板黨多糖對小鼠實驗性糖尿病的改善作用*

鐘 靈，王振富，李玉山

（1.湖北民族學院附屬民大醫(yī)院，2.湖北民族學院醫(yī)學院，恩施445000）

板橋黨參系桔梗科植物川黨參（codonopsis tangshen oliv）的干燥根莖，因產于湖北恩施板橋鎮(zhèn)境內而得名，簡稱“板黨”。已知它富含黨參多糖、黨參皂甙、甾醇類、三萜類成分及多種微量元素（如Fe、Mn、Zn、Se等）及人體不可缺少的氨基酸。板黨為常用中藥，味甘、平，歸脾、肺經，具補中益氣、健脾益肺的功效。用于脾肺虛弱、氣短心悸、食少便溏、虛喘咳嗽、內熱消渴［1］。目前，中藥多糖降血糖及改善胰島素抵抗的作用逐漸受臨床重視，如香菇多糖、人參多糖和紅芪多糖等。研究表明板黨對力竭運動大鼠心肌線粒體損傷和低氧／復氧脂質過氧化損傷有保護作用［2，3］，黨參多糖是黨參的主要活性成分之一。為探討板黨在預防及輔助治療糖尿病方面的作用，我們從板黨中提取了板黨多糖粗品，進行了一系列的實驗研究。

1 材料與方法

1.1 主要試劑和儀器

快速檢測血糖（fasting blood glucose，F(xiàn)BG）試劑盒（美國博晟公司），胰島素（insulin，INS）試劑盒（天津九鼎醫(yī)學生物工程有限公司），丙二醛（malondialdehyde，MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）及谷脫甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）試劑盒均（南京建成生物工程研究所），二甲雙胍（北京京豐制藥有限公司），四氧嘧啶（Sigma公司），TGL-16G-A離心機（上海安亭科學儀器廠），756型紫外分光光度計（上海分析儀器總廠），DL-50型超級恒溫器，F(xiàn)-160型藥物粉碎機（北京市永光明醫(yī)療儀器廠），BS-124S電子天平（德國塞多利斯股份公司），GC-1200r放射免疫計數(shù)器（中國安徽科大創(chuàng)新股份有限公司）。

1.2 實驗動物與分組

昆明小鼠60只，雌雄各半，體重25～30 g（由湖北省實驗

△【通訊作者】Tel：13257268806；E-mail：wang-zhong-jie＠163.com動物中心提供），將小鼠分為6組（n＝10），即：正常對照組、糖尿病模型組、板黨多糖低、中、高濃度劑量組和陽性藥對照組（二甲雙胍）。

1.3 板黨多糖提取

板黨由恩施峰嵐板橋黨參有限責任公司提供，板黨→取樣→烘干粉碎過篩（40-50目）→石油醚脫脂→乙醇脫色和除小分子糖→離心→醇析過夜→Seveage除蛋白→醇析過夜→離心→測多糖含量。

1.4 糖尿病模型的建立

取健康昆明小鼠，適應性喂養(yǎng)1周，禁食12 h后，經腹腔一次性注射四氧嘧啶（200 mg／kg），3 d后在禁食條件下尾靜脈取血測血糖值、用糖尿試紙檢測鼠尿，選擇空腹血糖在11.1 mmol／L以上、尿糖呈強陽性（＋＋＋）的小鼠為糖尿病模型。板黨多糖低、中、高濃度劑量組灌胃板黨多糖（100、200、300 mg／kg），陽性藥對照組灌胃二甲雙胍（180 mg／kg）；正常對照組和糖尿病模型組同時灌胃等容量蒸餾水。各組每天給藥一次，連續(xù)21 d，末次給藥前，禁食12 h。斷頭采血檢測各項指標變化，并取其器官測定器官系數(shù)。

1.5 測定指標和方法

FBG：采用葡萄糖氧化酶-過氧化酶法；INS：采用放免法按說明書操作；血清中MDA、SOD和GSH-Px：采用硫代巴比妥酸顯色法檢測MDA含量，黃嘌呤氧化酶法測定SOD，二硫代二硝基苯甲酸法測定GSH-Px，嚴格按照試劑盒說明書操作比色測定；器官系數(shù)計算方法：器官系數(shù)＝100ⅹ臟器濕重／動物體重。

