黃珮,朱 靜
(江蘇省南京市紅十字醫(yī)院內(nèi)科,江蘇南京,210001)
高血壓患者出現(xiàn)心腦血管并發(fā)癥主要與動脈粥樣硬化病變有關(guān),而動脈粥樣硬化的發(fā)生是高血壓、糖脂代謝異常、炎癥反應(yīng)及內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙等多種因素共同作用的結(jié)果。內(nèi)皮功能障礙的一個重要特征是內(nèi)皮源性氧化亞氮(NO)合成、釋放和活性受到限制,其不僅出現(xiàn)在動脈硬化早期,而且在心腦血管疾病發(fā)展中發(fā)揮重要作用[1]。NO是調(diào)節(jié)許多生理過程的重要信息,內(nèi)皮型氧化亞氮合成酶(eNOS)通過調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞NO產(chǎn)生而調(diào)節(jié)血流、炎癥和血小板聚集[2]。內(nèi)皮功能失常時,NO紊亂可降低血小板穩(wěn)定性,導(dǎo)致動脈粥樣硬化形成。他汀類藥物防治心血管疾病的作用可能與其改善血管內(nèi)皮功能有關(guān)[3]。有資料[4]顯示,他汀類藥物可增加eNOS基因表達(dá),從而引起NO含量增加,血管舒張,改善內(nèi)皮功能。本研究主要探討了瑞舒伐他汀對高血壓合并動脈粥樣硬化患者內(nèi)皮功能及eNOS基因表達(dá)的影響,現(xiàn)報告如下。
選取2012年3月—2013年3月本院收治的經(jīng)頸部彩色多普勒檢查有頸動脈粥樣斑塊的原發(fā)性高血壓患者50例作為研究組,其中男29例,女21例,年齡41~70歲,平均(57±7)歲。同時選取無頸動脈粥樣斑塊的原發(fā)性高血壓患者25例作為對照組,其中男13例,女12例,年齡 42~69歲,平均(53±6)歲。所有患者血壓均得到有效控制(收縮壓≤140 mmHg,舒張壓≤90 mmHg),排除繼發(fā)性高血壓、嚴(yán)重肝腎疾病、并發(fā)感染、近2月內(nèi)腦卒中、近3月內(nèi)急性冠脈綜合征史,以及近期使用他汀類藥物或已知過敏者。2組患者年齡、性別、血壓及使用的降壓方案無顯著差異(P>0.05),具有可比性。
所有患者維持原有降壓方案不變,研究組予以瑞舒伐他汀10 mg,口服,1次/d,治療12周。治療前和治療后12周后分別行彩色多普勒超聲、血管內(nèi)皮功能超聲、血清學(xué)檢查及eNOS mRNA檢測。
頸動脈超聲檢測:采用西門子Antares彩色多普勒超聲診斷儀,探頭頻率7.5~10.0 MHz。頸總動脈內(nèi)膜中層厚度(IMT)測量:患者取仰臥位,縱向超聲顯像可表現(xiàn)為由相對較低回聲分隔的2條平行亮線,2線間垂直距離即IMT,凍結(jié)頸動脈竇以下1 cm圖像,測量3次IMT,取3次測量值的平均值為頸總動脈IMT厚度值;頸動脈斑塊積分計算:斑塊為局限性回聲結(jié)構(gòu)突出管腔,厚度≥1.3 mm,采用Crouse方法計算,不考慮各個斑塊的長度,而分別將兩側(cè)頸總動脈(CCA)、頸內(nèi)動脈(ICA)、頸外動脈(ECA)各孤立的動脈粥樣硬化斑塊的最大厚度相加,即為頸動脈斑塊積分。
血管內(nèi)皮功能超聲檢測:患者取仰臥位,右上肢外展15°,在肘窩上2~5 cm行肱動脈二維超聲顯像,取直縱切面,在舒張末期測肱動脈內(nèi)徑,取3個心動周期的平均值為基礎(chǔ)肱動脈內(nèi)徑(D0)。之后,將血壓計袖帶置于肱動脈遠(yuǎn)端,充氣加壓至250~300 mmHg,保持5 min,迅速將袖帶放氣,在放氣后60~90 s內(nèi)測肱動脈最大內(nèi)徑,以加壓前后肱動脈內(nèi)徑的變化率作為評價內(nèi)皮依賴性血管舒張功能(FMD)的指標(biāo),△D1%=(D1-D0)/D0×%[5]。上述檢查后休息15 min,待血管內(nèi)徑恢復(fù)試驗前狀態(tài),舌下含化硝酸甘油0.5 mg,4 min后重新測定肱動脈內(nèi)徑,以含化硝酸甘油前后肱動脈內(nèi)徑變化率作為評價非內(nèi)皮依賴性血管舒張功能(NMD)的指標(biāo),△D2%=(D2-D0)/D0×%。整個試驗過程中,超聲探頭始終處于固定位置不變。
