美洲鰣魚卵巢發(fā)育規(guī)律和性類固醇激素變化研究

洪 磊，李兆新，陳 超，郭正龍，王蔚芳，雷霽霖

(1.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所，農(nóng)業(yè)部海洋漁業(yè)可持續(xù)發(fā)展重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，青島市海水魚類種子工程與生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東青島266071；2.江蘇中洋集團(tuán)，江蘇南通226600）

1 前言

鰣魚俗稱遲魚，是我國(guó)傳統(tǒng)名貴經(jīng)濟(jì)魚類，因其肉細(xì)味鮮，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，明朝時(shí)即位列中國(guó)四大名魚。由于多年過(guò)度捕撈以及江河水質(zhì)變化等原因，我國(guó)鰣魚種群數(shù)量銳減[1，2]，1988年已被列入國(guó)家一級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生物種。美洲鰣魚(Alosa sapidissima)原產(chǎn)北美洲大西洋海岸[3]，與中國(guó)鰣魚同屬不同種，具有相同的溯河產(chǎn)卵習(xí)性，形態(tài)特征、魚肉品質(zhì)和品味等都與中國(guó)鰣魚十分相似，在后者瀕臨滅絕的情況下引入我國(guó)市場(chǎng)，銷售價(jià)格十分可觀，前景良好。目前國(guó)內(nèi)美洲鰣魚相關(guān)的研究工作主要集中在繁殖、養(yǎng)殖技術(shù)及早期發(fā)育管理等方面[4～7]，對(duì)親魚卵巢結(jié)構(gòu)、發(fā)育及卵子發(fā)生方面未見報(bào)道。本研究利用組織學(xué)、形態(tài)學(xué)及電化學(xué)發(fā)光免疫等技術(shù)方法，系統(tǒng)研究美洲鰣魚親魚卵巢發(fā)育的組織學(xué)特征、性類固醇激素（雌二醇）的周期性變化，旨在了解美洲鰣魚卵子發(fā)生及內(nèi)分泌調(diào)控規(guī)律，以期能為親魚營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化和人工大規(guī)模繁殖提供科學(xué)依據(jù)，其結(jié)果對(duì)漁業(yè)資源的保護(hù)和珍稀魚類開發(fā)利用都具有重大的意義。

2 材料和方法

2.1 實(shí)驗(yàn)魚培育

本實(shí)驗(yàn)所用美洲鰣魚樣本來(lái)自江蘇中洋集團(tuán)繁育中心。實(shí)驗(yàn)樣本為達(dá)到性成熟的3齡以上雌性親魚，全長(zhǎng)(40±5)cm，體重(1.2±0.5)kg。親魚培育水溫(19±2.0)℃，溶解氧＞7mg/L，pH 7.3±0.2，總氨氮＜0.05mg/L，日換水率5%，投喂量為魚體重的3%，每日按時(shí)清餌排污。

2.2 組織切片和性腺分期

實(shí)驗(yàn)魚用MS222麻醉后解剖，小心取出性腺，在Davis固定液中固定24 h后轉(zhuǎn)入70%酒精保存。固定的性腺組織經(jīng)梯度脫水、透明和石蠟包埋后，用Leica RM 2016型切片機(jī)連續(xù)切片，厚度為5～7μm，H.E染色，中性樹脂封片。在顯微鏡（Olym-pus BX51）下拍照觀察。根據(jù)Мейен的分類標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合卵母細(xì)胞發(fā)育的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，對(duì)卵母細(xì)胞發(fā)育進(jìn)行分期。

2.3 性類固醇激素測(cè)定

使用羅氏ROCHE cobas e601型電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀測(cè)定血清中雌二醇（E2）的表達(dá)含量，測(cè)定數(shù)據(jù)以pg/m L單位來(lái)表示。

2.4 數(shù)量特征測(cè)量和數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

對(duì)實(shí)驗(yàn)魚進(jìn)行生物學(xué)測(cè)量，包括體重（BW）、全長(zhǎng)（TL）、性腺重（GW）及肝臟重（LW）等。性腺發(fā)育相關(guān)指數(shù)計(jì)算：性腺指數(shù)（GSI）=GW/BW×100；肝臟指數(shù)（HSI）=LW/BW×100；肥滿度（CF）=[BW/(BL)3]×100。對(duì)以上數(shù)值進(jìn)行單因素方差（ANOVA）分析（SPSS軟件，V11.5），檢測(cè)變化差異的顯著性。取差異顯著性（P）為0.05，P≤0.05視為差異顯著，反之不顯著。

