保健食品中鹽酸氨基葡萄糖的高效陰離子色譜測(cè)定方法分析

戰(zhàn)英 陳俊竹 趙一暉 張培軍

吉林省衛(wèi)生監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)中心，吉林 長(zhǎng)春 130062

保健食品中鹽酸氨基葡萄糖的高效陰離子色譜測(cè)定方法分析

戰(zhàn)英 陳俊竹 趙一暉 張培軍

吉林省衛(wèi)生監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)中心，吉林 長(zhǎng)春 130062

隨著時(shí)代的發(fā)展，如今開(kāi)始大量開(kāi)發(fā)應(yīng)用保健品，在保健品領(lǐng)域內(nèi)，廣泛重視鹽酸氨基葡萄糖；本文通過(guò)試驗(yàn)，分析了如何對(duì)保健食品中鹽酸氨基葡萄糖進(jìn)行測(cè)定。

保健食品；鹽酸氨基葡萄糖；高效陰離子色譜

糖蛋白廣泛存在于人體和動(dòng)物體內(nèi)的關(guān)節(jié)組織中，而鹽酸氨基葡萄糖是糖蛋白的一種天然成分，具有一系列的作用，可以對(duì)軟骨及關(guān)節(jié)功能進(jìn)行修復(fù)和維持，并且也可以有效地推遲骨性關(guān)節(jié)炎的發(fā)展。另外，在肝腎解毒方面，它可以提升嬰兒腸道中雙歧桿菌的增長(zhǎng)速度，還有報(bào)道稱(chēng)，鹽酸氨基葡萄糖可以對(duì)癌細(xì)胞的生長(zhǎng)起到有效的抑制作用[1]。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

采用了美國(guó)生產(chǎn)的ICS2000離子色譜儀，將在線脫氣裝置的四元梯度泵、柱溫箱、脈沖安培檢測(cè)器以及淋洗液自動(dòng)發(fā)生器、氨基酸分離柱等。采用了250 mmol/L NaOH；MiliQ超純水，鹽酸氨基葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品。在配合鹽酸氨基葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液時(shí)，嚴(yán)格依據(jù)這樣的程序來(lái)進(jìn)行，對(duì)100 mg鹽酸氨基葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行準(zhǔn)確稱(chēng)取，然后用水稀釋?zhuān)蛊溥_(dá)到100 ml，配成1 g/L的標(biāo)準(zhǔn)貯備液。

1.2 實(shí)驗(yàn)

色譜條件中采用積分脈沖安培檢測(cè)器，Au工作電極和PH參比電極。流動(dòng)相為250 mmol/ L NaOH，流速為每分鐘0.25 ml，柱溫為30℃。用水對(duì)鹽酸氨基葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行稀釋?zhuān)偈蛊錆舛冗_(dá)到0.1 g/L、0.2 mg/L、0.5 mg/L、5 mg/L，直接進(jìn)樣測(cè)定，橫縱坐標(biāo)分別為鹽酸氨基葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量濃度和峰面積，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行繪制。對(duì)樣品進(jìn)行適量稱(chēng)取，將60 ml水加入進(jìn)來(lái)，進(jìn)行15分鐘的超聲波提取。用水稀釋?zhuān)蛊溥_(dá)到100 ml，利用濾膜進(jìn)行過(guò)濾，取上清液，測(cè)定之前，需要用水進(jìn)行稀釋。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件的選擇

在10～250 mmol/L濃度范圍內(nèi)，采取一系列方法改變氫氧化鈉的濃度，并且分析樣品測(cè)定結(jié)果受到本改變的影響程度，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在流動(dòng)相方面，選取了250 mmol/L NaOH，可以有效分離鹽酸氨基葡萄糖和樣品中的雜峰，并且不需要再生和活化色譜柱，這樣分析時(shí)間就得到了較大程度的縮短。另外，通過(guò)調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)，保健食品中的鹽酸氨基葡萄糖，有著較高的濃度，安培檢測(cè)器測(cè)定的靈敏程度較高，需要高倍稀釋過(guò)樣品之后，方可以進(jìn)行測(cè)定，可以將干擾因素給有效的消除掉。在20℃～40℃的范圍內(nèi)，分析了柱溫對(duì)分離的影響情況，結(jié)果顯示，鹽酸氨基葡萄糖的測(cè)定，不會(huì)在較大程度上受到柱溫的影響。

