調(diào)查南昌地區(qū)無償獻(xiàn)血人群中Rh血型抗原分布

劉福昌，王小紅，許春玲，謝琪，黃輝，李榕

(南昌市血站輸血研究室，江西南昌330025)

調(diào)查南昌地區(qū)無償獻(xiàn)血人群中Rh血型抗原分布

劉福昌，王小紅，許春玲，謝琪，黃輝，李榕

(南昌市血站輸血研究室，江西南昌330025)

目的了解南昌地區(qū)無償獻(xiàn)血人群中Rh血型抗原分布情況及其基因頻率的分布規(guī)律。方法采用血型血清學(xué)方法檢測(cè)獻(xiàn)血者Rh血型，并采用血型群體遺傳學(xué)研究方法，選擇漢族RhD(+)獻(xiàn)血者355例和RhD(-)獻(xiàn)血者660例進(jìn)行Rh血型表型及基因頻率檢測(cè)研究。結(jié)果2000年1月至2013年1月無償獻(xiàn)血者197 438例，確認(rèn)RhD(-)692例，占0.3505%；其中187 397例為漢族獻(xiàn)血者，確認(rèn)RhD(-)660例，占0.3522%，基因頻率：d為0.0593，D為0.9407；RhD(+)中單倍型基因頻率分別為cDe(0.0879)、CDe(0.6586)、cDE(0.2283)和CDE(0.0252)，表型頻率以CCDee(43.38%)為最高，抗原頻率分別為C88.73%、c53.24%、E41.97%、e91.27%；RhD(-)中單倍型基因頻率分別為cde(0.7528)、Cde(0.2157)、cdE(0.0286)和CdE(0.0029)，表型頻率以ccdee(56.67%)為最高，抗原頻率分別為C 39.94%、c91.82%、E6.21%、e為99.70%。結(jié)論調(diào)查南昌地區(qū)Rh血型抗原分布的特點(diǎn)，為建立Rh血型獻(xiàn)血者資料庫做好準(zhǔn)備，進(jìn)而為特殊輸血患者個(gè)性化輸血治療提供檢索依據(jù)。

Rh血型；表型；抗原頻率；基因頻率；無償獻(xiàn)血者

血型作為一種遺傳性狀，對(duì)于人類學(xué)和遺傳學(xué)的研究具有重要的意義，ABO血型和Rh血型另一方面對(duì)于人類臨床輸血的意義非凡，ABO和Rh血型雖已廣泛為臨床所關(guān)注，但是由于Rh血型抗原在不同地區(qū)的分布具有一定的差異性，因此，有必要了解和掌握本地區(qū)Rh血型抗原分布規(guī)律，建立本地區(qū)獻(xiàn)血者Rh抗原檔案，才能科學(xué)地管理獻(xiàn)血者，更好地保證臨床輸血安全、及時(shí)和有效。我們對(duì)南昌地區(qū)無償獻(xiàn)血者Rh血型抗原進(jìn)行了調(diào)查分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 調(diào)查對(duì)象2000年1月1日年至2013年1月1日南昌地區(qū)無償獻(xiàn)血者，年齡為18～55周歲，以身份證號(hào)作為惟一性建立獻(xiàn)血檔案，采用唐山現(xiàn)代血站管理軟件Modern 5.0檢索排除重復(fù)獻(xiàn)血者，檢索出獻(xiàn)血者共計(jì)197 438例，其中187 397例為漢族獻(xiàn)血者，并從中隨機(jī)抽取漢族RhD(+)獻(xiàn)血者355例進(jìn)行了Rh其他因子的分型檢測(cè)，同時(shí)對(duì)660例RhD(-)獻(xiàn)血者進(jìn)行了Rh其他因子的分型檢測(cè)。

1.2 試劑抗球蛋白試劑，IgM抗-D、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e和IgG抗-D(上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司)；凝聚胺試劑(安徽天一生物)；(IgM+IgG)混合抗-D(加拿大Dominion、德國Biotest、法國Diagast、美國Immucor和英國Millipore)；以上試劑為國家藥品生物檢定所批檢合格且均在有效期內(nèi)使用。

1.3 儀器GENESIS RSP150/8帝肯高智能加樣系統(tǒng)(TECAN)，AK03A型數(shù)字血型分析儀(深圳市愛康電子有限公司)，KA-2200型血清學(xué)離心機(jī)(日本久保田公司)，HH-W420三用恒溫水箱(江蘇省金壇市佳美儀器有限公司)。

