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    新疆部分規(guī)?;i場豬病毒性腹瀉流行病學調(diào)查與防控

    2013-11-22 07:46:42杜久斌范紅燕劉宏杰蘇曉月沈亞安張會萍
    豬業(yè)科學 2013年8期
    關鍵詞:病料流行病學規(guī)?;?/a>

    王 元,杜久斌,范紅燕,賀 筍,劉宏杰*,蘇曉月,沈亞安,張會萍

    (1.新疆天康食品養(yǎng)殖事業(yè)部技術(shù)中心,新疆 昌吉 831100;2.巴音郭楞職業(yè)技術(shù)學院,新疆 庫爾勒 841000;3.瑪納斯縣蘭州灣獸醫(yī)站,新疆 瑪納斯 832201)

    豬病毒性腹瀉是由病毒引起的急性消化道傳染病,該病主要由豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)、豬流行性腹瀉病毒(PEDV)、豬輪狀病毒(RV)等單一或混合感染[1-2]。目前,有報道稱庫伯病毒(Kubovirus)也可感染導致類似臨床癥狀[3-4]。2011 年11 月—2012 年12 月,新疆部分規(guī)?;i場10 日齡以內(nèi)仔豬發(fā)生以急性腹瀉為主要病癥的傳染病,傳播迅速,發(fā)病率高,造成了較嚴重的經(jīng)濟損失。為查明發(fā)生該病的流行情況,并制定快速、有效的防控措施控制疫情,我們對新疆部分規(guī)模化豬場進行了該病的流行病學和病原學調(diào)查。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 調(diào)查豬場

    新疆南疆 4 個發(fā)病豬場,北疆 6 個發(fā)病豬場。

    1.1.2 病料采集與處理

    共采集259 份腸及內(nèi)容物和糞便樣品。取1 mL 小腸研磨上清液或腹瀉糞便上清液樣品置1.5 mL 離心管中,8 000 r/min 離 心2 min , 吸 取 上 清 放置-20 ℃保存。

    1.1.3 引物

    根據(jù)GeneBank 上公布的TGEV、PEDV、RV、 Kubovirus 序 列, 應 用Primer5.0 軟件設計了4 對特異性引物,其目的基因分別為548 bp 、1 592 bp、314 bp、967 bp,均由上海生工生物工程有限公司合成。

    1.1.4 試劑

    Totoal RNA 提取盒購自大連寶生物Mini Viral RNA/DNA Extraction Kit,Taq 酶、dNTP Mixture、AMV逆轉(zhuǎn)錄酶、RNase Inhibitor 及DNA 標準DL 2000 購自寶生物(大連)工程有限公司。

    1.2 方法

    1.2.1 流行病學調(diào)查

    對調(diào)查豬場的豬病毒性腹瀉流行情況進行了現(xiàn)場調(diào)查,臨床病例檢查及病理剖檢。

    1.2.2 實驗室檢測

    10 家調(diào)查豬場送檢的259 份臨床病料分別進行了TGEV、 PEDV、RV、 Kubovirus 的RT-PCR 檢測。

    1.2.3 動物試驗

    取6 頭未吃初乳仔豬,試驗組4 頭口服4 mL 病料上清液,對照組2 頭口服生理鹽水。觀察仔豬的臨床癥狀,連續(xù)觀察3 d。

    2 結(jié)果

    2.1 豬病毒性腹瀉流行病學調(diào)查

    本病主要發(fā)生于規(guī)模化豬場,無明顯季節(jié)性,發(fā)病豬多為10 日齡以內(nèi),表現(xiàn)嘔吐、水樣腹瀉、病程持續(xù)1~3 d,發(fā)病豬最終嚴重脫水死亡(見圖1)。剖檢癥狀為胃內(nèi)積聚大量白色乳糜,小腸腸壁變薄、充血,其他臟器未發(fā)現(xiàn)明顯病理變化(見圖2)。

