腦出血患者外周血IL-17，IL-23的表達及意義

畢 勝 范 佳 陳 光 楊利敏 李秀玲 陳曉偉 王復(fù)新 劉 群

(吉林大學(xué)白求恩第一醫(yī)院，吉林 長春 130021)

目前腦出血治療缺乏特異、有效手段，其原因主要是腦出血后血腫周圍組織損傷機制尚未完全闡明。大量研究證實炎癥反應(yīng)參與腦出血后的病理過程。本研究擬探討腦出血患者外周血白介素(IL)-17、IL-23的表達及意義。

1 材料與方法

1.1主要試劑 人IL-17 ELISA 檢測試劑盒、IL-23 ELISA 檢測試劑盒，美國R & D公司。

1.2實驗分組 實驗組:腦出血患者48例，來自吉林大學(xué)白求恩第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，男30例，女18例，年齡33～76歲，平均(49±16)歲。根據(jù)多田公式(體積=π/6×長×寬×層面)粗略計算腦出血量，對于破入腦室的出血量不迭加。出血量約11.6～45.2 ml。所有病例均符合1995年全國第 4 次腦血管疾病學(xué)術(shù)會議修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)〔1〕，不包括心源性、動脈炎、外傷和血液病等引起的腦出血。對照組:健康人24例，來自吉林大學(xué)白求恩第一醫(yī)院體檢中心，男12例，女12例，年齡26～58歲，平均(43±14)歲。兩組均排除腦血管疾病家族史，無肝腎疾病、血液系統(tǒng)疾病、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病、自身免疫病、感染性疾病。

1.3取材 分別于腦出血發(fā)病后≤6 h、6～24 h、24～72 h、>72 h抽取肘靜脈血2 ml，均于清晨采取，置于抗凝管中，以2 000 r/min離心15 min 分離血清;-80℃凍存。對照組體檢時取血，取材方法同前。

1.4實驗方法 ELISA法檢測IL-17、IL-23的水平。嚴(yán)格按試劑盒說明書操作。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清IL-17 水平比較 ≤6 h組實驗組血清IL-17 水平與對照組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，6～24 h組、24～72 h組和>72 h組均顯著增加(P<0.05)，24～72 h組血清IL-17 水平顯著高于≤6 h組、6～24 h組和>72 h組(P<0.05)。

2.2兩組血清IL-23 水平比較 ≤6 h組，6～24 h組、24～72 h組和>72 h組血清IL-23水平與對照組相比均顯著增加(P<0.05)。6～24 h組血清IL-23水平顯著高于≤6 h組、24～72 h組和>72 h組(P<0.05)。

3 討 論

腦出血后組織損傷是一個相當(dāng)復(fù)雜的病理過程，炎癥反應(yīng)在腦出血中發(fā)揮非常重要的作用。炎癥是具有血管系統(tǒng)的活體組織對損傷發(fā)生的反應(yīng)，包括炎癥介質(zhì)釋放、體液外滲、炎癥細胞遷移、組織損傷和修復(fù)等一系列復(fù)雜過程。血液中的各種細胞可分泌各種炎性介質(zhì)進入腦組織并引起炎癥反應(yīng)。

IL-17是主要由Th17細胞產(chǎn)生的致炎性細胞因子〔2〕，參與腦組織的缺血再灌注損傷〔3〕。缺血缺氧是腦出血及腦缺血再灌注損傷共同的始動因素，Th17細胞是否參與腦出血的病理過程，目前國內(nèi)外尚無報道。

腦組織缺血后，病灶區(qū)內(nèi)腦微循環(huán)被破壞，白細胞聚集并滲透至缺血部位，出現(xiàn)腦水腫、血腦屏障功能受損，繼發(fā)中性粒細胞、單核巨噬細胞、小膠質(zhì)細胞的聚集和釋放細胞因子，繼發(fā)神經(jīng)元壞死。在PMCAO模型中，發(fā)病1 h后，PBMC中IL-17 mRNA的表達開始增加，發(fā)病第6天，IL-17 mRNA的表達達到高峰，隨后下降。據(jù)此推測IL-17 mRNA的表達與腦組織缺血缺氧后白細胞活化遷移、炎癥反應(yīng)發(fā)生有關(guān)〔4〕。Wang等〔5〕研究發(fā)現(xiàn)PMCAO模型中IL-17及其受體IL-17R表達增加，提示通過阻斷IL-17/IL-17R通路可能在一定程度上控制腦缺血缺氧后的損傷。

本實驗結(jié)果提示IL-17、IL-23參與人腦出血后的病理過程。腦出血后早期Th17細胞開始活化，IL-17除直接參與腦出血后炎癥反應(yīng)，還可能通過刺激多種細胞產(chǎn)生細胞因子、黏附分子，促進炎癥反應(yīng)的發(fā)生〔6〕。腦出血后血腫周圍組織在發(fā)病24～72 h炎癥反應(yīng)及組織損傷最嚴(yán)重。IL-17的表達與腦組織炎癥反應(yīng)及損傷時間一致，進一步證實IL-17在促進腦出血后炎癥反應(yīng)中的作用。大量研究證實，腦出血72 h后，血腫周圍組織白細胞數(shù)目減少，膠質(zhì)細胞數(shù)目逐漸增加，體外實驗研究證實，通過激活小膠質(zhì)細胞Toll樣受體，可促進IL-17，IL-23的產(chǎn)生，加劇神經(jīng)損傷及神經(jīng)細胞凋亡〔7〕。本研究提示IL-17的持續(xù)存在可能與腦出血后膠質(zhì)細胞的活化、參與組織修復(fù)及細胞凋亡有關(guān)。

記憶性細胞被IL-23激活后分泌大量前炎癥介質(zhì)IL-17、IL-6、干擾素(IFN)-γ〔8〕。IL-23可趨化炎癥細胞聚集與遷移，在多種炎癥病灶中都有高表達〔9〕。IL-23與缺血再灌注損傷早期病變有關(guān)，IL-17與缺血再灌注延遲相時缺血半暗帶神經(jīng)細胞凋亡有關(guān)〔10〕。本研究提示IL-23參與腦出血后的炎癥反應(yīng)，并且腦出血早期IL-23即發(fā)揮重要作用。IL-23的存在及表達的增加，促進了IL-17的表達。IL-23通過刺激IL-17及其他相關(guān)細胞因子的產(chǎn)生，促進炎癥反應(yīng)的發(fā)生，加劇腦出血后的炎癥反應(yīng)。IL-23在腦出血后的炎癥反應(yīng)中持續(xù)發(fā)揮重要作用，提示可以通過調(diào)節(jié)IL-23調(diào)控IL-17的表達，達到減輕炎癥反應(yīng)的作用。

本研究說明，IL-17、IL-23參與腦出血后病理過程。早期適時監(jiān)測致炎性細胞因子的釋放，可為早期治療提供理論依據(jù)。

4 參考文獻

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