2.2 干擾實(shí)驗(yàn)

在干擾實(shí)驗(yàn)中選取了常見(jiàn)糖類(lèi)和常見(jiàn)氨基酸，糖類(lèi)包括黑糖、木糖、阿拉伯糖和乳糖等。在上文所述的色譜條件下，將一定量的干擾物質(zhì)加入到2.0 mg/L鹽酸氨基葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液中，不干擾測(cè)定定義為加干擾物的標(biāo)準(zhǔn)溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液兩者的峰面積相對(duì)誤差，在10%以?xún)?nèi)。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)分析，在此波形下，氨基酸沒(méi)有響應(yīng)?？梢杂行Х蛛x掉鹽酸氨基葡萄糖和實(shí)驗(yàn)用到的部分糖類(lèi)[2]。上文已經(jīng)提到，保健食品中含有較高含量的鹽酸氨基葡萄糖，在30%左右，經(jīng)過(guò)樣品高倍稀釋過(guò)阿拉伯糖和鼠李糖之后，就不需要考慮它的干擾。

2.3 檢出限、線性范圍及精密度

對(duì)質(zhì)量濃度分別為0.05 g/L、1.00 mg/L、2.00 mg/L、3.00 mg/L的鹽酸氨基葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行配置，在測(cè)定的時(shí)候，嚴(yán)格依據(jù)相關(guān)條件來(lái)進(jìn)行，發(fā)現(xiàn)有較好的線性關(guān)系存在于這些濃度范圍內(nèi)的氨基葡萄糖中，那么就可以將它的線性回歸方程給得出來(lái)：Y＝6.82X＋0.82（r＝0.999），其中峰面積和質(zhì)量濃度分別用Y和X來(lái)表示，質(zhì)量濃度的單位為mg/L；以三倍基線噪聲對(duì)應(yīng)的質(zhì)量濃度計(jì)算方法的檢出限為0.012 mg/L。在相應(yīng)條件下，對(duì)同一標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行了連續(xù)測(cè)定，控制測(cè)定次數(shù)為八次，其中，0.69%、0.68%分別為峰面積和保留時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，測(cè)定了八份同一保健食品樣品，測(cè)定結(jié)果只有較小的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。

2.4 加標(biāo)回收率

在測(cè)定本底值方面，首先取12份平行樣品，之后從中選出三份，然后將剩余九份加入到鹽酸氨基葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液中，依據(jù)上文所述的方法，對(duì)鹽酸氨基葡萄糖含量進(jìn)行測(cè)定，平均加標(biāo)回收率在96.5%～105.5%之間。

2.5 方法的對(duì)照試驗(yàn)

在同一保健食品中的鹽酸氨基葡萄糖測(cè)定過(guò)程中，分別采用了本種方法和國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法，結(jié)果顯示相對(duì)偏差在10%以?xún)?nèi)。

3 結(jié)論

本文依據(jù)相關(guān)理論，對(duì)保健食品中鹽酸氨基葡萄糖的高校陰離子色譜測(cè)定方法進(jìn)行了構(gòu)建，利用本方法來(lái)對(duì)保健食品中鹽酸氨基葡萄糖進(jìn)行測(cè)定，效果較好，加標(biāo)回收率較高，可達(dá)到96.5%～105.5%，相較于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法的測(cè)定結(jié)果，相對(duì)偏差較小[3]，說(shuō)明本方法在靈敏度和精密度方面較高，符合相關(guān)要求，可以有效分析保健食品中的總鹽酸氨基葡萄糖。

[1]沈國(guó)，徐建忠，唐旭. 高效離子色譜法測(cè)定氨基葡萄糖類(lèi)化合物[J]. 中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2010，2（3）：123-125.

[2]吳燕，米亞嫻. 離子色譜法及其在藥物分析中的應(yīng)用[J]. 天津藥學(xué)，2011，2（4）：132-135.

[3]吳學(xué)軍，金鵬飛，胡欣. 鹽酸氨基葡萄糖片高效液相色譜測(cè)定方法的改進(jìn)[J].中國(guó)藥業(yè)，2012，2（1）：144-146.

TS207.3

B

1674-9308（2014）05-0093-02

10.3969/J.ISSN.1674-9308.2014.05.059