35%吡蟲啉·福美雙懸浮種衣劑的高效液相色譜分析

胡劍飛（上海中冠生物科技有限公司 上海，201000，中國(guó))

吡蟲啉是煙堿類超高效殺蟲劑； 福美雙則是一種廣譜保護(hù)性殺菌劑，兩者復(fù)配的懸浮種衣劑對(duì)棉花種子等拌種使用，具有良好藥效。 目前，吡蟲啉和福美雙的單劑有相應(yīng)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，均采用甲醇加水為流動(dòng)相、C18 柱、紫外檢測(cè)器，分別在260nm 和254nm 波長(zhǎng)處進(jìn)行測(cè)定。 本文采用反相高效液相色譜法，同時(shí)測(cè)定復(fù)配農(nóng)藥中吡蟲啉和福美雙的含量。 該法操作快速簡(jiǎn)便，分離效果好，準(zhǔn)確度和精密度高。

一、 實(shí)驗(yàn)部分

1、儀器和試劑

儀器：Aglient 1260 HPLC（紫外檢測(cè)器）；甲醇（色譜純）（默克），蒸餾水，吡蟲啉和福美雙標(biāo)樣（上海市農(nóng)藥研究所提供，含量≥98.5%），吡蟲啉·福美雙懸浮種衣劑。

2、色譜分析條件

色譜柱：XDB-C18 柱；柱溫：35℃；流動(dòng)相：甲醇+水=50：50；流速：1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：260nm；進(jìn)樣體積：5μL；保留時(shí)間：吡蟲啉約4.2min，福美雙約12min。 在上述色譜條件下，吡蟲啉·福美雙懸浮劑的典型高效液相色譜圖見圖1。

3、測(cè)定步驟

（1）標(biāo)樣溶液的配置

分別稱取吡蟲啉標(biāo)樣、福美雙標(biāo)樣各0.05 g(精確至0.00O2 g)置于同一100 mL 容量瓶中，用甲醇溶解定容并搖勻。

（2）試樣溶液的配置

稱取吡蟲啉·福美雙懸浮劑0.2 g (精確至0．00O2 g) 于10O mL 容量瓶中，用甲醇稀釋定容，在超聲波水浴槽中振蕩5min，取出冷卻至室溫并搖勻，用O.25μm 孔徑過(guò)濾器過(guò)濾。

（3）測(cè)定

在上述色譜條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)進(jìn)數(shù)針標(biāo)準(zhǔn)溶液，當(dāng)相鄰2 針的峰面積相對(duì)變化小于1.5%時(shí)，按標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)樣測(cè)定。

1.3.4 計(jì)算

式中：A1-標(biāo)樣溶液中，吡蟲啉（福美雙）峰面積的平均值；

A2-試樣溶液中，吡蟲啉（福美雙）峰面積的平均值；

m1-吡蟲啉（福美雙）標(biāo)樣質(zhì)量,g；

m2-試樣質(zhì)量,g；

P-標(biāo)樣中吡蟲啉（福美雙）質(zhì)量分?jǐn)?shù),%。

二、 結(jié)果討論

1、色譜條件的選擇

檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇：根據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，吡蟲啉、福美雙的最大吸收波長(zhǎng)分別為260nm、254nm， 本法選擇260nm 為檢測(cè)波長(zhǎng)，對(duì)吡蟲啉、福美雙都有理想的吸收。

流動(dòng)相的選擇：選用甲醇、水為流動(dòng)相，按不同比例調(diào)節(jié)，確定甲醇+水=50+50(V/V)的配比，流速在1.O mL/min 的條件下，有效成分與雜質(zhì)能較好分離，峰形對(duì)稱，保留時(shí)間適當(dāng)。

2、方法的線性范圍測(cè)定

分別稱取0.25g（精確到0.002g）吡蟲啉和福美雙標(biāo)樣置于同一100mL 容量瓶中，用甲醇溶解定容并搖勻。分別移取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液2、4、6、8、10、12mL 于6 個(gè)50mL 容量瓶中， 用甲醇稀釋定容并搖勻。 在相同色譜條件下測(cè)定，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制線性關(guān)系曲線，分別如圖2、圖3 所示。 由圖可見，本方法的線性關(guān)系良好。

3、方法精密度實(shí)驗(yàn)

在上述色譜條件下，對(duì)吡蟲啉·福美雙懸浮劑樣品進(jìn)行6 次重復(fù)測(cè)定， 測(cè)得吡蟲啉、 福美雙的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.043 和0.039，變異系數(shù)分別為0.170%、0.387%。 結(jié)果表明本方法的精密度良好。

4、方法準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)

在已知含量的樣品中分別添加適量吡蟲啉、福美雙標(biāo)樣，測(cè)定其回收率，其平均回收率分別為99.77%和99.88%。 結(jié)果表明本方法的準(zhǔn)確度良好。

三、結(jié)論

用本法測(cè)定吡蟲啉和福美雙復(fù)配農(nóng)藥中吡蟲啉和福美雙的含量，具有快速、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，且重現(xiàn)性、穩(wěn)定性、分離效果均能滿足產(chǎn)品的檢驗(yàn)要求，是較為理想的分析方法。

[1] 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn).GB 28126-2011.吡蟲啉原藥.

[2] 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn).HG 3757-2004.福美雙原藥.

[3] 陳丹，初麗偉，范志先．福美雙混劑HPLC 分析方法的研究[J] .吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，21(3)：101-1O3．