1.4 方法Rh血型鑒定采用血型血清學(xué)方法。先由采血點(diǎn)采用紙板法進(jìn)行RhD初篩，再由檢驗(yàn)科采用微板法進(jìn)行RhD復(fù)檢，用帝肯高智能加樣系統(tǒng)處理血樣本及試劑到96孔U型微量反應(yīng)板上，由AK03A型數(shù)字血型分析儀判讀結(jié)果；對(duì)于RhD初篩復(fù)檢陰性的標(biāo)本，由本站輸血研究室采用不同廠家3批抗-D試劑抗球蛋白方法進(jìn)一步進(jìn)行Rh陰性確認(rèn)試驗(yàn)，以排除弱D或不完全D。采用試管法進(jìn)行Rh其他因子的測(cè)定。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS17.0軟件分析；基因頻率計(jì)算方法、期望值和Hardy-Weinberg吻合度檢驗(yàn)采用文獻(xiàn)[1，2]。依據(jù)(期望值-觀察值)2/期望值公式求χ2值，將每一種表型χ2值相加得χ2值的總和，自由度(df)=表型數(shù)-基因數(shù)=表型9種-基因單倍型4種=5，用自由度查表，根據(jù)總χ2值，判斷其吻合程度。P＞0.05為期望值與觀察值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Hardy-Weinberg吻合度良好。

2 結(jié)果

2.1 Rh陰性率及基因頻率南昌地區(qū)無償獻(xiàn)血者共計(jì)197 438例，確認(rèn)RhD(-)692例，占0.3505%；其中187 397例為漢族獻(xiàn)血者，確認(rèn)漢族RhD(-) 660例，占0.3522%；基因頻率：d為0.0593，D為0.9407。

2.2 Rh陽性和Rh陰性人群中單倍型基因頻率RhD(+)獻(xiàn)血人群中的單倍型基因頻率分別為cDe (0.0879)、CDe(0.6586)、cDE(0.2283)和CDE(0.0252)；RhD(-)獻(xiàn)血人群中的單倍型基因頻率分別為cde (0.7528)、Cde(0.2157)、cdE(0.0286)和CdE(0.0029)。見表1。

2.3 355例RhD(+)和660例RhD(-)獻(xiàn)血者中C、c、E和e抗原分布情況見表2。

2.4 弱D和不完全D檢出情況檢出弱D和不完全D共10例，其分型為Ccee(5例)＞ccEe(3例)＞CCee(1例)=ccee(1例)。

3 討論

Rh血型系統(tǒng)其抗原組合表型多種多樣，免疫性抗體常常引起溶血性輸血反應(yīng)、新生兒溶血病和自身免疫性溶血性貧血的發(fā)生。本調(diào)查南昌地區(qū)RhD(-)占0.3522%，與劉福昌等[3]2004年報(bào)道RhD(-)0.397%略有差異，但仍符合中國漢族人群Rh陰性為0.2%～0.5%的范圍；d基因頻率為0.0593，D基因頻率為0.9407，可推測(cè)本地區(qū)基因型DD占調(diào)查人數(shù)的88.49%，Dd占調(diào)查人數(shù)的11.16%。從表1可以得知，RhD(+)中表型頻率CCDee(43.38%)為最高，CcDEE和ccDee表型較少，未檢出CCDEE表型；單倍型頻率以CDe (0.6586)為最高，其他單倍型基因頻率分別為cDe (0.0879)、cDE(0.2283)和CDE(0.0252)；與張坤蓮等[4]報(bào)道沈陽地區(qū)獻(xiàn)血者Rh抗原表型分布結(jié)果相符，體現(xiàn)出本地區(qū)漢族人群Rh陽性血型的分布特點(diǎn)。RhD(-)中表型頻率ccdee(56.67%)為最高, ccdEE和CCdEe表型較少，未檢出CcdEE和CCdEE表型；單倍型頻率以cde(0.7528)為最高，其他單倍型基因頻率分別為Cde(0.2157)、cdE(0.0286)和CdE(0.0029)。研究表明本地區(qū)RhD(-)獻(xiàn)血人群中的單倍型基因頻率與陸瓊等[5]報(bào)道上海、山東地區(qū)Rh陰性獻(xiàn)血者單倍型基因頻率相比較無差異，體現(xiàn)出我國漢族人群Rh陰性血型分布特點(diǎn)，為進(jìn)一步探討Rh陰性血型在漢族人群遺傳學(xué)意義提供了一定的數(shù)據(jù)參考。表1中P＜0.05，顯示Rh陽性和Rh陰性無償獻(xiàn)血人群中期望值與觀察值差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Hardy-Weinberg吻合度不是十分好，分析其原因可能是由于外來務(wù)工人員、大學(xué)生等的流動(dòng)性加大流入本地區(qū)，遷移的結(jié)果使不同人群通婚使基因流動(dòng)，本地區(qū)摻入外來基因，導(dǎo)致原來群體的基因頻率有所改變[6]。

