肺炎支原體感染咽拭子快速培養(yǎng)的臨床研究

陳惠琴++++++丁后昌++++++肖志剛++++++廖思森++++++孫叢萌

[摘要] 目的 探討肺炎支原體咽拭子快速培養(yǎng)在兒童支原體感染診斷中的臨床應(yīng)用價(jià)值。 方法 對2010年6月～2012年9月呼吸道感染住院患兒進(jìn)行肺炎支原體咽拭子快速培養(yǎng)，研究結(jié)束后作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析（陽性率）。結(jié)果 檢測患兒1500例，陽性數(shù)為537例，陽性率為35.8%。其中，≤1歲、2～3歲、4～6歲及7～12歲年齡組患兒的肺炎支原體陽性檢出率分別為27.2%、42.7%、44.7%和26.7%；陽性率與性別無關(guān)。 結(jié)論 肺炎支原體咽拭子快速培養(yǎng)對兒童肺炎支原體感染的早期診斷具有重要的臨床價(jià)值，最適于基層醫(yī)院推廣應(yīng)用。

[關(guān)鍵詞] 肺炎支原體；咽拭子；培養(yǎng)

[中圖分類號] R563.13 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 1673-9701（2014）01-0145-03

支原體肺炎又稱原發(fā)性非典型肺炎，是學(xué)齡兒童及青年常見的一種肺炎，嬰幼兒也不少見，主要靠呼吸道飛沫傳播，全年均有發(fā)病，好發(fā)于冬春季，以3～6歲小兒多見[1]。近年來，小兒支原體肺炎發(fā)病率逐年增加，越來越受到重視。據(jù)統(tǒng)計(jì)，支原體肺炎占小兒肺炎的比率也在不斷上升。文獻(xiàn)報(bào)道，肺炎支原體感染占兒童社區(qū)獲得性肺炎（CAP）病原的10%～30%，國外文獻(xiàn)報(bào)道為50%，故支原體肺炎（MPP）越來越受到人們的重視。早期快速簡易的診斷并及時(shí)治療有利于縮短患兒病程、減少并發(fā)癥，為此，我們對呼吸道感染及疑似肺炎支原體感染住院患兒進(jìn)行肺炎支原體咽拭子快速培養(yǎng)，結(jié)果陽性作為診斷依據(jù)，及時(shí)使用大環(huán)內(nèi)酯類抗生素治療，取得較好的療效。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇我院2010年6月～2012年9月呼吸道感染及疑似肺炎支原體感染的住院患兒1500例，男816例，女684例，≤1歲346例，2～3歲393例，4～6歲398例，7～12歲363例。

1.2 方法

采用肺炎支原體咽拭子快速培養(yǎng)法：清晨患兒未洗漱、進(jìn)食前用經(jīng)無菌生理鹽水濕潤的咽拭子取咽部分泌物，半小時(shí)內(nèi)接種到預(yù)溫37℃的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。此法是利用肺炎支原體的代謝產(chǎn)物使培養(yǎng)基液體中的指示劑顏色發(fā)生改變來判斷其生長。培養(yǎng)基液體顏色由紫紅色變?yōu)椴菥G色或嫩綠色且清亮，或在靜置時(shí)，瓶底有藍(lán)色顆粒或物質(zhì)沉淀為陽性，24 h后培養(yǎng)基顏色不變或無藍(lán)色顆粒或物質(zhì)沉淀為陰性。根據(jù)檢測陽性結(jié)果及時(shí)使用大環(huán)內(nèi)酯類抗生素治療。陽性患兒出院后予阿奇霉素、克拉霉素序貫口服半個(gè)月，1個(gè)月后復(fù)查咽拭子。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，分別計(jì)算出各年齡組肺炎支原體培養(yǎng)陽性率，并進(jìn)行配對計(jì)數(shù)資料的χ2檢驗(yàn)；P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