3 結(jié)果與分析

3.1 美洲鰣魚卵巢發(fā)育周期變化規(guī)律

鰣魚卵巢成對(duì)發(fā)育，分左右兩葉，位于體腔的腹中線，緊貼于腎臟腹面兩側(cè)，在身體后端形成短小的輸卵管(見圖1)。卵巢內(nèi)有卵巢腔和產(chǎn)卵板，成熟的卵子先突破包圍在它周圍的濾泡膜而跌入卵巢腔，然后經(jīng)輸卵管從泄殖孔排出體外。卵巢的外部形態(tài)和組織結(jié)構(gòu)，隨著年齡的增加、季節(jié)和性周期的運(yùn)轉(zhuǎn)而變化。根據(jù)卵巢外部形狀、色澤及卵母細(xì)胞不同的發(fā)育時(shí)相（切片視野中數(shù)量或者面積占優(yōu)勢(shì)的卵母細(xì)胞類型）為卵巢劃分依據(jù)，將鰣魚的卵巢發(fā)育分為6個(gè)時(shí)期。

圖1 美洲鰣魚卵巢Fig.1 The ovary of Alosa sapidissima

第Ⅰ期，卵巢很小，呈透明線狀，難辨雌雄，卵巢內(nèi)以卵原細(xì)胞為主，終生只出現(xiàn)一次，在親魚卵巢成熟周期調(diào)查中不可見。

第Ⅱ期，已分化出完整的雙葉狀結(jié)構(gòu)，長(zhǎng)度較第Ⅰ期性腺有所增加，呈前部鈍圓逐漸往后細(xì)長(zhǎng)延伸的圓錐形，肉紅色，表面被覆一層淡紅色被膜，可見微細(xì)的血管，肉眼可初步辨別雌、雄。性腺發(fā)育系數(shù)為1左右（見圖1a）。肉眼不可分辨卵母細(xì)胞，組織切片觀察，卵巢有明顯的卵巢腔，由卵巢表面向腔體內(nèi)部折疊形成產(chǎn)卵板，大量發(fā)育中的卵母細(xì)胞封閉在產(chǎn)卵板內(nèi)。卵巢中以第2時(shí)相卵母細(xì)胞為主（見圖2a）。

第Ⅲ期，卵巢呈淡黃色，表面血管豐富。卵巢體積明顯增大，總體仍為扁平長(zhǎng)囊狀，卵巢上分葉所形成的橫紋明顯，細(xì)小的卵母細(xì)胞肉眼可見，但不易分離。組織切片觀察，卵母細(xì)胞大小不均，第3時(shí)相卵母細(xì)胞占絕大部分面積，第2時(shí)相卵母細(xì)胞所占面積很小，多分布于小葉邊緣（見圖1b）。

第Ⅳ期，卵巢為淡黃色或淺桔色，迅速生長(zhǎng)，體積明顯膨脹，呈囊狀，左右側(cè)卵巢在鰾處有少量重疊，整個(gè)體腔幾乎被卵巢充滿，肉眼可見增大的卵粒，顆粒飽滿，卵粒相互粘連，不易游離。以第4時(shí)相初期卵母細(xì)胞為主，存在部分第2、3時(shí)相卵母細(xì)胞（見圖1c）。

第Ⅴ期，產(chǎn)卵期卵巢，卵巢極度發(fā)育，魚腹表面可見圓柱形隆起，卵巢大、松軟，卵粒大都游離，透明狀。輕輕地?cái)D壓，泄殖孔處有成熟卵粒流出。組織切片觀察，卵巢內(nèi)除第5時(shí)相的卵母細(xì)胞外，還含有第3、4時(shí)相的卵母細(xì)胞（見圖1d）。

第Ⅵ期，即剛產(chǎn)過(guò)卵的卵巢，卵巢退化，體積和重量大為減小，松軟癟塌，卵巢腔萎縮。保有未產(chǎn)出的成熟卵及發(fā)育未成熟而未產(chǎn)出退化的卵。

