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    GAG、MDA檢測在非霍奇金淋巴瘤診療中的臨床意義

    2014-01-02 08:43:12江銘磊盧仁泉
    檢驗醫(yī)學(xué) 2014年9期
    關(guān)鍵詞:霍奇金淋巴瘤化療

    張 煜,江銘磊,盧仁泉,郭 林

    (復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院腫瘤學(xué)系,上海200032)

    非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma,NHL)是一組高度異質(zhì)性的淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤[1],近年來新發(fā)病例逐年上升,對人類健康產(chǎn)生了很大的影響。目前臨床上診斷淋巴瘤的主要方法為影像學(xué)、骨髓檢查和病理學(xué)診斷,血清學(xué)指標(biāo)主要有乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase,LDH)、β2-微球蛋白(beta 2-microglobulin,β2-MG)、尿微量蛋白(microalbumin,MA)[2]和紅細(xì)胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)等,但這幾項指標(biāo)特異性都不能滿足臨床要求。因此,找到一個合適的用于診斷以及判斷預(yù)后的指標(biāo)對于淋巴瘤的防治具有重要意義。目前,國外已有報道葡糖氨基葡聚糖(glycosaminoglycan,GAG)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)在NHL患者中含量升高[3],但國內(nèi)尚無相關(guān)報道。本研究分析99例NHL患者血清中GAG和MDA水平,以探討其與NHL的關(guān)系。

    材料和方法

    一、研究對象

    收集復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院2011年8月至2013年6月的NHL患者(NHL組)99例,男56例,女43例,年齡(66.67 ±15.48)歲。其中彌漫大 B淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)54例,濾泡型淋巴瘤(follicular lymphoma,F(xiàn)L)26例,NK T細(xì)胞淋巴瘤(NK/T-cell lymphoma,NK/T)15例,其它類型 NHL(如套細(xì)胞淋巴瘤、彌漫大B與濾泡型混合淋巴瘤等)4例。均經(jīng)影像學(xué)和病理學(xué)確診。另外選擇復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院體檢健康者(對照組)58名,男33名,女25 名,年齡(48.10 ±13.42)歲,均無肝、腎、心臟等系統(tǒng)疾病。

    二、方法

    1.標(biāo)本采集 采集4 mL靜脈血于促凝管,3 000×g離心10 min分離血清后吸取血清層,按標(biāo)本收集要求分裝,置-40℃冰箱凍存待測。

    2.檢測方法 使用美國RayBiotech人GAG和人MDA酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)試劑,其基本原理是應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中的GAG和MDA水平。嚴(yán)格按照說明書的操作步驟完成2個項目的檢測,并用比色儀測出所有項目的吸光度(A)值,再經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算得出結(jié)果。

    三、統(tǒng)計學(xué)方法

    用SPSS13.0統(tǒng)計軟件處理,數(shù)據(jù)以中位數(shù)(四分位數(shù))表示,NHL組與對照組之間比較、不同類型NHL之間比較均用非參數(shù)檢驗(Kruskal-Wallis檢驗),F(xiàn)L患者隨訪數(shù)據(jù)用差異率表達(dá)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    結(jié) 果

    一、NHL組與對照組GAG和MDA水平比較

    NHL 組 GAG[4.715(3.398,6.678)μg/L]和 MDA[3.21(2.52 和4.645)mmol/L]含量明顯高于對照組[GAG 0.92(0.73,1.85)μg/L,MDA 1.55(1.54,1.61)mmol/L]。見圖 1。

    二、不同類型NHL患者GAG和MDA水平比較

    GAG和MDA在 FL患者中有較高表達(dá),分別為5.26(4.35,9.01)μg/L 和 3.88(3.57,7.18)mmol/L,見 圖 2。而 GAG 和 MDA 在DLBCL 患者中分別為 4.03(3.27,6.09)μg/L 和2.69(2.28,3.86)mmol/L;在 NK/T 患者中為4.61(3.59,6.73)μg/L 和 2.97(2.57,3.17)mmol/L;在其它類型 NHL 患者中為4.08(3.09,6.13)μg/L和 2.58(2.25,5.28)mmol/L。由此顯示,兩者在FL患者中含量較其他3種NHL患者均有顯著升高(P 均 <0.05)。