1500例中537例肺炎支原體培養(yǎng)結(jié)果呈陽性，陽性率 35.8%，其中男296例，36.3%，女241例，35.2%，經(jīng)分析男女發(fā)病率無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.18，P>0.05）?！?歲94例，27.2%；2～3歲168例，42.7%；4～6歲178例，44.7%； 7～12歲97例，26.7%。其中2～6歲陽性率43.7%，占64.4%。537例肺炎支原體陽性患兒均予阿奇霉素靜滴3～5 d，出院后予阿奇霉素、克拉霉素序貫口服半個(gè)月，出院1個(gè)月后復(fù)查咽拭子，496例轉(zhuǎn)陰（92.4%），41例未轉(zhuǎn)陰者繼續(xù)予阿奇霉素、克拉霉素序貫口服，半個(gè)月后再次復(fù)查，均轉(zhuǎn)陰。

表1 各年齡組肺炎支原體培養(yǎng)陽性率比較

注：≤1歲組與2～3歲組陽性率比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=19.52，P <0.01）；2～3歲組與4～6歲組陽性率比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.314，P>0.05），≤1歲與2～6歲組陽性率比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2= 27.87，P <0.01）， 7～12歲與2～6歲組陽性率比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=30.48，P <0.01）

結(jié)果顯示，2～3歲組與4～6歲組發(fā)病率無明顯差異；≤1歲組、7～12歲組無明顯差異；2～6歲組與≤1歲組、7～12歲組均有顯著性差異。

3 討論

支原體肺炎是肺炎支原體（mycoplasma pneumoniae，MP）引起的急性呼吸道和肺部急性炎癥病變，又稱原發(fā)性非典型肺炎。肺炎支原體是小兒呼吸道感染的重要病原之一，全年均有發(fā)病，以冬春季較多，是學(xué)齡兒童及青年常見的一種肺炎，嬰幼兒也不少見。主要表現(xiàn)為頭痛、咽痛、發(fā)熱、咳嗽等一般的呼吸道癥狀，陣發(fā)性干咳、反復(fù)或長期咳嗽是其特征性表現(xiàn)。但肺炎支原體易感人群為嬰幼兒，其機(jī)體免疫機(jī)制尚未完善，機(jī)體免疫能力低下，易長期反復(fù)感染，病程長，診斷若不及時(shí)，易誘發(fā)多種并發(fā)癥。近年來，小兒支原體肺炎發(fā)病率在逐年增加。支原體肺炎在非流行年間約占小兒肺炎病原的10%～20%，流行年份則高達(dá)30%以上[2]。近10多年的臨床研究表明，肺炎支原體感染也是呼吸道以外多個(gè)器官疾病的重要原因，可引起多系統(tǒng)、多器官損害，所以早期快速地檢查出病原體非常必要。早期快速簡易的診斷、及時(shí)用大環(huán)內(nèi)酯類抗生素有利于縮短患兒病程、減少并發(fā)癥的發(fā)生。有資料顯示，食物殘?jiān)仕嵝裕锌赡艹霈F(xiàn)假陽性，所以我們采用清晨洗漱、進(jìn)餐前采樣，避免漏診、誤診。本課題主要研究呼吸道感染及疑似肺炎支原體感染的住院患兒肺炎支原體咽拭子快速培養(yǎng)法的臨床應(yīng)用價(jià)值。在本組研究資料中，肺炎支原體陽性率達(dá)35.8%，其中2～6歲陽性率43.7%，占總陽性數(shù)的64.4%，診斷符合率高，顯示學(xué)齡前兒童發(fā)病率較高，可能與學(xué)齡前兒童生理器官不成熟、免疫系統(tǒng)分化較低、機(jī)體屏障功能差、體質(zhì)弱、常到游樂場所有關(guān)。男36.3%，女35.2%，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，男女發(fā)病率無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；本組肺炎支原體陽性病例肺外器官受累153例（28.5%），其中39例以肺外表現(xiàn)為首發(fā)癥狀起病，就診時(shí)主要表現(xiàn)為無明顯誘因出現(xiàn)發(fā)熱、腹瀉、心動(dòng)過速、疲乏、精神差，血生化提示心肌酶譜、肝酶、膽汁酸、CRP異常升高等，無呼吸系統(tǒng)癥狀及肺部體征，經(jīng)檢查排除其他系統(tǒng)疾病，給予大環(huán)內(nèi)酯類抗生素后癥狀明顯改善。因此，對臨床上不能按常見病原解釋、常規(guī)治療癥狀改善不理想的患兒，應(yīng)高度懷疑肺炎支原體感染，尤其以肺外表現(xiàn)為首發(fā)癥狀的患兒，應(yīng)盡早做咽拭子痰液支原體快速培養(yǎng)，以免誤診，漏診。endprint

