肌炎抗體在多發(fā)性肌炎/皮肌炎的表達研究

細胞免疫和體液免疫在多發(fā)性肌炎(polymyositis, PM)和皮肌炎(dermatomyositis, DM)的發(fā)病機制中具有重要作用。大部分PM/DM患者體內(nèi)存在自身抗體，主要分為肌炎特異性抗體(myositis specific autoantibodies，MSAs)和肌炎相關性抗體(myositis associated autoanti-bodies, MAAs)[1]。本文對36例PM/DM患者自身抗體分布特點進行分析。

1對象和方法

1.1觀察對象收集于2009-10-2012-12在作者醫(yī)院住院確診的PM及DM患者36例，DM 20例,其中男5例、女15例，PM 16例，其中男6例、女10例，年齡21～63歲，平均年齡(42.56±11.27)歲?；颊呔?004年歐洲神經(jīng)肌肉疾病中心和美國肌肉研究協(xié)作組特發(fā)性炎性肌病分類診斷標準[2]中PM及DM診斷標準，并排除：(1)非對稱性肌無力，遠端肌無力重于近端??；(2)眼肌無力，孤立性構(gòu)音障礙，頸伸肌無力重于頸屈?。?3)中毒性肌病、活動性內(nèi)分泌疾病(甲狀腺功能亢進、甲狀腺功能減退，甲狀旁腺功能亢進)及淀粉樣變性；(4)神經(jīng)肌肉疾病家族史。 健康對照25名，來自作者醫(yī)院門診的健康體檢者，既往均無內(nèi)分泌代謝性疾病、肌肉無力、皮疹及風濕免疫性疾病病史。

1.2方法所有患者均測定血清MSAs(包括抗Jo-1抗體、抗Mi-2抗體)、MAAs(包括抗Ku-86抗體、抗PM-Scl抗體)，ENA抗體譜，肌酶，紅細胞沉降率(ESR)，C反應蛋白(CRP)，甲狀腺功能及腫瘤標記物(包括AFP、CEA、CA125、CA199及fPSA)，行肌電圖及神經(jīng)電圖檢查及肱二頭肌活檢。肱二頭肌活檢采用開放式骨骼肌活檢，液氮/異戊烷冷凍，5 μm厚冰凍連續(xù)切片，行蘇木精-伊紅(HE)、改良Gomori三原色(MGT)、還原型輔酶Ⅰ四唑氮還原酶(NADH-TR)、酸性磷酸酶、三磷酸腺苷酶(ATPase，pH 4.3，4.6，9.9)、過碘酸雪夫(PAS)、油紅O染色等免疫組化染色。

2結(jié)果

2.1自身抗體檢測(1)PM患者：抗Jo-1抗體、抗Mi-2抗體、抗Ku-86抗體及抗PM-Scl抗體陽性患者分別6例(37.5%)、0例、1例(6.25%)、1例(6.25%)。在6例抗Jo-1 抗體陽性患者中，臨床表現(xiàn)為肌炎6例、間質(zhì)性肺病5例、關節(jié)炎3例、吞咽困難3例、雷諾現(xiàn)象2例，發(fā)熱2例；1例抗PM-Scl抗體陽性患者肌肉損害嚴重，血清CK水平高達11 245 U/L，腎功能損害，臨床癥狀嚴重，治療效果差。(2)DM 患者：抗Jo-1抗體、抗Mi-2抗體、抗Ku-86抗體及抗PM-Scl抗體陽性患者分別4例(20%)、7例(35%)、4例(20%)、0例。在4例抗Jo-1 抗體陽性患者中，臨床表現(xiàn)為肌炎4例、間質(zhì)性肺病3例、關節(jié)炎2例、吞咽困難1例、雷諾現(xiàn)象2例、發(fā)熱1例；7例抗 Mi-2 抗體陽性患者中，臨床表現(xiàn)為肌炎7例、Gotron 征5例、間質(zhì)性肺病4例、發(fā)熱3例、關節(jié)炎4例、吞咽困難2例。

2.2其他實驗室檢查結(jié)果所有患者血清CK水平不同程度升高，范圍256～11 245 U/L。所有患者甲狀腺功能及腫瘤標記物均正常。肌電圖均呈肌源性損害，少數(shù)患者同時并存輕度神經(jīng)源性損害。

