721型分光光度計(jì)使用方法及注意事項(xiàng)

武開業(yè)

（榆林市環(huán)境監(jiān)測(cè)總站，陜西 榆林 719000）

1 721分光光度計(jì)的使用方法

1）在接通電源之前，電表的指針必須位于“0”刻度線，否則應(yīng)旋轉(zhuǎn)電表上的校正螺絲調(diào)節(jié)到位。

2）打開比色皿室的箱蓋和電源開關(guān)，使光電管在無光照射的情況下預(yù)熱15min以上。

3）旋轉(zhuǎn)波長(zhǎng)調(diào)節(jié)器，選擇測(cè)定所需的單色光波長(zhǎng)。選擇適當(dāng)?shù)撵`敏度，一般先將靈敏度旋鈕調(diào)至中間位置，用零點(diǎn)調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)電表指針至T值為10%處。若不能調(diào)到，應(yīng)適當(dāng)增加靈敏度。

4）放入空白溶液和待測(cè)溶液，使空白溶液置于光路中，蓋上比色皿室箱蓋，使光電管受光，調(diào)節(jié)光量調(diào)節(jié)旋鈕使電表在T值為100%處。

5）打開比色皿室箱蓋（關(guān)閉光門），調(diào)節(jié)零點(diǎn)調(diào)節(jié)器使指針在T值為0%處，然后蓋上箱蓋（打開光門），調(diào)節(jié)光量調(diào)節(jié)旋鈕使指針在T值為100%處。如此反復(fù)調(diào)節(jié)，直到關(guān)閉光門時(shí)和打開光門時(shí)指針分別在T值為0%和100%處為止。

6）將待測(cè)溶液置于光路中，蓋上箱蓋，由此時(shí)指針的位置讀得待測(cè)溶液的T值或A值。

7）測(cè)量完畢后，關(guān)閉開關(guān)，取下電源插頭，取出比色皿洗凈擦干、放好。蓋好比色皿暗箱，蓋好儀器。

2 721分光光度計(jì)的使用注意事項(xiàng)

1）使用比色皿，只能拿毛玻璃的兩面，并且必須用擦鏡紙擦干透光面，以保護(hù)透光面不受損壞或產(chǎn)生斑痕。在用比色皿裝液前必須用所裝溶液沖洗3次，以免改變?nèi)芤旱臐舛?。比色皿在放入比色架時(shí)，應(yīng)盡量使它們的前后位置一致，以減少測(cè)量誤差。

2）需要大幅度改變波長(zhǎng)時(shí)，在調(diào)整T值為0%和100%之后，應(yīng)稍等片刻（因鎢絲燈在急劇改變亮度后，需要一段熱平衡時(shí)間），待指針穩(wěn)定后再調(diào)整T值為0%和100%。

3）當(dāng)被測(cè)溶液濃度太大時(shí)，可在空白溶液處加一塊中性濾光片（所謂中性是指它們?cè)诤軐挼牟ㄩL(zhǎng)范圍內(nèi)的透光率基本相同），其A值有0.5、1和1.5三種。所謂A值為1是標(biāo)稱值，實(shí)際在1左右，須經(jīng)使用的儀器在實(shí)際使用的波長(zhǎng)下測(cè)定其實(shí)際數(shù)值，例如∶測(cè)得吸光片的實(shí)際數(shù)值為0.95，在空白溶液處加此吸光片后，被測(cè)溶液在電表上的讀數(shù)為0.74，則該溶液的實(shí)際值為∶0.74+0.95=1.69

4）根據(jù)溶液的含量大小選擇不同光程長(zhǎng)度的比色皿，使電表讀數(shù)A值在0.1～1之間，這樣可以得到較高的準(zhǔn)確度。

5）為確保儀器工作穩(wěn)定，在電源電壓波動(dòng)較大的地方，應(yīng)加一個(gè)穩(wěn)定電源。同時(shí)儀器應(yīng)保持接地良好。