3.2 美洲鰣魚卵母細(xì)胞形態(tài)發(fā)育特征及分期

魚類卵子的發(fā)生經(jīng)過(guò)增殖、生長(zhǎng)和成熟這幾個(gè)時(shí)期。隨著季節(jié)的變化和性周期的運(yùn)轉(zhuǎn)，在卵巢的組織發(fā)育過(guò)程中，可以觀察到處在不同發(fā)育階段的生殖細(xì)胞。

第1時(shí)相，處于卵原細(xì)胞階段或由卵原細(xì)胞向初級(jí)卵母細(xì)胞過(guò)度的細(xì)胞。

第2時(shí)相，處于小生長(zhǎng)期的初級(jí)卵母細(xì)胞，呈圓形、橢圓形或多角形，細(xì)胞質(zhì)增長(zhǎng)較快，細(xì)胞質(zhì)呈現(xiàn)強(qiáng)嗜堿性，蘇木精染色成藍(lán)紫色（見圖2a）。細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)大而圓的細(xì)胞核，略近中央，核膜明顯，核質(zhì)著色淺，早期核中可見極細(xì)，棒狀染色體。核仁多個(gè)，分布于核膜內(nèi)緣。細(xì)胞外有單層濾泡膜包被。在較早階段的細(xì)胞質(zhì)中存在與核仁染色相近的團(tuán)塊狀卵黃核（見圖2b）。

第3時(shí)相，初級(jí)卵母細(xì)胞進(jìn)入大生長(zhǎng)期，其形態(tài)基本呈圓球形，細(xì)胞體積明顯增大，細(xì)胞質(zhì)呈現(xiàn)弱嗜堿性。核膜呈波狀形，十幾個(gè)到數(shù)十個(gè)不等的細(xì)小核仁附在核膜上，一般未見粗大核仁存在。細(xì)胞質(zhì)外緣出現(xiàn)皮質(zhì)液泡。早期只出現(xiàn)一層松散排列、大小不一的液泡，隨后液泡數(shù)目不斷增加并逐漸向內(nèi)緣移位，從一層、兩層到數(shù)層（見圖2c、2d）。到Ⅲ時(shí)相晚期，胞質(zhì)的皮質(zhì)部分首先出現(xiàn)一些被H.E法染成紫紅色的卵黃顆粒，以后卵黃顆粒逐漸增多，廣泛分布于液泡之間的細(xì)胞質(zhì)中。細(xì)胞外的濾泡細(xì)胞由單層扁平濾泡細(xì)胞期逐漸轉(zhuǎn)化為雙層扁平濾泡細(xì)胞期（見圖2c）、立方形顆粒細(xì)胞期（見圖2e）。卵母細(xì)胞膜與濾泡細(xì)胞之間開始出現(xiàn)放射帶并分化為內(nèi)外兩層（見圖2d、2e）。

第4時(shí)相，處于大生長(zhǎng)期晚期的初級(jí)卵母細(xì)胞，即卵黃充滿期。細(xì)胞和胞核直徑均有所增大。小核仁數(shù)量增多，多位于核膜內(nèi)側(cè)周邊；核膜形狀不規(guī)則。卵黃球逐漸增多，直至幾乎充滿核外空間，只有在核的周圍及靠近卵膜邊緣有較多的細(xì)胞質(zhì)，呈弱嗜堿性。放射帶明顯增厚，相對(duì)而言，內(nèi)層放射帶較厚，外層放射帶較薄，放射帶上的條紋清晰可見。胞外膜可分為濾泡細(xì)胞構(gòu)成的顆粒細(xì)胞層及由莢膜細(xì)胞、毛細(xì)血管等構(gòu)成的莢膜細(xì)胞層（見圖2f、2h）。

第5時(shí)相，成熟的卵細(xì)胞。核膜破裂并消失，細(xì)胞質(zhì)被卵黃擠到細(xì)胞的邊緣。卵黃球散布于整個(gè)卵母細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)，大多數(shù)呈橢圓形，排列十分緊密，有的卵黃球已經(jīng)融合成卵黃板，呈均質(zhì)紅染。卵質(zhì)的邊緣仍有液泡，即將排卵的濾泡膜松馳，大部分與卵膜分離（見圖2i）。

