自身免疫性溶血性貧血的實驗室檢測及臨床輸血療效觀察

云富斌

云南省第一人民醫(yī)院輸血科，云南昆明 650032

自身免疫性溶血性貧血，簡稱AIHA，是由于B 淋巴細胞功能出現(xiàn)異常、亢進現(xiàn)象，以致影響免疫功能，導(dǎo)致其出現(xiàn)紊亂并出現(xiàn)自身紅細胞抗體，加速紅細胞破壞而引發(fā)的一種貧血現(xiàn)象[1]。該病癥的臨床表現(xiàn)較多，如發(fā)熱、畏寒、腰背酸痛、黃疸等癥狀，且易于反復(fù)發(fā)作，難以控制。研究表明，自身免疫性溶血性貧血的發(fā)病率與白血病的發(fā)病率接近，約為2.62/（10 萬人·年），且有45%以上患者的病程超過2年，血紅蛋白通常為55～65g/L[2]。一般情況下不主張對自身免疫性溶血性貧血患者進行輸血治療，但若患者出現(xiàn)嚴重貧血時，則需采取輸血治療。不過反復(fù)輸血會對后期的治療帶來很大阻礙，因為反復(fù)輸血會產(chǎn)生不規(guī)則抗體，受免疫血型血清學(xué)特點的影響，這些不規(guī)則抗體極易被自身抗體所掩飾，因此，極易出現(xiàn)漏檢不規(guī)則抗體的情況，進而導(dǎo)致溶血性輸血反應(yīng)。這也決定了對自身免疫性溶血性貧血患者進行不規(guī)則抗體篩選、血型鑒定以及相容性配血試驗的必要性?，F(xiàn)對我院64例自身免疫性溶血性貧血患者的實驗室數(shù)據(jù)、輸血的效果情況進行回顧性分析，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年1月—2013年1月我院64例自身免疫性溶血性貧血患者作為研究對象，所有患者均在輸血前進行實驗檢測?；颊咧?，38例女性、26例男性；年齡42～78 歲，平均年齡（64.3±5.4）歲；病程2～8年，平均病程（5.2±1.1）年。其中，有10例采取輸血治療。

1.2 方法

1.2.1 試劑和儀器的選擇 篩選譜細胞、紅細胞、抗-D 血清、ABO標準紅細胞由某生物醫(yī)藥制品公司提供。多特異性抗體、標準紅細胞（已知Rh 血型）、抗C3d、試劑、抗-lgG 試劑則由某血液生物醫(yī)藥公司提供[3]。

1.2.2 檢測方法 進行的Rh 血型鑒定、直接/間接抗人球蛋白試驗、氯喹放散試驗、自身抗體特異性鑒定、乙醚放散試驗、冷（熱）抗體溶血檢測等均嚴格按照國家臨床檢驗操作規(guī)范進行。

2 結(jié)果

2.1 檢測情況

進行直接抗人球蛋白試驗，64例患者均檢測為陽性，特異性分布情況可見表1。另外，進行血清不規(guī)則抗體篩選也均呈陽性，行間接抗人球蛋白試驗檢測則有21例呈陽性。進行吸收試驗和不規(guī)則抗體篩選后，發(fā)現(xiàn)有6例呈陽性，且均為重復(fù)輸血的貧血患者。然后進行的譜細胞抗體鑒定，結(jié)果顯示有2例抗-C、3例抗-E，1例抗-E、C，未檢測到其他抗體。將患者紅細胞經(jīng)乙醚放散得到的放散液體和已知的Rh 血型、O 型的紅細胞進行抗人球蛋白試驗，顯示間接抗人球蛋白試驗檢測到的21例陽性患者中，有6例發(fā)現(xiàn)為血型特異性抗體，包括4例抗-E、2例抗-C。而在間接抗人球蛋白試驗檢測出的陰性患者中，卻未發(fā)現(xiàn)抗體。

表1 直接抗人球蛋白試驗的分布情況（總例數(shù)：n=64例）

2.2 輸血療效

對于10例采取輸血治療的患者，有針對性地選擇洗滌紅細胞并進行配血（主側(cè)交叉）。給予間接抗人球蛋白試驗檢測出的陽性患者進行交叉配血時，所選擇的血清是經(jīng)反復(fù)吸-收放散法去除了抗體后的血清?；颊呓?jīng)輸血后，并未發(fā)現(xiàn)不良反應(yīng)，10例輸血患者的臨床癥狀并得到有效改善。

3 討論

與一般輸血不同，對患有自身免疫性溶血性貧血（AIHA）的患者進行輸血的風(fēng)險很大。研究發(fā)現(xiàn)有超過1/3 的AIHA 患者中存在不規(guī)則抗體，有些患者血清中的自身抗體存在特異性。另外，輸血時本身也會加重溶血現(xiàn)象。血清中存在的非特異性自身抗體會與紅細胞產(chǎn)生一定的凝集作用，這會給AIHA 患者的輸血工作造成很大困擾。加上AIHA 的病程一般比較長（超過2年），若反復(fù)輸血則會產(chǎn)生其他抗體（ABO 以外抗體）[4]。因此，要保證AIHA患者輸血時的安全可靠性，避免不良的輸血反應(yīng)，就必須在輸血前對患者機體內(nèi)的不規(guī)則抗體以及血型進行檢測和分析，以提升輸血的療效。