血清學(xué)檢查:所有患者均在行彩色多普勒超聲檢查當(dāng)天清晨取空腹血6 mL送檢。其中3 mL查超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、血清甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDLC)、高密度脂蛋白(HDL-C),3 mL放于室溫下3000r/min,離心25min,分離血清置-70°冰箱內(nèi),測定超氧化物歧化酶(SOD)和NO水平。
eNOS mRNA檢測:采用半定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法,抽取全血1 mL,使用RNA提取盒提取總RNA,反轉(zhuǎn)錄cDNA。PCR擴(kuò)增,產(chǎn)物于2%瓊脂糖凝膠電泳,電泳圖數(shù)據(jù)由密度測量。
治療前,研究組IMT、hs-CRP水平顯著高于對照組,而SOD、FMD及NO顯著低于對照組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),見表1。
表1 2組治療前彩色多普勒超聲和血清學(xué)檢查結(jié)果比較()
表1 2組治療前彩色多普勒超聲和血清學(xué)檢查結(jié)果比較()
與治療前比較,**P<0.01。
組別 研究組(n=50) 對照組(n=25)TG/(mmol/L) 2.60±0.91 2.59±0.69 TC/(mmol/L) 5.82±2.40 5.63±2.15 LDL-C/(mmol/L) 3.62±1.90 3.46±1.70 HDL-C/(mmol/L) 0.95±0.41 1.01±0.42 SOD/(mmol/L) 65.80±2.72** 103.50±5.30 IMT/(mmol/L) 1.36±0.41** 0.62±0.42 FMD/% 7.50±1.80** 9.50±2.10 NMD/% 11.00±2.20 11.00±2.10 NO/(mmol/L) 32.10±6.20** 80.70±3.50 hs-CRP/(mg/L) 5.88±1.72** 2.41±1.34
研究組治療后頸動脈IMT和斑塊積分較治療前明顯縮小,FMD改善,SOD、NO升高,以及hs-CRP、TG、TC及LDL-C明顯降低,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),見表2。
治療前,研究組FMD與心血管危險因素相關(guān)性分析顯示,FMD與SOD(r=0.55,P=0.007)、NO(r=0.73,P=0.01)成正相關(guān),與IMT(r=-0.53,P=0.000)、hs-CRP(r=-0.45,P=0.044)、收縮壓(SBP)(r=-0.36,P=0.023)、TC(r=-0.29,P=0.031)成負(fù)相關(guān)。
治療前,研究組與對照組eNOS/磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)灰度值分別為(0.64±0.08)和(0.87±0.05)。治療后,研究組eNOS/GAPDH灰度值較治療前明顯下降(P<0.01)。
表2 研究組治療前后頸動脈硬化指標(biāo)、FMD及相關(guān)血清學(xué)指標(biāo)比較()(n=50)
表2 研究組治療前后頸動脈硬化指標(biāo)、FMD及相關(guān)血清學(xué)指標(biāo)比較()(n=50)
與對照組比較,**P<0.01。
時間 治療前 治療后IMT/mm 1.36±0.41 1.13±0.32**斑塊積分/mm 6.85±0.60 4.66±0.61**FMD/% 7.50±1.80 10.40±2.50**NMD/% 11.00±2.20 11.30±2.20 hs-CRP/(mg/L) 5.88±1.72 3.02±1.40**TG/(mmol/L) 2.60±0.91 1.65±0.70**TC/(mmol/L) 5.82±2.40 4.04±1.42**LDL-C/(mmol/L) 3.62±1.90 2.37±1.12**HDL-C/(mmol/L) 0.95±0.41 1.02±0.43 NO/(mmol/L) 32.10±6.20 41.60±3.30**SOD/(mmol/L) 65.80±2.72 84.10±1.20**
