化療聯(lián)合CIK免疫療法治療晚期消化道腫瘤86例觀察

李 霞，趙穩(wěn)興，蔡 琳，崔 靜，王媛媛，徐文漭

化療聯(lián)合CIK免疫療法治療晚期消化道腫瘤86例觀察

李 霞，趙穩(wěn)興，蔡 琳，崔 靜，王媛媛，徐文漭

目的探討化療聯(lián)合CIK免疫療法對(duì)晚期消化道腫瘤的效果。方法 采用化療(方案以?shī)W沙利鉑、氟尿嘧啶、卡培他濱為主)聯(lián)合CIK免疫療法治療2005年10月—2010年1月成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院收治的晚期消化道惡性腫瘤86例(觀察組)，將同期僅接受化療的63例晚期消化道腫瘤設(shè)為對(duì)照組，分別于完成第2、4個(gè)療程后2周檢測(cè)兩組相關(guān)免疫指標(biāo)(CD56+、CD3+、CD3+CD56+、CD3+CD8+T細(xì)胞)，完成第2個(gè)療程后觀察兩組臨床癥狀(體重減輕、消化道出血、惡心、嘔吐)改善情況和總生存期，同時(shí)對(duì)比療效。結(jié)果 完成第2、4個(gè)療程后觀察組免疫指標(biāo)均高于對(duì)照組(P＜0.05，P＜0.01)。完成第2個(gè)療程后觀察組體重減輕、消化道出血、惡心和嘔吐癥狀均明顯緩解(P＜0.05，P＜0.01)。兩組近期療效差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。患者均獲隨訪，隨訪時(shí)間0．5～5年，觀察組中位生存期28個(gè)月，對(duì)照組中位生存期9個(gè)月，log-rank檢驗(yàn)兩條生存曲線差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4．851，P=0．028)。結(jié)論 化療聯(lián)合CIK免疫療法治療晚期消化道腫瘤，能夠提高患者的免疫功能、減輕臨床癥狀、延長(zhǎng)生存期。

消化系統(tǒng)腫瘤;免疫療法;細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞;抗腫瘤聯(lián)合化療方案

有研究表明，過(guò)繼性免疫治療對(duì)于晚期腫瘤是一種安全、可行的治療方法［1］。細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(cytokine-induced killer cells，CIK)免疫療法被廣泛認(rèn)為是新一代腫瘤過(guò)繼細(xì)胞免疫治療的首選方案，臨床試驗(yàn)結(jié)果表明具有較好的應(yīng)用前景［2］。本研究重點(diǎn)觀察采用化療聯(lián)合CIK免疫療法治療晚期消化道惡性腫瘤86例的效果。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象與分組 選擇2005年10月—2010年1月成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院收治的消化道惡性腫瘤86例設(shè)為觀察組，男50例，女36例;年齡39～84歲，中位年齡59歲;均為不能手術(shù)或術(shù)后復(fù)發(fā)的晚期消化道惡性腫瘤，其中胃癌12例，結(jié)腸癌18例，直腸癌34例，肝癌18例，膽囊癌4例，均經(jīng)病理活檢證實(shí)。將同期住院的、不愿接受CIK免疫療法治療的63例晚期消化道惡性腫瘤設(shè)為對(duì)照組，男32例，女31例;年齡42～82歲，中位年齡58歲;胃癌10例，結(jié)腸癌17例，直腸癌21例，肝癌11例，胰腺癌4例。所有患者治療前心血管系統(tǒng)及肝、腎功能基本正常，血白細(xì)胞總數(shù)≥2×109/L;卡氏(Karnofsky score，KPS)評(píng)分均≥50分;預(yù)計(jì)生存期3個(gè)月;近1個(gè)月未接受其他免疫治療?；颊呔炇鹬橥鈺?。兩組年齡、性別及疾病種類差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＞0．05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑:Pules-3000型血細(xì)胞分離機(jī)購(gòu)于美國(guó)百特公司，Therm CO2培養(yǎng)箱，EPPENDORF 5810R低溫離心機(jī)，Olympus倒置顯微鏡。AIM-V無(wú)血清培養(yǎng)基購(gòu)自GIBCO公司，白介素2(IL-2)購(gòu)自山東泉港藥業(yè)有限公司，γ干擾素(γ-IFN)購(gòu)自上海克隆生物高技術(shù)有限公司，CD3McAb購(gòu)自美國(guó)BD公司，淋巴細(xì)胞分離液購(gòu)自北京鼎國(guó)生物技術(shù)有限責(zé)任公司。