目前，檢測肺炎支原體感染的方法主要有PCR檢測肺炎支原體DNA、血清IgM抗體檢測、咽拭子支原體快速培養(yǎng)等。PCR檢測肺炎支原體DNA診斷快速、敏感、特異性高，可作早期診斷手段，但此法實(shí)驗(yàn)條件要求較高，僅在科研單位及部分三級醫(yī)院開展，而廣大基層醫(yī)院未能開展。血清IgM抗體檢測陽性率最高，該法是檢測血清中的抗體，而非直接檢測病原體；但機(jī)體感染后1周左右才產(chǎn)生IgM抗體，發(fā)病初期不能被檢測出，對早期病例不利，可能造成漏診，不能及時(shí)治療； 約2～4周達(dá)高峰，一般12～16周轉(zhuǎn)陰[3]，因而陽性結(jié)果并不能確診是支原體感染。而肺炎支原體咽拭子快速培養(yǎng)法主要是檢測病原，不受病程影響，感染初期就可檢測出肺炎支原體，可早期快速診斷急性呼吸道支原體感染[4]。此法是用肺炎支原體專用液體培養(yǎng)基進(jìn)行支原體快速培養(yǎng)，利用肺炎支原體的代謝產(chǎn)物使培養(yǎng)基液體中的指示劑顏色發(fā)生改變來判斷其生長。根據(jù)相關(guān)資料報(bào)道[5，6]，在肺炎支原體檢測的各種方法中，咽拭子快速培養(yǎng)法陽性病例病程最短，提示病程較短的患者選擇此法檢測的陽性率較高，對于支原體感染的臨床診斷具有明顯的優(yōu)勢，尤其是早期患兒，效果較優(yōu)[7]。此法操作簡單、需時(shí)短、陽性率高、特異性強(qiáng)、靈敏度高，臨床符合率高，價(jià)格便宜，適合一般實(shí)驗(yàn)室推廣應(yīng)用，可作為診斷支原體感染的首選試驗(yàn)[8]。本組資料中，陽性患兒（537例）經(jīng)正規(guī)治療、出院1個(gè)月后均回院復(fù)查肺炎支原體咽拭子快速培養(yǎng)， 496例轉(zhuǎn)陰（92.4%），41例未轉(zhuǎn)陰者繼續(xù)予阿奇霉素序貫口服，半個(gè)月后再次復(fù)查，均轉(zhuǎn)陰。結(jié)果表明，肺炎支原體病原體在咽部存留時(shí)間（約7～9周）較血清中MP-IgM抗體（12～16周）短。張國英等報(bào)道培養(yǎng)法的臨床符合率100%，而抗體檢測的符合率是90.4%[9]。結(jié)合本組資料結(jié)果及采集咽拭子標(biāo)本操作方便、簡單，患兒無痛苦，兒童順應(yīng)性好，價(jià)格便宜，患兒及家屬易于接受，檢測需時(shí)短，對早期診斷更可靠，我們認(rèn)為咽拭子支原體快速培養(yǎng)最適合于基層醫(yī)院推廣應(yīng)用[10]。

綜上所述，兒童肺炎支原體感染好發(fā)于學(xué)齡前和學(xué)齡兒童，有肺外表現(xiàn)者可累及各個(gè)系統(tǒng)，治療上應(yīng)選擇具有影響肺炎支原體蛋白質(zhì)合成作用的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，采用阿奇霉素靜滴及口服序貫治療，直至培養(yǎng)轉(zhuǎn)陰。另外，我們建議對所有住院的呼吸道感染的患兒常規(guī)進(jìn)行肺炎支原體咽拭子快速培養(yǎng)法檢測，可早期發(fā)現(xiàn)肺炎支原體感染不典型病例，尤其是伴肺外表現(xiàn)者及以肺外表現(xiàn)為首發(fā)癥狀者，從而避免漏診、誤診。