    圖1 NHL組與對照組GAG和MDA水平比較

    圖2 不同類型NHL患者GAG和MDA水平比較

    三、GAG和MDA用于FL患者化療效果的監(jiān)測

    本研究選取20例FL化療患者,觀察1個化療周期(約3周)的GAG和MDA水平變化程度。根據(jù)療效評價分為完全緩解組6例,部分緩解組12例以及疾病穩(wěn)定組2例。結(jié)果顯示GAG水平有明顯的變化。6例完全緩解組患者中,有4例患者GAG差異率在20%以上(此差異率標(biāo)準(zhǔn)來自于Rustin等[4]的研究),僅有 2例差異率在10%以下;12例部分緩解組患者中,有6例患者GAG差異率在20%以上,3例在10% ~20%之間,還有3例差異率不足10%;2例疾病穩(wěn)定組患者其GAG差異率均在10%~20%之間。GAG的總體差異率符合臨床表現(xiàn)(符合率>75%),見表1、圖3。圖3中患者3、患者8和患者14分別為完全緩解、部分緩解和疾病穩(wěn)定患者,對GAG進行跟蹤監(jiān)測,其檢測結(jié)果與臨床表現(xiàn)基本一致。但20例FL患者中只有3例患者的MDA變化符合臨床表現(xiàn)。

    表1 GAG改變與臨床表現(xiàn)之間的關(guān)系

    圖3 3例FL患者不同臨床表現(xiàn)的GAG水平變化

    討 論

    GAG是由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的一種生物大分子,共價結(jié)合到核心蛋白形成蛋白多糖,分為透明質(zhì)酸(hyaluronic acid,HA)、4-硫酸軟骨素、6-硫酸軟骨素、硫酸皮膚素、硫酸乙酰肝素、肝素和硫酸角質(zhì)素等。除HA外,在體內(nèi)GAG以蛋白聚糖的形式存在。GAG在多種腫瘤相關(guān)的進程中扮演重要角色,其在機體內(nèi)有著調(diào)節(jié)生長因子、細(xì)胞行為、炎癥、血管生成和蛋白水解等作用[5]。MDA是機體內(nèi)不飽和脂肪酸在自由基的作用下產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化的最終產(chǎn)物,自由基是化學(xué)致癌物的活性形式之一,它通過膜的脂質(zhì)過氧化導(dǎo)致細(xì)胞癌變。因此,MDA可反映脂質(zhì)過氧化和抗氧化系統(tǒng)失衡狀態(tài),預(yù)測人群中患癌的高風(fēng)險性[6]。

    國外已有研究將GAG和MDA這2項指標(biāo)聯(lián)合檢測用于NHL的診斷及預(yù)后判斷。本研究顯示,GAG和MDA在NHL患者血清中含量明顯高于對照組(P <0.001),這與之前的報道一致[3]。

    FL是來源于濾泡生發(fā)中心細(xì)胞的惰性B細(xì)胞腫瘤,在西方國家FL約占所有NHL的50%,在中國FL約占NHL的13%。由于FL在治療上有病程長、反復(fù)復(fù)發(fā)或侵襲性轉(zhuǎn)移的特點,所以早期診斷尤為重要。本研究發(fā)現(xiàn)在FL患者中,GAG和MDA較其他類型NHL有明顯升高。曾有報道LDH-5在FL患者中含量升高[6],若能將GAG和MDA與LDH-5聯(lián)合檢測,GAG和MDA在FL的早期診斷可能會更有意義。