第6時(shí)相，細(xì)胞形狀不規(guī)則，蜷曲于卵巢內(nèi)，其特征是核消失，卵黃液化。在卵母細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育的過(guò)程中存在卵母細(xì)胞萎縮現(xiàn)象（見圖2j）。

3.3 美洲鰣魚卵巢發(fā)育過(guò)程生物學(xué)數(shù)據(jù)變化

在鰣魚卵巢發(fā)育周期，親魚肝臟指數(shù)HSI在1.32～2.64范圍內(nèi)波動(dòng)，Ⅰ期水平最低，逐漸升高并于Ⅳ期達(dá)到峰值，此后降至1.48的水平產(chǎn)卵，與Ⅱ期、Ⅲ期親魚HSI水平基本持平。整個(gè)發(fā)育周期HSI值差異不顯著。隨著卵巢的發(fā)育，親魚肥滿度CF呈逐漸增加的趨勢(shì)，Ⅰ～Ⅱ期維持在0.8左右，在Ⅴ期卵巢達(dá)到1.1的最大值。CF變化差異不顯著（見圖3）。

圖2 美洲鰣魚卵母細(xì)胞Fig.2 The oocyte of Alosa sapidissima

美洲鰣魚雌性親魚性腺指數(shù)GSI與血漿中E2的變化如圖4所示。隨著鰣魚性腺開始發(fā)育，卵巢增大增重，親魚GSI開始升高，Ⅱ期后發(fā)育加速，在產(chǎn)卵期（卵巢Ⅴ期）時(shí)達(dá)到頂峰。本實(shí)驗(yàn)中卵巢發(fā)育Ⅴ期的鰣魚GSI為18.47±1.10，顯著高于卵巢Ⅲ期鰣魚GSI（11.78±0.33），但是與卵巢Ⅳ期鰣魚GSI（14.92±2.04）差異不顯著。在性腺發(fā)育過(guò)程中E2的變化規(guī)律與GSI基本相同，性腺發(fā)育早期鰣魚血漿中E2表達(dá)水平較低，進(jìn)入Ⅲ期以后E2表達(dá)水平開始上升。本實(shí)驗(yàn)中卵巢發(fā)育處于Ⅴ期的鰣魚血漿E2表達(dá)水平最高，雖與卵巢Ⅳ期鰣魚E2表達(dá)量相比沒有顯著性差異，但是顯著高于卵巢Ⅰ～Ⅲ期鰣魚樣品中E2表達(dá)水平。

圖3 美洲鰣魚肝臟指數(shù)(HSI)和肥滿度(CF)的變化Fig.3 Hepatosomatic index and condition factor variation of Alosa sapidissima

圖4 美洲鰣魚性腺指數(shù)(GSI)和血漿中雌二醇(E2)的變化Fig.4 Gonadosomatic index and plasma 17-estradiol levelsvariation of Alosa sapidissima

4 總結(jié)與討論

4.1 美洲鰣魚的產(chǎn)卵類型及卵母細(xì)胞發(fā)育特征

魚類繁殖的周期性活動(dòng)可以分為3種類型：完全同步型，部分同步型和不同步型。完全同步型，卵巢內(nèi)的卵母細(xì)胞都處于形同的發(fā)育階段；部分同步型，卵巢內(nèi)至少由兩種處于不同發(fā)育階段的卵母細(xì)胞群組成，它們?cè)谝荒陜?nèi)通常只產(chǎn)卵一次，生殖季節(jié)相當(dāng)短；不同步型，卵巢內(nèi)含有各個(gè)發(fā)育階段的卵母細(xì)胞，一年內(nèi)產(chǎn)卵多次，生殖季節(jié)相當(dāng)長(zhǎng)，如金魚、鳉魚等[8]。研究結(jié)果表明，美洲鰣魚卵母細(xì)胞的發(fā)育呈部分同步型。不同發(fā)育階段的卵巢中含有多種時(shí)相的卵母細(xì)胞，并且在排卵后的卵巢中，除了排卵后殘留的空濾泡膜外，仍然含有一定數(shù)量的、發(fā)育正常的3、4時(shí)相卵母細(xì)胞，這與歐洲鰨(Solea solea)[9]、半滑舌鰨(Cynoglossus semilaevis)[10]、條斑星鰈(Veras permoseri)[11]的產(chǎn)卵特征一致。當(dāng)親魚營(yíng)養(yǎng)積累充足且養(yǎng)殖環(huán)境理想的狀態(tài)下，在短時(shí)間內(nèi)存在再次排卵的可能，因此美洲鰣魚應(yīng)該屬于一年產(chǎn)卵一次的部分同步型，也被稱為非同步分批多次產(chǎn)卵類型。