[參考文獻(xiàn)]

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（收稿日期：2013-08-05）endprint

目前，檢測肺炎支原體感染的方法主要有PCR檢測肺炎支原體DNA、血清IgM抗體檢測、咽拭子支原體快速培養(yǎng)等。PCR檢測肺炎支原體DNA診斷快速、敏感、特異性高，可作早期診斷手段，但此法實(shí)驗(yàn)條件要求較高，僅在科研單位及部分三級醫(yī)院開展，而廣大基層醫(yī)院未能開展。血清IgM抗體檢測陽性率最高，該法是檢測血清中的抗體，而非直接檢測病原體；但機(jī)體感染后1周左右才產(chǎn)生IgM抗體，發(fā)病初期不能被檢測出，對早期病例不利，可能造成漏診，不能及時(shí)治療； 約2～4周達(dá)高峰，一般12～16周轉(zhuǎn)陰[3]，因而陽性結(jié)果并不能確診是支原體感染。而肺炎支原體咽拭子快速培養(yǎng)法主要是檢測病原，不受病程影響，感染初期就可檢測出肺炎支原體，可早期快速診斷急性呼吸道支原體感染[4]。此法是用肺炎支原體專用液體培養(yǎng)基進(jìn)行支原體快速培養(yǎng)，利用肺炎支原體的代謝產(chǎn)物使培養(yǎng)基液體中的指示劑顏色發(fā)生改變來判斷其生長。根據(jù)相關(guān)資料報(bào)道[5，6]，在肺炎支原體檢測的各種方法中，咽拭子快速培養(yǎng)法陽性病例病程最短，提示病程較短的患者選擇此法檢測的陽性率較高，對于支原體感染的臨床診斷具有明顯的優(yōu)勢，尤其是早期患兒，效果較優(yōu)[7]。此法操作簡單、需時(shí)短、陽性率高、特異性強(qiáng)、靈敏度高，臨床符合率高，價(jià)格便宜，適合一般實(shí)驗(yàn)室推廣應(yīng)用，可作為診斷支原體感染的首選試驗(yàn)[8]。本組資料中，陽性患兒（537例）經(jīng)正規(guī)治療、出院1個(gè)月后均回院復(fù)查肺炎支原體咽拭子快速培養(yǎng)， 496例轉(zhuǎn)陰（92.4%），41例未轉(zhuǎn)陰者繼續(xù)予阿奇霉素序貫口服，半個(gè)月后再次復(fù)查，均轉(zhuǎn)陰。結(jié)果表明，肺炎支原體病原體在咽部存留時(shí)間（約7～9周）較血清中MP-IgM抗體（12～16周）短。張國英等報(bào)道培養(yǎng)法的臨床符合率100%，而抗體檢測的符合率是90.4%[9]。結(jié)合本組資料結(jié)果及采集咽拭子標(biāo)本操作方便、簡單，患兒無痛苦，兒童順應(yīng)性好，價(jià)格便宜，患兒及家屬易于接受，檢測需時(shí)短，對早期診斷更可靠，我們認(rèn)為咽拭子支原體快速培養(yǎng)最適合于基層醫(yī)院推廣應(yīng)用[10]。

綜上所述，兒童肺炎支原體感染好發(fā)于學(xué)齡前和學(xué)齡兒童，有肺外表現(xiàn)者可累及各個(gè)系統(tǒng)，治療上應(yīng)選擇具有影響肺炎支原體蛋白質(zhì)合成作用的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，采用阿奇霉素靜滴及口服序貫治療，直至培養(yǎng)轉(zhuǎn)陰。另外，我們建議對所有住院的呼吸道感染的患兒常規(guī)進(jìn)行肺炎支原體咽拭子快速培養(yǎng)法檢測，可早期發(fā)現(xiàn)肺炎支原體感染不典型病例，尤其是伴肺外表現(xiàn)者及以肺外表現(xiàn)為首發(fā)癥狀者，從而避免漏診、誤診。