1.6 數(shù)據(jù)分析

2 結果

2.1 板黨多糖對糖尿病小鼠血糖和胰島素水平的影響

糖尿病模型組與對照組比較，F(xiàn)BG和INS顯著升高（P＜0.01）；與糖尿病模型組比較，板黨多糖各劑量組及二甲雙胍組 FBG和 INS明顯降低（P＜0.05，P＜0.01，表1）

Tab.1 Effect of BRCPon FBGand blood INSof diabetic mice（ˉx±s，n＝10）

2.2 板黨多糖對糖尿病小鼠脾臟胸腺系數(shù)的影響

與對照組比較，糖尿病模型組脾臟胸腺系數(shù)明顯降低（P＜0.01）；與糖尿病模型組比較，板黨多糖各劑量組及二甲雙胍組脾臟胸腺系數(shù)明顯上升（P＜0.05，表2）。

Tab.2 Effect of BRCP on spleen and thymus index of diabetic mice（ˉx±s，n＝10）

2.3 板黨多糖對糖尿病小鼠機體抗氧化功能的影響

與對照組比較，糖尿病模型組血清中MDA含量顯著增加、SOD及 GSH-Px活性明顯降低（P＜0.01）；與糖尿病模型組比較，板黨多糖各劑量組及二甲雙胍組均能不同程度的提高SOD及GSH-Px的活性，減少MDA的含量（P＜0.01，表3）。

Tab.3 Effect of BRCPon MDA content and SOD，GSH-Px activity of diabetic mice（ˉx±s，n＝10）

3 討論

糖尿病是一種以高血糖癥為主要特征、發(fā)病率高、嚴重危害人類健康的疾病。胰島素抵抗和胰島β細胞分泌功能下降是糖尿病的病理基礎，其引發(fā)糖、蛋白質、脂肪、水和電解質等一系列代謝紊亂綜合征。長期高血糖和代謝紊亂可導致全身組織器官，特別是眼、腎、心血管及神經系統(tǒng)的損害及其功能障礙。研究表明，中藥在糖尿病及其并發(fā)癥的治療方面取得了重大進展。其中，中藥多糖為降血糖的主要成分。人參多糖、紅芪多糖和薏苡仁多糖等治療胰島素抵抗的作用得到廣泛研究［4］。

四氧嘧啶是一種自由基激活劑，進入人體后可迅速被胰島β細胞攝取。產生超氧陰離子等自由基，能直接破壞β細胞膜結構，產生大量MDA，損傷細胞DNA，導致胰島素合成障礙，引起糖尿病。長期糖代謝紊亂可導致小鼠機體氧化應激和抗氧化防御體系失衡。小鼠體內抗氧化防御體系的失衡與糖尿病及其并發(fā)癥的產生密切相關［5］。

本實驗結果顯示，板黨多糖具有降低糖尿病小鼠FBG和INS水平，增強SOD及GSH-Px的活性，減少MDA的含量，升高脾臟和胸腺系數(shù)的作用。提示板黨多糖能抑制四氧嘧啶引起的小鼠高血糖，其可能機制為：板黨多糖通過提高機體的抗氧化能力，抑制氧自由基對胰島β細胞的破壞，增強機體免疫力，提高小鼠胰島素對糖代謝的能力，從而改善糖尿病，但其確切機制還需進一步研究。

［1］ 國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典2005版一部［M］.北京：化學工業(yè)出版社，2005：199.

［2］ 王振富，鐘 靈，肖本見.富硒板黨對力竭運動大鼠心肌線粒體抗氧化作用的影響［J］.中國應用生理學雜志，2013，29（2）：177-178.

［3］ 肖本見，陳國棟，譚志鑫，等.富硒板黨對低氧耐受小鼠興奮性氨基酸的影響［J］.中國應用生理學雜志，2006，22（2）：151-152，205.

［4］ 傅盼盼，洪 鐵，楊 振.黨參多糖對糖尿病小鼠胰島素抵抗的改善作用［J］.時珍國醫(yī)國藥，2008，19（10）：2414-2416.

［5］ Ishikawa K，Kimura S，Kobayashi A，et al.Increased re active oxygen species and ant-oxidative response in mitochondrial cardiomyopathy［J］.Circ J，2005，5（69）：617-620.