2.3肱二頭肌活檢(1)PM患者：HE染色示肌纖維不同程度變性、壞死及再生，肌內(nèi)膜、肌束膜不同程度炎性細胞浸潤；部分肌纖維內(nèi)可見邊緣空泡，結(jié)締組織正?；蜉p至中度增生。PAS染色：肌纖維糖原成分正常。油紅O染色顯示肌纖維脂肪成分正常。酸性磷酸酶染色顯示變性、壞死肌纖維及炎性細胞的酸性磷酸酶活性升高。(2)DM患者：HE染色可見散在變性、壞死及再生肌纖維，不同程度炎性細胞浸潤，主要分布在小血管周圍，均可見肌纖維束周萎縮；結(jié)締組織輕至中度增生。PAS染色：肌纖維糖原成分正常。油紅O染色：肌纖維脂肪成分正常。酸性磷酸酶染色：變性、壞死肌纖維及炎性細胞的酸性磷酸酶活性升高。

3討論PM及DM是特發(fā)性炎性肌病的兩種類型，均呈亞急性或隱襲性起病，對稱性四肢近端肌無力、肌痛、血清CK升高，肌電圖呈肌源性損害，DM患者常有典型皮疹。PM肌肉病理特征為肌內(nèi)膜炎性細胞浸潤(T細胞)，炎性細胞侵入非壞死肌細胞，DM肌肉病理特征為束周肌纖維萎縮。DM是補體介導的微血管病， PM則是CD8+T細胞與主要組織相容性復合體-Ⅰ分子陽性肌纖維形成免疫突觸造成肌纖維破壞。

MSAs包括三大類：抗氨基酰tRNA合成酶抗體、抗信號識別顆?？贵w和抗Mi-2抗體。抗Jo-1抗體占抗氨基酰tRNA合成酶抗體的80%，文獻報道抗Jo-1抗體在PM/DM中陽性率為20%～30%，PM伴有間質(zhì)性肺病的患者中陽性率高達50%～75%[1，3]。這是因為健康人肺組織上抗氨基酰-tRNA合成酶含量遠遠高于其他器官，使抗 Jo-1 抗體陽性患者肺組織成為免疫細胞攻擊的靶器官[4]。本研究顯示PM、DM 患者抗 Jo-1 抗體陽性率分別為37.5%及20%， 抗 Jo-1抗體陽性的PM、DM患者合并間質(zhì)性肺病發(fā)生率分別為 83.3%及75%?？筂i-2抗體的靶抗原參與調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄，是DM的特異性抗體，與DM患者的皮疹相關。據(jù)文獻報道[5]，DM患者該抗體陽性率明顯高于PM，約為21%。本組病例中，有7例DM患者抗Mi-2抗體陽性，陽性率為35%，PM患者未檢測到該抗體。Targoff等[6]發(fā)現(xiàn)抗氨基酰tRNA合成酶抗體陽性的DM/PM患者在臨床上構(gòu)成一種特征性癥候群——“抗合成酶綜合征”，包括肌炎、ILD、關節(jié)炎、雷諾現(xiàn)象、發(fā)熱等臨床癥狀。本組病例中抗Jo-1抗體陽性的患者均表現(xiàn)為抗合成酶綜合征。

MAAs包括抗Ku抗體、抗PM-Scl 抗體、抗U1RNP 抗體、抗-Ro52抗體及抗-Ro60抗體等[1]。這些自身抗體與肌炎相關，但也常見于其他不合并肌炎的風濕性疾病?？筀u抗體在DM、系統(tǒng)性硬化(systemic sclerosis, SSc)和PM/SSc重疊綜合征的陽性率分別為2.2%、3.4%和60%[7]，對PM/SSc重疊綜合征具有特異性。本組患者中，1例PM及4例DM患者檢測到抗Ku-86抗體，陽性率分別為6.25%及20%。 抗PM-Scl抗體常見于PM/硬皮病重疊綜合征患者中，陽性率為87%，對該綜合征診斷敏感性較高，單純PM陽性率僅為8%，抗PM-Scl抗體陽性患者易發(fā)生嚴重肌肉、肌腱及腎損害，本組僅1例PM患者陽性，該患者肌肉損害嚴重，血清CK水平高達11 245 U/L，合并腎功能損害，臨床癥狀重。

綜上所述，作為一種無創(chuàng)傷性檢查，MSAs及MAAs測定對PM/DM的診斷及臨床預后判斷具有一定輔助價值。

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