    圖1 仔豬嘔吐、腹瀉物

    圖2 腸絨毛脫落,腸壁變薄,腸出血

    2.2 實驗室檢測結(jié)果

    RT-PCR檢測259份臨床病料,檢出PEDV 陽性163 份,Kubovirus 陽性97 份,PEDV 、Kubovirus 混 合 感染96 份。

    2.3 動物試驗

    攻毒后24 h 出現(xiàn)腹瀉、嘔吐等典型臨床癥狀,持續(xù)48~72 h 后4 頭試驗仔豬全部脫水死亡,2 頭對照仔豬均未出現(xiàn)上述癥狀。

    3 討論

    通過對南北疆10 家規(guī)模化豬場流行病學調(diào)查、臨床癥狀觀察以及臨床病理剖檢,初步診斷發(fā)病豬是病毒性腹瀉。后經(jīng)實驗室對病料的檢測,送檢的259份臨床病料中有163 份PEDV 陽性,17份Kubovirus 陽性;TGEV 、RV 均為陰性。PEDV 陽性場有6 個,Kubo 病毒陽性場2 個。結(jié)果表明,此次引起新疆部分規(guī)?;i場10 日齡以內(nèi)仔豬腹瀉脫水死亡的主要致病因是PEDV 和Kubovirus,未檢出TGE、RV。

    在免疫程序的調(diào)查中,發(fā)現(xiàn)受調(diào)查豬場均免疫了傳染性胃腸炎和流行性腹瀉二聯(lián)滅活苗,但對此次病毒性腹瀉感染幾乎不能有效預防。分析原因,主要有:1)通過實驗室檢測已經(jīng)證實主要由PEDV 和Kubovirus 混合感染引起發(fā)病,而商品化疫苗不能保護Kubovirus的感染;2)已有國內(nèi)文獻報道[5]稱我國PEDV 發(fā)生了變異,與商品疫苗中傳統(tǒng)PEDV 毒株存在抗原差異,不能保護目前流行毒株,因此造成該病的暴發(fā)。

    通過對發(fā)病全過程的跟蹤調(diào)查,此次腹瀉疫情呈階段性流行,一波流行結(jié)束2~3 個月后又會暴發(fā),呈持續(xù)流行。原因有:1)規(guī)?;i場不斷產(chǎn)仔,病毒持續(xù)感染,造成了腹瀉的持續(xù)流行。2)發(fā)過病的基礎母豬經(jīng)過一個生產(chǎn)周期或一段時間(主要取決于場內(nèi)腹瀉病毒載量),自然感染產(chǎn)生的抗體會慢慢降低,當不能抵抗腹瀉病毒的感染時,新一輪的腹瀉又開始流行。

    綜上所述,提出以下防控措施:1)對發(fā)病場的產(chǎn)房進行封閉隔離管理;未發(fā)病豬場要嚴格執(zhí)行生物安全制度,并控制人員和運輸車輛的隨意進出[6]。2)加強飼養(yǎng)管理,控制圈舍溫度和保持圈舍衛(wèi)生和干燥,不給病毒創(chuàng)造利于生存和繁殖的條件;3)有條件的規(guī)模豬場可免疫滅活自家苗,使哺乳母豬的腹瀉病毒抗體能夠保護至仔豬斷奶;4)對發(fā)病仔豬進行補液鹽口服,并預防繼發(fā)大腸桿菌感染引起細菌性腹瀉;5)避免給母豬飼喂發(fā)霉飼料,防止霉菌毒素中毒;6)徹底清洗、消毒空圈舍,并留一定的時間使圈舍徹底干燥;7)母豬上產(chǎn)床前進行適當?shù)那逑?,尤其蹄部糞便要清洗干凈。

    [1] 林初文,莊金秋,謝印乾.我國主要豬病毒性腹瀉疾病的特點及其防治對策[J].中國畜牧獸醫(yī),2007,34(5):121-123.

    [2] 和平,田建云,周宏生,等.豬病毒性腹瀉病的防治措施[J].云南畜牧獸醫(yī),2007(4):9-10.

    [3] 沈素芳,湯賽冬,孫泉云.豬Kobu 病毒感染概況[J].動物醫(yī)學進展, 2012,33(1):115-116.

    [4] 楊德全,葛菲菲,鞠厚斌. 嵴病毒(Kobuvirus)研究進展[J].中國預防獸醫(yī)學報,2012(12): 1006-1009.

    [5] 劉孝珍,陳建飛,時洪艷,等.2011 年豬流行性腹瀉病毒的遺傳變異分析[J]. 中國預防獸醫(yī)學報 2012,34(3):180-183.

    [6] 衛(wèi)秀余.關于“豬流行性腹瀉”的一些認識誤區(qū)[J].豬業(yè)科學 2012,(4):132.

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