原發(fā)性高血壓是一種常見病、多發(fā)病。近年來研究[6-7]認(rèn)為,高血壓是內(nèi)皮損傷的始動因素之一,可加重血管內(nèi)皮功能障礙,而血管內(nèi)皮功能障礙所致的內(nèi)皮素/NO失衡又對其發(fā)生、發(fā)展起重要作用。此外,由于眾多危險因子損傷內(nèi)皮而發(fā)生的一系列炎癥反應(yīng),也可能是動脈粥樣硬化形成的始動因素。本研究結(jié)果顯示,合并頸動脈粥樣硬化的高血壓患者內(nèi)皮依賴性FMD更差,FMD、SOD及NO水平降低,而代表炎癥反應(yīng)的hs-CRP顯著增高。汪莉等[8]研究顯示,FMD與收縮壓、IMT、TC呈負(fù)相關(guān),與本研究結(jié)果一致。此外,本研究還表明,FMD與hs-CRP呈負(fù)相關(guān),與Sinisalo等[9]研究結(jié)果一致,這可能與后者患者在入組前長期服用保護(hù)內(nèi)皮功能的藥物有關(guān)。內(nèi)皮及內(nèi)皮功能對維持血管穩(wěn)定性、保持血管緊張度、防止血栓形成具有重要的作用;內(nèi)皮細(xì)胞損傷和內(nèi)皮細(xì)胞通透性增加使血液中的脂質(zhì)易于沉積在內(nèi)膜,引起巨噬細(xì)胞的清除反應(yīng)和中膜平滑肌細(xì)胞的增生,形成粥樣斑塊。SOD是體內(nèi)重要的血管抗氧化系統(tǒng),能減少血管氧化應(yīng)激,同時也能通過NO通道改善內(nèi)皮依賴性血管擴(kuò)張[10]。eNOS可通過內(nèi)皮細(xì)胞NO生成來調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞功能,在內(nèi)皮細(xì)胞、全血細(xì)胞CD34+單核細(xì)胞等都有表達(dá)。
他汀類藥物對內(nèi)皮功能的改善與其升高SOD,增加eNOS mRNA表達(dá)有關(guān),其可升高eNOS蛋白,改善eNOS酶活性[11]。瑞舒伐他汀能除了能調(diào)節(jié)血脂水平外,還可以使SOD升高,eNOS mRNA表達(dá)增強(qiáng),介導(dǎo)上調(diào)eNOS蛋白水平[12],從而引起NO增加,血管舒張,改善血管內(nèi)皮功能。目前,FMD等指標(biāo)是檢測內(nèi)皮功能穩(wěn)定性和重復(fù)性最好的指標(biāo),本研究通過檢測缺血eNOS mRNA表達(dá)水平評估患者的內(nèi)皮功能,結(jié)果顯示,高血壓合并動脈粥樣硬化患者經(jīng)瑞舒伐他汀治療后SOD升高,eNOS mRNA表達(dá)明顯增強(qiáng),引起eNOS蛋白水平增加,從而引起NO含量增加,進(jìn)而改善內(nèi)皮功能;同時還能明顯改善血脂水平,且具有穩(wěn)定動脈粥樣硬化斑塊、抑制細(xì)胞增殖、抗炎等非調(diào)脂作用。最近一項研究[13]表明,瑞舒伐他汀能夠改善高血壓患者內(nèi)皮依賴性FMD。Sinisalo等[14]研究首次采用血管內(nèi)超聲評價他汀類藥物對冠狀動脈斑塊的影響,結(jié)果證實經(jīng)他汀類藥物治療后,冠狀動脈內(nèi)斑塊出現(xiàn)了消退。本文結(jié)果也證實,高血壓合并頸動脈斑塊患者經(jīng)瑞舒伐他汀治療12周,不僅血脂水平降低,而且SOD升高,eNOS mRNA表達(dá)明顯增強(qiáng),NO水平升高,血管內(nèi)皮功能改善,IMT和斑塊積分減少。
綜上所述,合并動脈粥樣硬化的高血壓患者內(nèi)皮功能障礙較重,且內(nèi)皮功能與多種心血管危險因素相關(guān),瑞舒伐他汀可通過增強(qiáng)eNOS基因表達(dá)來改善內(nèi)皮功能,穩(wěn)定動脈斑塊。
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