6）在儀器的底部有兩只干燥劑筒，應(yīng)經(jīng)常檢查。發(fā)現(xiàn)干燥劑失效時(shí)，應(yīng)立即更換或烘干后再用。比色皿暗箱內(nèi)的硅膠也應(yīng)定期取出烘干后再放回原處。

7）為了避免儀器積灰和沾污，在停止工作時(shí)，應(yīng)用罩子罩住儀器。儀器在工作幾個(gè)月或經(jīng)搬動(dòng)后，要檢查波長(zhǎng)的準(zhǔn)確性，以確保儀器的正常使用和測(cè)定結(jié)果的可靠性。

3 721分光光度計(jì)的校正方法

波長(zhǎng)讀數(shù)校正的方法很多，例如：（1）可用波長(zhǎng)精度很高的干涉濾光片；（2）已知吸收峰（λ最大）波長(zhǎng)的有色物質(zhì)的溶液等做標(biāo)準(zhǔn)來校正。前一種方法需要特殊的設(shè)備，其精確度較高；后一種方法簡(jiǎn)易可行，精確度較差，但對(duì)721型分光光度計(jì)來說，這種方法已能夠滿足要求。

配制一已知λ最大的物質(zhì)的適當(dāng)濃度的溶液，用待校正的儀器在該物質(zhì)的λ最大±20nm范圍內(nèi)，用不同的波長(zhǎng)測(cè)定其A值?？蓮男∮谠撚猩芤旱摩俗畲蠹s20nm處開始，每隔2nm測(cè)定一次，至波長(zhǎng)大于該溶液λ最大的約20nm為止。例如用高錳酸鉀溶液來校正，其λ最大為525nm。故在505至545nm之間，每隔2nm測(cè)定一次吸光度。將測(cè)定結(jié)果作吸收曲線，所得曲線有一吸收峰（若未所得曲線未呈現(xiàn)吸收峰，則表示此儀器波長(zhǎng)讀數(shù)偏差大于20nm，應(yīng)擴(kuò)大測(cè)定的波長(zhǎng)范圍），設(shè)此吸收峰的波長(zhǎng)為λ′最大，將它與已知的λ最大比較，其差即為波長(zhǎng)校正值，以λ校表示：

若波長(zhǎng)校正值λ校很大，則需要重新調(diào)整勵(lì)光燈泡，或檢修單色器的光學(xué)系統(tǒng)。若波長(zhǎng)校正值小于10nm，則可在使用該儀器時(shí)，用校正值來校正波長(zhǎng)。當(dāng)λ校為正值時(shí)，表示該儀器的波長(zhǎng)讀數(shù)較真實(shí)的波長(zhǎng)偏高。因此在使用該儀器時(shí)，若測(cè)定某一溶液時(shí)所需選定的波長(zhǎng)為λ測(cè)，那么應(yīng)調(diào)至的波長(zhǎng)讀數(shù)（λ讀）則為∶

例如用高錳酸鉀溶液（其λ最大為525nm）校正一儀器，測(cè)得其吸收峰λ′最大為530nm，則：

用該儀器測(cè)定鄰菲羅啉鐵時(shí)，應(yīng)選用的波長(zhǎng)為510nm，其波長(zhǎng)讀數(shù)標(biāo)尺應(yīng)旋至λ讀：λ 讀＝λ 測(cè)-λ 校＝510nm-（-5nm）＝515nm

即波長(zhǎng)讀數(shù)應(yīng)調(diào)至515nm，而此時(shí)真實(shí)的波長(zhǎng)為510nm，即鄰菲羅啉鐵的λ最大。

4 小結(jié)

721分光光度計(jì)使用方便，能耗低，穩(wěn)定性好，便于調(diào)校，準(zhǔn)確度比較高，使用范圍比較寬，所以仍將在分析化驗(yàn)領(lǐng)域內(nèi)發(fā)揮重要的作用。