宮頸病變的關(guān)系［J］．中國(guó)婦幼保健，2011，26(34):5326-5328．

［11］ Masumoto N，F(xiàn)ujii T，Ishikawa M，et al．Dominant human papillomavirus 16 infection in cervical neoplasia in young Japanese women;study of881 outpatients［J］．Gynecol Oncol，2004，94(2):509-514．

［12］ Stanczuk G A，Kay P，Sibanda E，et al．Typing of human papillomavirus in Zimbabwean patients with invasive cancer of the uterine cervix［J］．Acta Obstet Gynecol Scand，2003，82(8):762-766．

［13］趙方輝，戎壽德，喬友林，等．山西省襄垣縣婦女人乳頭狀瘤病毒感染與宮頸癌關(guān)系的研究［J］．中華流行病學(xué)雜志，2001，22(5):375-378．

［14］ Dell G，Gaston K．Human papillomaviruses and their role in cervical cancer［J］．Cell Mol Life Sci，2001，58(12-13):1923-1942．

［15］Lo KW，Wong Y F，Chan M K，etal．Prevalence of human papillomavirus in cervical cancer:a multicen terstudy in China［J］．Int J Cancer，2002，100(3):327-331．

［16］ Huang S，Afonina I，Miller B A，et al．Human papillomavirus types 52 and 58 are prevalent in cervical cancers from Chinese women［J］．Int J Cancer，1997，70(4):408-411．

［17］程艷香，江敬紅，史玉霞，等．HPV亞型在各型宮頸病變中的分布差異［J］．中國(guó)婦科保健，2010，25(24):3405-3408．

［18］ Clifford GM，Smith JS，PlummerM，etal．Human papillomavirus types in invasive cervical cancerworldwide:a meta-analysis［J］．Br JCancer，2003，88(1):63-73．

［19］張建明，周楊楊，程建平，等．328例宮頸病變婦女高危型人乳頭瘤病毒感染及基因型分析［J］．臨床輸血與檢驗(yàn)，2011，13(2):117-120．

［20］Agodi A，Bar chitta M，La Rosa N，et al．Human papillomavirus infection low-risk and hig h-risk genotypes in women in Catania，Sicily［J］．Int J Gynecol Cancer，2009，19(6):1094-1098．

［21］ Almonte M ，Albero G，Molano M，etal．Risk factors for human papillomavirus exposure and co-factors for cervical cancer in Latin America and the caribbean［J］．Vaccine，2008，26(Suppl 11):L16-L36．

Application Value of Flow-Through Hybridization with GeneChip Technique in Detection of the Human Papilloma Virus of Female Genital Tract

TIAN Yu-wang1，XU Chun-wei1，WANG Dong-yang2，CHEN Xi2(1．Departmentof Pathology，General Hospital of Beijing Military Area Command，Beijing 100700，China;2．Chaozhou Kaipu Biochemical Co．Ltd，Chaozhou，Guangdong 521000，China)

ObjectiveTo evaluate the clinical value of flow-through hybridization with genechip technology in detection of human papilloma virus(HPV)of female genital tract，and to explore themost common HPV genotypes and high nosogenic age．MethodsThe cervical cells of21 kinds of HPV genotyping assayswere performed for545 cervical cytology specimens using flow-through hybridization with genechip technology．The HPV-positive rateswere compared among normal cytology group(n=120)，abnormal cytology group(n=425)and abnormal types of abnormal cytology group 174 cases of chronic cervical inflammation，cervical intraepithelial neoplasia(102 cases of CIN I，74 cases of CIN IIand 36 cases of CIN III)，16 casesof cervical carcinoma and 23 cases of condyloma acuminatum］．Abnormal cytology group was divided into 4 age subgroups:85 cases of the 20－31 age group，140 cases of the 31－41 age group，90 cases of the 41－51 age group and 110 case of older than 51 age group，and HPV infection rates in the four groupswere compared．ResultsThe HPV － positive ratewas22．5%(27/120)in normal cytology group and 87．3%(371/425)in abnormal cytology group respectively．The differences in HPV-positive rates in abnormal cytology group and 6 subgroups in abnormal types of abnormal cytology group respectively compared with that in normal cytology group were statistically significant(P ＜0．01)．Six of the common HPV genotypes in normal cytology group were HPV16，68，18，52，58 and 11 in turn(by diminishing positive rate);six of themost common HPV genotypes in abnormal cytology group were HPV 16，52，58，18，33，31．The HPV-positive rates in the 31－41 age and the 41－51 age groupswere significantly higher than that in older than 51 age group(P＜0.01)，the31－41 age group had the highest HPV-positive rate，and the rate gradually decreased with age increasingwhen the patientswere 41 years old．ConclusionThe flow-through hybridization with genechip technologymay detecta variety of HPV infected subtypes and group types in justone test to improve the level of prevention and treatment of gynecologic cancer induced by HPV infection．

Genechip technology;Papillomavirus infection;Uterine cervical disease;DNA Fingerprinting

R319．9;R512．99

A

2095-140X(2014)05-0086-05

10．3969/j．issn．2095-140X．2014．05．024

100700北京，北京軍區(qū)總醫(yī)院病理科(田玉旺、許春偉);521000廣東潮州，潮州凱普生物化學(xué)有限公司(王東陽(yáng)、陳曦)

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2014-02-21 修回時(shí)間:2014-03-15)

·論著·