魚類卵子的發(fā)生要經(jīng)過(guò)增殖、生長(zhǎng)和成熟這幾個(gè)時(shí)期。卵母細(xì)胞的發(fā)育要經(jīng)過(guò)原生質(zhì)生長(zhǎng)、卵黃的發(fā)生積累等過(guò)程，而卵黃發(fā)生期的主要特征是卵母細(xì)胞胞質(zhì)中合成卵黃顆粒。本研究發(fā)現(xiàn)，美洲鰣魚卵母細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中，首先在質(zhì)膜邊緣出現(xiàn)皮質(zhì)液泡，進(jìn)入大生長(zhǎng)期后開始出現(xiàn)卵黃顆粒，其后卵黃顆粒數(shù)量和體積迅速增加，逐漸充滿整個(gè)核外空間。此外，在卵母細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有部分卵母細(xì)胞不能最終地完成其整個(gè)發(fā)育過(guò)程而出現(xiàn)萎縮的現(xiàn)象，主要表現(xiàn)為各層卵膜分離并逐漸破損溶解，細(xì)胞質(zhì)收縮，細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生大量的空泡，萎縮的卵子最終會(huì)被分解吸收。產(chǎn)生萎縮的原因可能是復(fù)雜的，主要的原因之一是卵巢在發(fā)育的過(guò)程中缺乏必需的營(yíng)養(yǎng)，使第3時(shí)相的卵母細(xì)胞向第4時(shí)相過(guò)渡時(shí)，卵黃的形成受到阻礙，甚至使第2時(shí)相的卵母細(xì)胞向第3時(shí)相轉(zhuǎn)變也受到抑制。在此過(guò)程中卵黃顆粒膠液化，卵膜發(fā)生皺褶，最后斷裂而消失[12]。

魚類的卵膜來(lái)源于卵母細(xì)胞和濾泡細(xì)胞，或由兩者相互作用而形成，其結(jié)構(gòu)從二層到五層不等，而厚度也不相同，浮性卵卵膜薄，卵周隙大；沉性卵卵膜厚，卵周隙小，表現(xiàn)出結(jié)構(gòu)與環(huán)境相適應(yīng)的特點(diǎn)[13]。美洲鰣魚小生長(zhǎng)期的卵膜為單層結(jié)構(gòu)，細(xì)胞外包圍一層濾泡細(xì)胞。隨著卵細(xì)胞發(fā)育，濾泡細(xì)胞逐漸由單層發(fā)展為2層扁平狀細(xì)胞層，后來(lái)發(fā)展成內(nèi)層細(xì)胞一般呈立方狀，外層細(xì)胞一般呈扁平狀。在第3時(shí)相卵母細(xì)胞早期未見放射帶形成，當(dāng)卵母細(xì)胞發(fā)育到3時(shí)相晚期時(shí)，出現(xiàn)由卵細(xì)胞膜向外形成放射帶結(jié)構(gòu)。至第4時(shí)相卵母細(xì)胞中、后期時(shí)，放射帶厚度明顯增加，出現(xiàn)明暗相間的放射紋。放射帶的保護(hù)卵母細(xì)胞發(fā)育、保持胚胎良好的通氣性和調(diào)節(jié)滲透壓等生理機(jī)能充分顯示出來(lái)[14，15]。

4.2 性腺指數(shù)、肝臟指數(shù)和肥滿度與卵巢發(fā)育的關(guān)系

性腺指數(shù)GSI的快速變化可直接反應(yīng)出在產(chǎn)卵調(diào)控過(guò)程中親魚性腺的快速生長(zhǎng)和發(fā)育。與高體鰤(Serioladumerili)[16]和花鱸(Lateolabraxjaponicas)[17]相似，美洲鰣魚GSI在產(chǎn)卵期快速升高，Ⅴ期卵巢時(shí)達(dá)到峰值，在非生殖期保持較低的水平，表明性腺對(duì)環(huán)境因子調(diào)控應(yīng)答機(jī)制較好。