    本研究選取了20例FL患者進行跟蹤監(jiān)測(至少3次化療)。經(jīng)過1個化療周期的治療,這20例患者中GAG差異率比較符合疾病發(fā)展,符合率>75%。我們用中位數(shù)的方法進行非參數(shù)檢驗,比較了3次化療后GAG的變化,結(jié)果顯示呈較明顯的下降趨勢,表明GAG在FL患者化療進程中會隨著療效而改變。另外,在完全緩解組中發(fā)現(xiàn),有2例患者下降程度較小,可能與標(biāo)本留取、標(biāo)本保存以及檢測時間等因素有關(guān)。目前,GAG已經(jīng)被證明會在NHL發(fā)生器官部位檢測出GAG的核心蛋白[7],所以GAG是很好的NHL預(yù)后判斷指標(biāo),尤其可以應(yīng)用于FL,還可以為臨床制定化療方案提供依據(jù)。與此同時,我們也發(fā)現(xiàn)MDA在這20例患者中,僅2例部分緩解和1例完全緩解患者有較明顯的變化,其余均無明顯變化。故MDA尚無法用于預(yù)后判斷。又因為在NHL國際預(yù)后指數(shù)中,LDH水平是重要的NHL預(yù)后判斷指標(biāo)之一[8],但其在有骨髓浸潤時會顯著升高[9-10],所以 GAG用于預(yù)后判斷有更高的價值。

    GAG和MDA分別單獨檢測或與其他腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測將更有利于NHL的臨床診斷和治療。

    [1]江 紅,李佩章,勞 明.血清LDH和β2-MG水平與非霍奇金淋巴瘤的預(yù)后關(guān)系[J].醫(yī)學(xué)研究雜志,2008,37(10):91-92.

    [2]任 麗,陳 瑛.非霍奇金淋巴瘤實驗診斷進展[J].國外醫(yī)學(xué)臨床生物化學(xué)與檢驗學(xué)分冊,2005,26(3):151-153.

    [3]Eissa LA,Esmaeel MI.Relevance of some serum biomarkers(E cadherin,GAGs& MDA)in patients with diffuse large B-cell lymphoma[J].Pak J Pharm Sci,2008,21(1):29-35.

    [4]Rustin GJ,Vergote I,Eisenhauer E,et al.Definitions for response and progression in ovarian cancer clinical trials incorporating RECIST 1.1 and CA 125 agreed by the Gynecological Cancer Intergroup(GCIG)[J].Int J Gynecol Cancer,2011,21(2):419-423.

    [5]Yip GW,Smollich M,G?tte M.Therapeutic value of glycosaminoglycans in cancer[J].Mol Cancer Ther,2006,5(9):2139-2148.

    [6]盧橋發(fā),王啟明,甄海寧,等.聯(lián)合檢測血漿中GSH-PX、MDA及腫瘤蛋白對肺癌篩檢的Bayes判別分析[J].腫瘤防治研究,2005,32(11):723-725.

    [7]Lu R,Jiang M,CHEN Z,et al.Lactate dehydrogenase 5 expression in non-hodgkin lymphoma is associated with the induced hypoxia regulated protein and poor prognosis[J].PLoS One,2013,8(9):e74853.

    [8]Kopper L,Timar J,Kovalszky I,et al.Epitopes of cartilage core proteins and GAG pattern in human non-Hodgkin lymphoma xenografts[J].In Vivo,1990,4(2):149-152.

    [9]古愛虎,寇克韌,王 勇,等.非霍奇金淋巴瘤患者血清LDH與β2-MG檢測及其臨床意義[J].中國臨床新醫(yī)學(xué),2013,6(3):221-223.

    [10]陳 芳,曹方方,張繼紅,等.β2微球蛋白與乳酸脫氫酶對非霍奇金淋巴瘤治療效果的判斷價值[J].中國全科醫(yī)學(xué),2011,114(36):4160-4163.

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