1.2.2 CIK細(xì)胞制備及檢測(cè):按文獻(xiàn)［3］方法制備CIK并應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

1.2.3 治療方案:兩組均予奧沙利鉑(130 mg/m2靜脈滴注，連續(xù)5 d，每3周給藥1次，共6個(gè)周期;齊魯制藥有限公司生產(chǎn))、氟尿嘧啶(400 mg/m2靜脈滴注，連用3 d，每周給藥1次，4次為1個(gè)療程;天津金耀氨基酸有限公司生產(chǎn))、卡培他濱(2．5 g/m2，每日總劑量分早晚2次飯后30 min口服，連用2周，間隔1周，每3周重復(fù)1次，共6個(gè)周期;上海羅氏制藥有限公司生產(chǎn))為主的化療方案。觀察組行化療前給予1次CIK回輸，化療結(jié)束后2周再回輸，每天1次，連輸3 d為1個(gè)療程［4］。每次細(xì)胞數(shù)量＞109，每3個(gè)月重復(fù)1次，共4個(gè)療程。

1.3 觀察指標(biāo)及療效評(píng)估

1.3.1 觀察指標(biāo):分別于完成第2、4個(gè)療程后2周檢測(cè)相關(guān)免疫指標(biāo)(CD56+、CD3+、CD3+CD56+、CD3+CD8+T細(xì)胞)，完成第2個(gè)療程后觀察臨床癥狀(體重減輕、消化道出血、惡心、嘔吐)改善情況和總生存期。

1.3.2 療效評(píng)估:采用WHO實(shí)體瘤近期療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn):完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、穩(wěn)定(SD)、進(jìn)展(PD)，有效(RR)率(%)=(CR+PR)例數(shù)/總例數(shù)×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 17．0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，采用Kaplan-Meier法計(jì)算生存率，采用log-rank檢驗(yàn)比較，α=0．05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)

2 結(jié)果

2.1 免疫指標(biāo) 完成第2、4個(gè)療程治療后2周，觀察組免疫指標(biāo)均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05，P ＜0.01)，見表1。

表1 兩組晚期消化道腫瘤患者完成第2、4個(gè)療程后2周免疫指標(biāo)變化(±s)

表1 兩組晚期消化道腫瘤患者完成第2、4個(gè)療程后2周免疫指標(biāo)變化(±s)

注:觀察組、治療組均予奧沙利鉑、氟尿嘧啶、卡培他濱為主的化療方案，觀察組同時(shí)予細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞免疫療法

組別 例數(shù)(完成第2/4個(gè)療程)完成第2個(gè)療程后2周CD56+ CD3+ CD3+CD56+ CD3+CD8+完成第4個(gè)療程后2周CD56+ CD3+ CD3+CD56+ CD3+CD8+觀察組 73/65 0．270 ±0．005 0．664 ±0．004 0．365 ±0．003 0．310 ±0．005 0．273 ±0．005 0．675 ±0．007 0．375 ±0．007 0．323 ±0．008對(duì)照組 42/15 0．228 ±0．004 0．651 ±0．004 0．343 ±0．005 0．297 ±0．005 0．243 ±0．005 0．660 ±0．006 0．353 ±0．007 0．299 ±0．008 6．440 2．453 3．742 1．999 20．253 8．069 11．579 10．425 P 0．000 0．016 0．000 0．049 0．000 0．000 0．000 0．000 t

2.2 臨床癥狀改善情況 完成2個(gè)療程后觀察組體重減輕、消化道出血癥狀、惡心和嘔吐癥狀均明顯緩解，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05，P ＜0.01)，見表2。

2.3 近期療效 對(duì)完成2個(gè)或2個(gè)以上療程者(觀察組73例，對(duì)照組42例)進(jìn)行療效判定。觀察組有效率(65．8%，48/73)高于對(duì)照組(35．7%，15/42)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