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（收稿日期：2013-08-05）endprint

目前，檢測肺炎支原體感染的方法主要有PCR檢測肺炎支原體DNA、血清IgM抗體檢測、咽拭子支原體快速培養(yǎng)等。PCR檢測肺炎支原體DNA診斷快速、敏感、特異性高，可作早期診斷手段，但此法實(shí)驗(yàn)條件要求較高，僅在科研單位及部分三級醫(yī)院開展，而廣大基層醫(yī)院未能開展。血清IgM抗體檢測陽性率最高，該法是檢測血清中的抗體，而非直接檢測病原體；但機(jī)體感染后1周左右才產(chǎn)生IgM抗體，發(fā)病初期不能被檢測出，對早期病例不利，可能造成漏診，不能及時(shí)治療； 約2～4周達(dá)高峰，一般12～16周轉(zhuǎn)陰[3]，因而陽性結(jié)果并不能確診是支原體感染。而肺炎支原體咽拭子快速培養(yǎng)法主要是檢測病原，不受病程影響，感染初期就可檢測出肺炎支原體，可早期快速診斷急性呼吸道支原體感染[4]。此法是用肺炎支原體專用液體培養(yǎng)基進(jìn)行支原體快速培養(yǎng)，利用肺炎支原體的代謝產(chǎn)物使培養(yǎng)基液體中的指示劑顏色發(fā)生改變來判斷其生長。根據(jù)相關(guān)資料報(bào)道[5，6]，在肺炎支原體檢測的各種方法中，咽拭子快速培養(yǎng)法陽性病例病程最短，提示病程較短的患者選擇此法檢測的陽性率較高，對于支原體感染的臨床診斷具有明顯的優(yōu)勢，尤其是早期患兒，效果較優(yōu)[7]。此法操作簡單、需時(shí)短、陽性率高、特異性強(qiáng)、靈敏度高，臨床符合率高，價(jià)格便宜，適合一般實(shí)驗(yàn)室推廣應(yīng)用，可作為診斷支原體感染的首選試驗(yàn)[8]。本組資料中，陽性患兒（537例）經(jīng)正規(guī)治療、出院1個(gè)月后均回院復(fù)查肺炎支原體咽拭子快速培養(yǎng)， 496例轉(zhuǎn)陰（92.4%），41例未轉(zhuǎn)陰者繼續(xù)予阿奇霉素序貫口服，半個(gè)月后再次復(fù)查，均轉(zhuǎn)陰。結(jié)果表明，肺炎支原體病原體在咽部存留時(shí)間（約7～9周）較血清中MP-IgM抗體（12～16周）短。張國英等報(bào)道培養(yǎng)法的臨床符合率100%，而抗體檢測的符合率是90.4%[9]。結(jié)合本組資料結(jié)果及采集咽拭子標(biāo)本操作方便、簡單，患兒無痛苦，兒童順應(yīng)性好，價(jià)格便宜，患兒及家屬易于接受，檢測需時(shí)短，對早期診斷更可靠，我們認(rèn)為咽拭子支原體快速培養(yǎng)最適合于基層醫(yī)院推廣應(yīng)用[10]。

綜上所述，兒童肺炎支原體感染好發(fā)于學(xué)齡前和學(xué)齡兒童，有肺外表現(xiàn)者可累及各個(gè)系統(tǒng)，治療上應(yīng)選擇具有影響肺炎支原體蛋白質(zhì)合成作用的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，采用阿奇霉素靜滴及口服序貫治療，直至培養(yǎng)轉(zhuǎn)陰。另外，我們建議對所有住院的呼吸道感染的患兒常規(guī)進(jìn)行肺炎支原體咽拭子快速培養(yǎng)法檢測，可早期發(fā)現(xiàn)肺炎支原體感染不典型病例，尤其是伴肺外表現(xiàn)者及以肺外表現(xiàn)為首發(fā)癥狀者，從而避免漏診、誤診。

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（收稿日期：2013-08-05）endprint