肝臟指數(shù)HSI可反應(yīng)魚體內(nèi)儲(chǔ)存能量的多少，其變化可反映出親魚的攝食情況和肝臟卵黃蛋白原合成的動(dòng)態(tài)變化[18]，因此HSI是評(píng)價(jià)魚類性腺發(fā)育的重要數(shù)量指標(biāo)。本研究表明美洲鰣魚HSI在卵巢發(fā)育至Ⅳ期達(dá)到峰值，但隨后下降。親魚在產(chǎn)卵期前攝食水平較高而提高能量?jī)?chǔ)備，在卵黃發(fā)生期，魚體儲(chǔ)能被肝臟用于卵黃蛋白原合成和運(yùn)輸[19]，因此HSI在卵巢發(fā)育前期呈上升的態(tài)勢(shì)。隨著卵巢的發(fā)育、膨大，越來(lái)越侵占胃腸等其他內(nèi)臟空間，當(dāng)接近Ⅴ期排卵期時(shí)鰣魚攝食量已大幅下降，而此時(shí)卵黃物質(zhì)仍在加速積累，肝臟儲(chǔ)能被快速消耗，因此出現(xiàn)鰣魚HSI在卵巢發(fā)育后期下降的趨勢(shì)。暗紋東方鲀?cè)谛韵侔l(fā)育中就存在性腺指數(shù)愈大，肝臟指數(shù)愈小的現(xiàn)象，即隨著成熟度的提高，卵巢逐漸加大而肝臟逐漸減小[20]。

魚類肥滿度CF常用于比較魚類的生長(zhǎng)情況，也可作為不良環(huán)境狀況的指標(biāo)。生長(zhǎng)是魚類長(zhǎng)期攝食、吸收和消耗能量過(guò)程的綜合反映。生長(zhǎng)緩慢則意味著沒有足夠的能量用于繁殖，可造成個(gè)體健康的下降和繁殖力降低。本研究中美洲鰣魚卵巢發(fā)育過(guò)程中CF基本持平略呈上升趨勢(shì)，與其他魚類研究結(jié)果比較并沒有廣泛的共性，可能是由于魚類生殖策略的差異導(dǎo)致生殖耗能的差異所致[10]。

4.3 血漿雌二醇水平與卵巢發(fā)育的關(guān)系

美洲鰣魚血漿E2檢測(cè)過(guò)程中，卵巢發(fā)育Ⅱ期時(shí)，親魚處于生長(zhǎng)和營(yíng)養(yǎng)積累階段，檢測(cè)的激素處于低水平。隨后親魚性腺處于快速發(fā)育期，E2檢測(cè)值也表現(xiàn)為急劇上升，從外觀觀察親魚腹部出現(xiàn)膨脹、變硬再變軟最終至排卵的現(xiàn)象。因?yàn)槊乐搛堲~在人工受精后立即死亡，所以沒有檢測(cè)到排卵后血漿E2水平。美洲鰣魚血液E2水平在Ⅲ期后持續(xù)升高，Ⅴ期時(shí)達(dá)到峰值，其變化規(guī)律與GSI相同。

5 結(jié)語(yǔ)

本研究通過(guò)對(duì)美洲鰣魚卵巢發(fā)育周期組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)，美洲鰣魚屬于非同步分批產(chǎn)卵類型；根據(jù)卵巢外部形狀大小及色澤等的不同，可將美洲鰣魚卵巢發(fā)育過(guò)程分為6個(gè)時(shí)期；根據(jù)卵母細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)、卵黃物質(zhì)的積累和濾泡細(xì)胞的變化，將卵子發(fā)生劃分為6個(gè)時(shí)相。通過(guò)對(duì)美洲鰣魚形態(tài)學(xué)和電化學(xué)發(fā)光免疫等技術(shù)方法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，在卵巢發(fā)育周期肝臟指數(shù)HSI先上升后下降在卵巢Ⅳ期達(dá)到峰值而肥滿度CF基本呈上升趨勢(shì)，但差異都不顯著；性腺指數(shù)GSI與血漿中雌二醇E2水平在產(chǎn)卵期快速升高，卵巢Ⅴ期時(shí)達(dá)到峰值，顯著高于發(fā)育前水平，表現(xiàn)出與性腺發(fā)育協(xié)同一致的變化規(guī)律。

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