2.4 生存率 患者均獲隨訪，隨訪時(shí)間0．5～5年，觀察組中位生存期28個(gè)月，對(duì)照組中位生存期9個(gè)月，log-rank檢驗(yàn)兩條生存曲線差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4．851，P=0．028，圖 1)，觀察組生存率高于對(duì)照組。

表2 兩組晚期消化道腫瘤患者完成2個(gè)療程后臨床癥狀發(fā)生率比較(%)

圖1 兩組晚期消化道腫瘤患者生存曲線

3 討論

3.1 CIK免疫療法的特點(diǎn) CIK細(xì)胞來(lái)源于CD3+CD8+細(xì)胞［5］，主要由 CD3+CD56+和 CD3+CD8+亞群組成，其中CD3+CD56+T細(xì)胞也稱為自然殺傷活性T細(xì)胞(natural killer active T cell，NKT)，其含量在正常人外周血中極少［6］。CD3+CD8+T細(xì)胞為細(xì)胞毒性T細(xì)胞(cytotoxicity t lymphocyte，CTL)，是機(jī)體內(nèi)發(fā)揮細(xì)胞免疫功能的主要效應(yīng)細(xì)胞，具有抗腫瘤活性。CIK增殖速度快，可殺傷腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞、清除病毒［7］，具有以下特點(diǎn):①增強(qiáng)機(jī)體免疫功能;②增強(qiáng)放、化療的敏感性，減輕不良反應(yīng);③清除手術(shù)及放、化療后的微小病灶和殘余腫瘤細(xì)胞，無(wú)明顯毒性反應(yīng);④對(duì)常規(guī)治療無(wú)效的患者效果明顯。

3.2 CIK免疫療法適應(yīng)證 ①早期腫瘤患者。對(duì)于早期原發(fā)腫瘤病灶，CIK免疫療法治療可有效控制腫瘤細(xì)胞發(fā)展，直至全部殺滅腫瘤細(xì)胞。②無(wú)法耐受手術(shù)及放、化療的患者。③聯(lián)合放、化療的患者。聯(lián)合應(yīng)用CIK免疫療法可提高放、化療效果，迅速緩解臨床癥狀。④術(shù)后恢復(fù)患者。⑤晚期腫瘤患者。通過(guò)激活機(jī)體的免疫功能，識(shí)別和殺傷腫瘤細(xì)胞，有效延長(zhǎng)患者的生存時(shí)間，提高生存質(zhì)量。

3.3 化療聯(lián)合CIK免疫療法的優(yōu)勢(shì) 在腫瘤形成過(guò)程中，機(jī)體失去正常的免疫監(jiān)視功能，晚期惡性腫瘤患者免疫系統(tǒng)功能常更為低下［8］?；熀?，體內(nèi)殘存腫瘤細(xì)胞的清除依賴于機(jī)體的免疫系統(tǒng)，然而多個(gè)療程的化療又會(huì)在很大程度上進(jìn)一步造成機(jī)體免疫功能低下，這可能是化療后腫瘤復(fù)發(fā)率仍然較高的重要原因之一。CIK可在體外進(jìn)行大量擴(kuò)增，兼有對(duì)惡性腫瘤細(xì)胞的直接殺傷作用及調(diào)解宿主免疫功能的雙重優(yōu)勢(shì)［9］?；熀笮蜇瀾?yīng)用CIK過(guò)繼性免疫治療，通過(guò)提高機(jī)體的免疫力、增強(qiáng)機(jī)體抗腫瘤免疫效應(yīng)，降低患者術(shù)后的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。目前，CIK已經(jīng)廣泛應(yīng)用于晚期胃癌、肝癌、肺癌等多種實(shí)體瘤的治療，CIK免疫療法與化療等其他治療手段聯(lián)合應(yīng)用有助于提高患者的生存質(zhì)量、延長(zhǎng)生存期［1，10-12］。有研究發(fā)現(xiàn)，增加 CIK 治療頻率可進(jìn)一步延長(zhǎng)胃癌患者的生存期［13］。石亮榮等［14］的研究結(jié)果也提示，對(duì)于Ⅲ期胃癌術(shù)后化療后進(jìn)行CIK治療可改善患者免疫功能，延長(zhǎng)患者的生存期。周炳喜［15］研究發(fā)現(xiàn)，CIK 治療觀察組血清 CA199、CEA、AFP、CA242及CA724水平均低于對(duì)照組，且不良反應(yīng)發(fā)生率也較低。