表1 355例Rh(+)和660例Rh(-)獻(xiàn)血者表型分布

表2 獻(xiàn)血者中C、c、E和e抗原分布

由表2可知，RhD(+)中C和e抗原頻率較高，分別為88.73%和91.27%，c和E抗原頻率分別為53.24%和41.97%；而RhD(-)中c和e抗原頻率較高，分為91.82%和99.70%，C和E抗原頻率分別為39.94%和6.21%；表明本地區(qū)中C、c、E和e抗原在RhD(+)和RhD(-)中的分布存在較大的差異。本調(diào)查顯示南昌地區(qū)RhD(+)獻(xiàn)血者中抗原頻率與宋寧等[7]報(bào)道四川地區(qū)漢族供血者相似，但與英國獻(xiàn)血者的抗原頻率C(68%)、c(81%)、E(29%)和e (98%)不同[8]，表明C、c、E和e抗原分布在不同民族中存在較大的差異。本地區(qū)中C、c、E和e抗原的陽性率均低于D抗原陽性率，產(chǎn)生抗體的幾率高于抗-D，因此，對(duì)于曾經(jīng)有多次輸血史和(或)妊娠史的患者輸血前檢查時(shí)要注意不規(guī)則抗體的篩查，對(duì)于需長期輸血的患者盡可能為患者提供Rh血型C、c、E和e抗原相合的血液，避免不良輸血反應(yīng)的發(fā)生。

本研究D陰性中雖排除了弱D和不完全D，但未進(jìn)行Del型的檢測(cè)，將在今后進(jìn)一步研究；另一方面Rh血型系統(tǒng)抗原的檢測(cè)方法采用的是血清學(xué)方法，該方法分型較為簡捷，但受抗血清來源等因素的限制，有可能存在定型誤判。近年來隨著分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)的不斷完善，若能進(jìn)一步采用基因分型予以確認(rèn)，使Rh血型檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠。

本地區(qū)以漢族人群為主，今后將加大樣本調(diào)查，進(jìn)一步加強(qiáng)Rh抗原表型分布及單倍型基因頻率的研究，為本地區(qū)科學(xué)地管理獻(xiàn)血者提供參考依據(jù)，尤其為建立Rh血型獻(xiàn)血者資料庫做好準(zhǔn)備，進(jìn)而為特殊輸血患者個(gè)性化輸血治療提供檢索依據(jù)，將更好地為臨床輸血、優(yōu)生學(xué)及本地區(qū)漢族人群Rh血型遺傳背景積累資料等研究服務(wù)。

[1]趙桐茂.人類血型遺傳學(xué)[M].北京:科學(xué)出版社,1987:231-234,351-357.

[2]王廣結(jié),王鋼,郝露萍,等.如何估計(jì)Rh血型期望值和Hardy-Weinberg吻合度[J].陜西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn),1994,9(3):147-148.

[3]劉福昌,張清平,潘繼紅,等.南昌地區(qū)人群ABO、Rh血型分布調(diào)查[J].江西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2004,44(3):88-89.

[4]張坤蓮,王慧,李劍平.沈陽地區(qū)獻(xiàn)血者Rh抗原表型分布調(diào)查[J].中國輸血雜志,2008,21(12):963-964.

[5]陸瓊,劉曦,王健蓮,等.血清學(xué)方法檢測(cè)上海地區(qū)Rh陰性獻(xiàn)血者Rh血型表現(xiàn)型分布[J].臨床輸血與檢驗(yàn),2008,10(1):73-74.

[6]劉福昌,鄒麗敏,姜珍一,等.南昌地區(qū)獻(xiàn)血者中ABO血型分布及與Rh血型相關(guān)性[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2014,32(2):212-213.

[7]宋寧,鄭世榮,姚志強(qiáng),等.四川地區(qū)無關(guān)供血者Rh血型系統(tǒng)基因分型及結(jié)果分析[J].中國輸血雜志,2009,22(3):211-213.

[8]李勇,馬學(xué)嚴(yán).實(shí)用血液免疫學(xué)血型理論和實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].科學(xué)出版社,2006:195-196.

R193.3，R457.1+1

A

1674-1129(2014)05-0630-04

10.3969/j.issn.1674-1129.2014.05.064

2014-03-24；

2014-05-25)