彌漫性浸潤型星形細胞瘤中單絲氨酸蛋白激酶1、基質(zhì)金屬蛋白酶-14和血管內(nèi)皮生長因子的表達及意義

宋 軍 王穎翠 謝宗凱 (即墨市人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)二科，山東 即墨 266200)

彌漫性浸潤型星形細胞瘤病變進展中常出現(xiàn)蛋白的表達異常，對促進病變有重要價值。單絲氨酸蛋白激酶(LIMK)1、基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-14在腫瘤中高表達參與腫瘤的進展〔1～3〕，而血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)通過促進腫瘤血管的新生進而促進腫瘤的發(fā)展〔4〕。本實驗分析彌漫性浸潤型星形細胞瘤術(shù)后組織中LIMK1、MMP-14和VEGF蛋白的表達及意義。

1 材料與方法

1.1 一般資料 2009年1月至2012年12月我院確診為彌漫性浸潤型星形細胞瘤的患者95例作為觀察組，術(shù)后立即取材，并置于中性甲醛溶液中固定。切片均由病理醫(yī)師閱片，分型及分級均符合WHO中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。男50例，女45例，年齡57～79(平均67.2)歲。分級:Ⅰ級22例，Ⅱ級26例，Ⅲ級28例，Ⅳ級19例。收集非腫瘤病變切除的正常的腦組織60例作為對照組，取材和固定方法同上，其中男30例，女30例，年齡56～78(平均67.9)歲。

1.2 LIMK1、MMP-14和VEGF的檢測 應(yīng)用免疫組化SP法檢測，應(yīng)用DAB染色，按試劑說明進行操作，嚴(yán)格質(zhì)量控制。

1.3 結(jié)果評價 LIMK1陽性部位為細胞質(zhì)和(或)細胞膜，MMP-14和VEGF陽性部位為細胞質(zhì)。計數(shù)5個陽性細胞集中的區(qū)域，取平均值。以陽性細胞≥25%為陽性，以陽性細胞＜10%為陰性，計算陽性率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SAS6.12軟件進行χ2檢驗、線性相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 兩組中LIMK1、MMP-14和VEGF蛋白表達的比較 觀察組中LIMK1、MMP-14和VEGF表達的陽性率明顯高于對照組(P ＜0.000 1)，見表1。

表1 兩組LIMK1、MMP-14和VEGF蛋白陽性表達的比較〔n(%)〕

2.2 觀察組中LIMK1、MMP-14和VEGF在不同臨床病理特征中的表達 觀察組中LIMK1、MMP-14和VEGF的表達與腫瘤最大直徑、分級、有無壞死及Ki67的表達密切相關(guān)(P＜0.05)，見表2。

2.3 觀察組中LIMK1、MMP-14和VEGF表達陽性率的相關(guān)性觀察組中 LIMK1和 VEGF(r=0.46，P=0.029 1)、MMP-14和VEGF(r=0.43，P=0.021 7)的表達均具有正相關(guān)性。

表2 觀察組中LIMK1、MMP-14和VEGF表達的陽性率與臨床病理特征的關(guān)系〔n(%)〕

3 討論

VEGF在腫瘤形成過程中對基質(zhì)血管的生成作用強，在VEGF高表達和分泌的情況下，一是通過腫瘤周圍正常的腦組織中的毛細血管出芽形成，另一種是通過平滑肌細胞/血管周細胞增生和聚集進行血管重塑〔5〕。MMP-14是MMPs中的經(jīng)典成員，降解細胞外基質(zhì)是其主要作用，但是近年來學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)MMP-14可以有效地促進血管生成，尤其是對VEGF介導(dǎo)的血管生成作用〔6〕。LIMK1在發(fā)揮作用時可以產(chǎn)生兩種信使RNA:一種編碼全長LIMK1蛋白、另一種因刪除61個堿基而使編碼蛋白缺乏羥基末端激酶域的蛋白，此時通過作用于C末端的激酶結(jié)構(gòu)域而負性調(diào)節(jié)激酶活性，同時介導(dǎo)蛋白質(zhì)的相互作用，參與決定細胞生長調(diào)節(jié)及細胞骨架的重組等〔7～9〕。也有學(xué)者認為當(dāng)LIMK1活化后，抑制了纖絲狀肌動蛋白的聚合，使肌動蛋白的穩(wěn)定性受到了影響，此時對細胞運動、分裂均有促進作用。賀曉燕等〔10，11〕認為LIMK-1的高表達與腫瘤的微脈管生成相關(guān)。本實驗結(jié)果提示LIMK1、MMP-14和VEGF在腫瘤發(fā)生中發(fā)揮重要促進作用。3種蛋白參與腫瘤的生長、增殖及浸潤。由于分級、壞死及增殖均是判斷腫瘤生物學(xué)行為、預(yù)后及病理診斷的依據(jù)，因此3種蛋白的表達不僅可以判斷腫瘤的生物學(xué)行為和預(yù)后，也可以為病理診斷提供客觀指標(biāo)。由于Ki67具有有效標(biāo)記細胞增殖的特點，也提示 LIMK1、MMP-14和VEGF對細胞增殖有重要促進作用。相關(guān)性分析顯示觀察組中LIMK1和MMP-14均與VEGF有相關(guān)性，提示LIMK1和MMP-14高表達時可以促進VEGF表達，也提示LIMK1和MMP-14對血管生成的作用是通過調(diào)節(jié)VEGF高表達實現(xiàn)的〔12，13〕。同時LIMK1和MMP-14可以促進細胞肌動蛋白絲聚合，使腫瘤細胞具有更強的周圍組織浸潤的能力。

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