大腸癌組織Galectin-3、TIMP-2的表達(dá)和臨床意義

李英健，趙恩宏，蘇 銳，侯 雷，劉志滿，申興斌

(承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，河北承德 067000)

大腸癌在西方國家的發(fā)病率已居第二位，在我國的發(fā)病率也在逐年上升[1]。惡性腫瘤難以治愈的原因是腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移。組織基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-2(TIMP-2)可抑制基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)的降解，因此，其表達(dá)失控可導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移[2]。由此推測(cè)，作為MMP-2的底物，也是β-半乳糖苷結(jié)合蛋白(Galectins)重要成員之一的Galectin-3與腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移也密切相關(guān)。本研究旨在探討大腸癌組織Galectin-3和TIMP-2的表達(dá)情況及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院胃腸外科2011年12月-2012年12月手術(shù)切除的大腸癌標(biāo)本52例，同時(shí)選取距癌組織邊緣＞5cm的正常黏膜20例、大腸腺瘤標(biāo)本20例作為對(duì)照。排除標(biāo)準(zhǔn):術(shù)前行放化療者;其它部位惡性腫瘤者;免疫性疾病者。52例大腸癌患者中，男29例、女23例，年齡32-75歲，平均年齡54.23±11.06歲。

1.2 方法

1.2.1 免疫組化染色:兔抗人Galectin-3多克隆抗體購自北京中杉金橋公司，兔抗人TIMP-2多克隆抗體購自武漢博士德公司，免疫組化MaxVision試劑盒(羊抗鼠/兔)購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。所取組織標(biāo)本固定后常規(guī)石蠟包埋，厚3 μ m切片，采用SP免疫組化法染色，DAB顯色。

1.2.2 結(jié)果判定:Galectin-3、TIMP-2免疫陽性產(chǎn)物主要定位于細(xì)胞質(zhì)，呈棕黃色或棕褐色顆粒狀。在400倍視野下，每張切片隨機(jī)觀察4個(gè)視野，分別根據(jù)陽性細(xì)胞比例和染色強(qiáng)度計(jì)分:①陽性細(xì)胞比例:無陽性細(xì)胞0分，陽性細(xì)胞＜25%計(jì)1分，25%-75%計(jì)2分，＞75%計(jì)3分;②染色強(qiáng)度:染色強(qiáng)度以多數(shù)細(xì)胞為準(zhǔn)，無著色計(jì)0分、淡黃色計(jì)1分、黃或深黃色計(jì)2分、褐或棕褐色計(jì)3分。以①+②判定最終結(jié)果:0分為-、1-2分為+、3-4分為++、5-6分為+++，其中+為弱陽性、++為中等陽性、+++為強(qiáng)陽性。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析 應(yīng)用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，等級(jí)資料采用秩和檢驗(yàn)，相關(guān)分析采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同大腸組織Galectin-3和TIMP-2的表達(dá)情況 大腸癌組織Galectin-3的陽性表達(dá)率最高、TIMP-2的陽性表達(dá)率最低，與正常大腸黏膜和大腸腺瘤比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。見表1:

表1 不同大腸組織Galectin-3和TIMP-2的表達(dá)情況

2.2 Galectin-3、TIMP-2表達(dá)與大腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 大腸癌組織Galectin-3、TIMP-2的表達(dá)與年齡、性別、腫瘤位置無關(guān)(P＞0.05);與浸潤深度、分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P＜0.01，P＜0.05)。見表2:

表2 Galectin-3、TIMP-2表達(dá)與大腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

2.3 大腸癌Galectin-3和TIMP-2表達(dá)的相關(guān)性 大腸癌中，Galectin-3與TIMP-2的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(P＜0.01)。見表3:

表3 大腸癌Galectin-3和TIMP-2表達(dá)的相關(guān)性

3 討論

大腸癌致死的主要原因是腫瘤細(xì)胞的浸潤和轉(zhuǎn)移，基底膜完整性的破壞被認(rèn)為是惡性腫瘤侵襲的開始。近年來的研究發(fā)現(xiàn)[3]，MMP-2可以降解細(xì)胞外基質(zhì)、促進(jìn)腫瘤血管形成，在腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移中具有重要作用;但細(xì)胞產(chǎn)生的TIMP-2能夠抑制MMP-2的活性，從而保持細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜的穩(wěn)定。因此，MMP-2與TIMP-2表達(dá)的失衡可導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜的降解，從而引發(fā)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移[4]。

本研究發(fā)現(xiàn)，大腸癌組織TIMP-2的表達(dá)水平明顯低于正常大腸黏膜和大腸腺瘤，并且，大腸癌TIMP-2的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤深度和分化程度有關(guān)。上述結(jié)果提示，大腸癌組織TIMP-2的表達(dá)降低，不能抑制MMP-2的活性，打破了MMP-2/TIMP-2的平衡，從而促進(jìn)腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移，這與Moran等[5]的研究結(jié)果一致。

Galectin-3作為MMP-2的底物，可能在腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移中起到一定作用，而且Galectin-3具有糖親和性、能夠阻止細(xì)胞凋亡及參與炎癥細(xì)胞的游走，因此，Galectin-3的表達(dá)增高可通過提高內(nèi)皮細(xì)胞的親和性和增加細(xì)胞聚集促進(jìn)腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移[6-9]。本研究發(fā)現(xiàn)，大腸癌組織Galectin-3的表達(dá)水平明顯高于正常大腸黏膜和大腸腺瘤，并且，大腸癌Galectin-3的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤深度和分化程度有關(guān)。Shankar等[10]采用免疫組化法研究發(fā)現(xiàn)，甲狀腺癌腫組織Galectin-3的表達(dá)明顯高于良性甲狀腺病變，與本研究結(jié)果相似。

本研究還發(fā)現(xiàn)，大腸癌Galectin-3和TIMP-2的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，進(jìn)一步說明二者參與了大腸癌的發(fā)生發(fā)展過程，也提示臨床，是否能通過改變TIMP-2和Galectin-3的表達(dá)情況，抑制腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移，從而改善大腸癌患者的預(yù)后。因此，本研究為基因治療大腸癌提供了參考依據(jù)。

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