目前，AIHA 檢測的方法多種多樣，比較常用是溫抗體溶血檢測方法，主要包括直接抗人球蛋白試驗、間接抗人球蛋白試驗、酶處理紅細胞凝集試驗等?，F(xiàn)簡要介紹一下這幾種常用的檢測方法。①直接抗人球蛋白試驗。溫抗體型是AIHA 中最為常見的類型。而直接抗人球蛋白試驗則是檢測這一類型中WAIHA 的重要手段。一般在37～38℃的情況下，溫抗體的作用是最為活躍的，IgG是其主要的抗體。這一抗體可與相關(guān)抗原紅細胞相結(jié)合，而不出現(xiàn)凝集現(xiàn)象。當(dāng)加入抗人球蛋白血清之后則會與附著在紅細胞上的IgG 相結(jié)合，并發(fā)生凝集反應(yīng)，也就是直接抗人球蛋白試驗的陽性反應(yīng)。但試驗的結(jié)果并不能反應(yīng)溶血的嚴重程度，表現(xiàn)在有些患者在溶血緩解后仍會呈陽性表現(xiàn)，而有些具有較重溶血現(xiàn)象的患者檢測結(jié)果則呈弱陽性[5]。②間接抗人球蛋白試驗。這是檢測游離抗體的主要方法。這一檢測方法中所選用的標準試劑是正常人Rh 基因型的O 型紅細胞，然后將與患者的血清進行孵育，再進行試驗[6]。若檢測呈陽性，則說明患者的血清中含有補體或者游離抗體，同時也說明患者存在較為嚴重的溶血癥狀，這類患者，輸血的風(fēng)險更大。一般來說，直接抗人球蛋白試驗?zāi)転槊庖咝匀苎峁└鼮槊鞔_的依據(jù)。但間接抗人球蛋白試驗則在明確血清抗體能否與正常的紅細胞有效結(jié)合方面發(fā)揮更大作用[7]。③酶處理紅細胞凝集試驗。這也是用來檢測血清中游離自身抗體的重要方法。試驗將木瓜蛋白酶、胰蛋白酶等酶處理了的O 型紅細胞（Rh 基因型）分別與血清進行孵育[8]。若產(chǎn)生凝集反應(yīng)則呈陽性，反之則呈陰性。通過這一試驗可有效提高不完全抗體致敏細胞的凝集敏感度。

除以上比較常用的檢測方法之外，還有氯喹放散試驗、乙醚放散試驗等。在進行不規(guī)則抗體鑒定之前，應(yīng)首先將自身的抗體除去。最為理想的方法是將已經(jīng)放散了自身抗體的紅細胞來吸收自身的抗體。目前，放散試驗的辦法比較多,而使用氯喹放散法能保證抗原活性紅細膜的完整性。氯喹放散試驗?zāi)苋コ颊咦陨淼目贵w，使正反定型相一致。另外，由于有部分患者的自身抗體存在血型特異性特點，且以Rh 血型最為常見。此時，可使用乙醚放散液來替代血清，可避免由于患者自身抗體濃度過低造成漏檢的現(xiàn)象。另外，為使輸血更為安全，不應(yīng)選擇含對應(yīng)血型抗原的紅細胞，并在輸注前進行洗滌。綜上所述，對應(yīng)AIHA 患者建議盡量不采取輸血治療，若一定要進行，在輸血前則必須對AIHA 患者進行不規(guī)則抗體及血型檢測，同時，必須取得家屬的同意，這對保證輸血的安全、有效性具有重要意義。

[1]朱自嚴.提高輸血療效必須首先完善輸血前血液的相容性試驗[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2009,32(2):134-136.

[2]馬幼麗,陸賢吉.自身免疫性溶血性貧血患者的輸血前實驗室檢測及安全輸血[J].臨床血液學(xué)雜志,2013，26(10):674-675.

[3]孔祥騫.自身免疫性溶血性貧血的實驗室檢測與臨床輸血療效分析[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生,2012,50(30):116-119.

[4]朱奕，伍昌林，張愛根，等.AIHA 患者外周血調(diào)節(jié)性B 細胞及IL-10 和TGF-β1 的檢測[J].中國熱帶醫(yī)學(xué)，2013,13（5）：629-630.

[5]張連生，李莉娟,陳慧玲.溶血性貧血診斷進展[J].臨床血液學(xué)雜志,2013，26(7):443-446，449.

[6]武文明，段瑞嫻.溶血試驗的新方法[J].中國藥物與臨床,2013，13(2):259-260.

[7]陸紫敏，王秀芹.自身免疫性溶血性貧血患者部分免疫活性細胞表達的研究[J].同濟大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)，2011,32（6）：63-65.

[8]陸紫敏，紀黎明.不同輸血方法在自身免疫性溶血性貧血患者中應(yīng)用研究[J].中國輸血雜志，2011,24（9）：750-752.