高效液相色譜法分析測定復(fù)硝酚鈉中三種組分

趙颯(西北化工研究院 陜西西安 7 10 0 6 1)

高效液相色譜法分析測定復(fù)硝酚鈉中三種組分

趙颯(西北化工研究院 陜西西安 7 10 0 6 1)

目的本文介紹了高效液相色譜法同時測定植物生長激素復(fù)硝酚鈉的3種組分，5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉、對硝基苯酚鈉和鄰硝基苯酚鈉含量的方法。方法以C18色譜柱(250mm×4.6mm，5μ m)為分離柱，以甲醇+水=60+40(V/V)做流動相，在254nm波長處測定。結(jié)果復(fù)硝酚鈉樣品中有效成分能達到有效分離；三種組分的線性相關(guān)系數(shù)分別為0.9929、0.9921、0.9931。對方法精密度進行試驗；測得其相對標準偏差分別為0.47%、0.49%和0.35%。

復(fù)硝酚鈉；高效液相色譜；含量

復(fù)硝酚鈉是由鄰硝基苯酚鈉、對硝基苯酚鈉、5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉及其他助劑按一定比例混合加工而成，是一種強力細胞賦活劑，能迅速滲透到植物體內(nèi)，提高細胞活力，屬于廣譜型植物生長調(diào)節(jié)劑，具有促進植物生長、生根、發(fā)芽，?；ㄗ?，提高產(chǎn)量等作用。目前有關(guān)復(fù)硝酚鈉相關(guān)檢測的報道還比較少[1]。本文采用高效液相色譜法同時對復(fù)硝酚鈉樣品中三種組分進行分析測定，簡單易行，同柱同條件分析，降低了分析成本和分析時間。

一、實驗部分

1.儀器與試劑

W a t e r s 2 6 9 5液相色譜儀，2 9 9 8二極管陣列檢測器，Emp o we r數(shù)據(jù)處理軟件。5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉（棗紅色片狀晶體），對硝基苯酚鈉（黃色片狀晶體），鄰硝基苯酚鈉（紅色針狀晶體）標準品，(9 9.0%，均由國藥集團化學(xué)試劑有限公司提供)；復(fù)硝酚鈉樣品(山東梁山鼎圣生物工程有限公司提供)；甲醇(色譜純)；超純水(自制)；磷酸(分析純，天津科密歐化學(xué)試劑有限公司)。

2.色譜條件

Sy mme t r y R C18色譜柱（2 50 mm×4.6 mm，5μ m）；2 9 9 8二極管陣列檢測器，檢測波長為2 54n m，柱溫2 5℃，進樣量為10 μ L，流動相為甲醇+水=6 0+40(V/V)溶液，流速0.8 mL.mi n-1。

3.試驗方法

圖1復(fù)硝酚鈉色譜圖

（1）標準溶液配制 分別稱取5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉、對硝基苯酚鈉、鄰硝基苯酚鈉標品各0.2 0 g(均準確至0.0 0 0 2g)于3個10 0 mL容量瓶中，用水溶解并定容。準確移取上述溶液2mL于10 mL容量瓶中，逐滴滴加磷酸溶液至溶液由橙紅色變?yōu)闇\黃色(p H值約為4.5)，用流動相定容，用0.45μ m微孔濾膜過濾，備用。

（2）試樣溶液的配制 稱取復(fù)硝酚鈉樣品0.6 0 g于10 0 mL容量瓶中，加水超聲溶解并稀釋至刻度。準確移取上述溶液2 mL于10 mL容量瓶中，逐滴滴加磷酸溶液至溶液由橙紅色變?yōu)闇\黃色(p H值約為4.5)，用流動相定容，用0.45μ m微孔濾膜過濾，外標法定量。標樣色譜圖如圖1。

4.計算

將測得的兩針試樣溶液和兩針標樣溶液（峰面積變化小于0.5%）中的5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉、對硝基苯酚鈉、鄰硝基苯酚鈉的峰面積分別進行平均，用外標法分別計算欲測組分質(zhì)量分數(shù)X,%，按下式計算：

式中:A標—標樣溶液中,鄰硝基苯酚鈉(對硝基苯酚鈉、5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉)峰面積;

A樣—試樣溶液中,鄰硝基苯酚鈉(對硝基苯酚鈉、5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉)峰面積平均值)峰面積值;

m標—鄰硝基苯酚鈉(對硝基苯酚鈉、5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉)標樣的質(zhì)量,g;

m樣—試樣的質(zhì)量,g;

P—標樣中鄰硝基苯酚鈉(對硝基苯酚鈉、5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉)的質(zhì)量分數(shù),%(m/m)。

二、結(jié)果與討論

1.檢測波長選擇

對三種組分標準溶液(0.4mg.mL-1)采用二級管陣列檢測器進行全波長(19 0～47 0 n m)掃描，發(fā)現(xiàn)波長2 54n m處均有較強的吸收，因此選擇2 54n m作為測定波長。

2.線性相關(guān)性測定

分別配制5個不同濃度的5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉、對硝基苯酚鈉、鄰硝基苯酚鈉標準品溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg.mL-1，按實驗操作條件分別測定，以樣品濃度為橫坐標，以峰面積為縱坐標，得工作曲線。結(jié)果表明樣品峰面積與濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，其線性相關(guān)系數(shù)分別為0.9 9 2 9、0.9 9 2 1、0.9 9 3 1。

3.方法精密度

在相同的色譜條件下，對0.4mg.mL-1的5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉、對硝基苯酚鈉、鄰硝基苯酚鈉混合標準溶液進行5次平行測定,測得其相對標準偏差分別為0.47%、0.49%和0.3 5%。

取同一樣品溶液分別于1天內(nèi)每隔1小時測一次，5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉、對硝基苯酚鈉、鄰硝基苯酚鈉的日內(nèi)相對偏差(n=5)分別為0.3 8%、0.50%、0.49%。

結(jié)論

試驗結(jié)果表明，采用本方法分析復(fù)硝酚鈉樣品，其中5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉、對硝基苯酚鈉、鄰硝基苯酚鈉的百分含量分別為10.9 3%，3 5.8 9%，3 0.0 6%。復(fù)硝酚鈉樣品中有效成分能達到有效、穩(wěn)定分離，節(jié)省分析時間，可應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)中對產(chǎn)品質(zhì)量的控制。

[1]劉哲,史宏偉,田春祥.1.8%復(fù)硝酚鈉水劑的高效液相色譜分析[J].農(nóng)藥科學(xué)與管理，2005，26(11)：5-7.