本研究結(jié)果顯示，予化療聯(lián)合CIK免疫療法治療的觀察組體內(nèi) CD56+、CD3+CD56+和 CD3+CD8+T細(xì)胞水平顯著高于對(duì)照組，說(shuō)明患者體內(nèi)腫瘤特異性免疫殺傷細(xì)胞水平明顯增高，免疫水平處在較高且平穩(wěn)的免疫激活水平，有利于效應(yīng)細(xì)胞聯(lián)合化療藥物發(fā)揮對(duì)原位腫瘤細(xì)胞及術(shù)后殘存腫瘤細(xì)胞的殺傷作用，提高治療效果。免疫重建功能的加強(qiáng)，理論上利于機(jī)體抗腫瘤能力的增強(qiáng)，可以轉(zhuǎn)化為生存的優(yōu)勢(shì)，這在本研究中得到證實(shí)。通過(guò)長(zhǎng)期隨訪發(fā)現(xiàn)，與僅行化療的對(duì)照組比較，觀察組中位生存期延長(zhǎng)了19個(gè)月，總生存率顯著優(yōu)于對(duì)照組，顯示了化療聯(lián)合CIK免疫療法治療的優(yōu)勢(shì)，為晚期消化道惡性腫瘤患者的治療提供了可靠方法。

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Chemotherapy Combined with CIK Cells Immunotherapy in Treatment of 86 Patientswith Advanced Digestive Malignant Tumor

LIXiaa，ZHAOWen-xingb，CAILinb，CUIJingb，WANG Yuan-yuanb，XUWen-mangb(Kunming General Hospital of Chengdu Military Area Command，a．Orthopedics and Trauma Institute of PLA，b．Department of Pathology，Kunming 650032，China)

ObjectiveTo explore the effect of chemotherapy combined with CIK cells immunotherapy in treatment of advanced digestivemalignant tumor．MethodsA total of86 patientswith advanced gastrointestinal cancer(observation group)were treated with chemotherapy(main components of Oxaliplatin，F(xiàn)luorouracil，Capecitabine)combined with CIK immunotherapy during October2005 and January2010 in Kunming General Hospital，and 63 patientswith advanced gastrointestinal tumors(controlgroup)

only chemotherapy at the same period．The related immune parameters(CD56+，CD3+，CD3+CD56+，CD3+CD8+T cells)of the two groupswere detected twoweeks after 2ndand 4thcourses of treatmentwere finished respectively，and improvements of clinical symptoms(weight loss，gastrointestinal bleeding，nausea and vomiting)and total life span were observed，and clinical effectwas synchronously compared after 2ndcourse of treatmentwas completed in the two groups．ResultsAfter 2ndand 4thcourse of treatment was completed，the immune parameters in observation group were higher than those in control group(P＜0.05，P＜0.01)．After 2ndcourse of treatmentwas completed，weight loss，gastrointestinal bleeding，nausea and vomitingwere significantly alleviated in observation group(P＜0.05，P＜0.01)，and the difference in recent curative effectwas not statistically significant(P＞0.05)，and the difference in recent curative effectwas not statistically significant(P＞0.05)．All patients were followed up for0．5 － 5 years，themedian life span in observation group was28months;median life span in control group was 9 months，and the difference in survival curves by log-rank testwas statistically significant(χ2=4．851，P=0．028)．ConclusionChemotherapy combined with CIK cells immunotherapy in treatment of advanced digestivemalignant tumormay improve immune function，relieve clinical symptoms and prolong life span．

Digestive system neoplasm;Immunotherapy;Cytokine-induced killer cell;Antineoplastic combined chemotherapy protocol

R735;R392．12;R979．1

A

2095-140X(2014)05-0038-03

10．3969/j．issn．2095-140X．2014．05．010

云南省應(yīng)用基礎(chǔ)研究自籌項(xiàng)目(2010ZC186)

650032昆明，成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院全軍創(chuàng)傷骨科研究所(李霞)，病理科(趙穩(wěn)興、蔡琳、崔靜、王媛媛、徐文漭)

徐文漭，E-mail:highskysky@126．com

2014-01-09 修回時(shí)間:2014-02-13)

·論著·