遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)對腦缺血/再灌注損傷保護(hù)作用的研究

張 營 趙海蘋 吉訓(xùn)明 高素琴 羅玉敏*

(1.首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院腦血管病研究室，北京100053;2.首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院神經(jīng)外科，北京100053;3.濟(jì)鋼醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，濟(jì)南250101)

腦血管病具有高發(fā)病率、高致殘率、高病死率、高復(fù)發(fā)率的特點(diǎn)，其中缺血性腦血管病的發(fā)病占45.5% ～75.9%［1］。缺血預(yù)適應(yīng)和后適應(yīng)現(xiàn)象均被認(rèn)為是機(jī)體缺血事件中強(qiáng)有力的內(nèi)源性保護(hù)方法。1986年，Murry等［2］研究發(fā)現(xiàn)犬心臟在短暫冠狀動脈(以下簡稱冠脈)結(jié)扎后，能顯著減少隨后較長時(shí)間缺血所引起的高能磷酸化合物耗竭和心肌的梗死，首次提出了“缺血預(yù)適應(yīng)”(ischemic preconditioning，IPC)的概念，其最初定義為“一種短暫缺血后誘導(dǎo)的快速適應(yīng)性反應(yīng)，能減少隨后較長時(shí)間缺血引起的細(xì)胞壞死”。但是由于缺血事件的不可預(yù)見性，限制了IPC的臨床應(yīng)用。2003年，Zhao等［3］利用犬的心臟缺血模型，于缺血再灌注開始時(shí)，直接給予缺血心臟連續(xù)3次30 s再灌注和30 s缺血，發(fā)現(xiàn)同IPC一樣，可以減輕缺血再灌注損傷，并提出了缺血后適應(yīng)(ischemic postconditioning，IPostC)的概念，即在再灌注早期，重復(fù)給予幾次短暫的、非致命性缺血與再通，可以明顯減輕再灌注損傷。IPostC可以應(yīng)用于缺血事件發(fā)生之后，但是由于其實(shí)施必須直接作用于發(fā)生缺血的重要器官，臨床不適用于對缺血極其敏感的器官，如心臟、腦缺血等。

Kerendi等［4］利用小鼠的心肌缺血模型，于缺血后再灌注前對腎動脈進(jìn)行單次5 min的閉塞和再通，發(fā)現(xiàn)可以顯著地減輕心肌的缺血再灌注損傷。首次觀察到了遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)(remote ischemic post-conditioning，RIPostC)的現(xiàn)象，由此提出了“遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)”的概念，即器官發(fā)生缺血后，對遠(yuǎn)隔器官進(jìn)行短暫的、非致死性缺血和再灌注，可以減輕器官的缺血再灌注損傷。對非生命重要器官實(shí)施RIPostC，來保護(hù)已經(jīng)發(fā)生缺血的生命重要器官，避免了對心、腦等生命重要器官直接實(shí)施缺血保護(hù)帶來的高風(fēng)險(xiǎn)，此種方法對于臨床應(yīng)用具有重要意義，臨床應(yīng)用前景廣闊。

本實(shí)驗(yàn)的目的就是研究在大鼠腦缺血即刻給予的RIPostC 對缺血后8、24 h 和3、7、14、30 d 腦梗死體積及神經(jīng)功能的影響。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物

SD雄性大鼠104只，體質(zhì)量280～310 g，清潔級，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司提供，實(shí)驗(yàn)動物許可證號:SCXK(京)2008-0001。術(shù)前禁食，但自由進(jìn)水12 h。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

小動物呼吸機(jī)(Harvard Apparatus 683)、雙極電凝(德威，ACC100，北京天業(yè)愛博科貿(mào)有限公司)、顯微鏡(Carl Zeiss)、腦血流監(jiān)測儀(Perimed，PF5001)、反饋式溫度調(diào)節(jié)儀(Harvard Apparatus)、血?dú)夥治鰞x(美國，Abbott，i-STAT)、有創(chuàng)血壓監(jiān)測儀(Biopac DA100C)、牙科鉆(Saeshin Strong207)，精密電子天平(Adventurer)、Image-Pro Plus計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)(美國，Larser Sharp)、數(shù)碼相機(jī)(蘇州富士膠片映象機(jī)器有限公司)、大鼠手術(shù)操作臺、顯微手術(shù)器械，線栓(北京科海軍舟生物科技發(fā)展中心)、免疫熒光顯微鏡(Nikon Digital Imaging Hero Eclipse 80i)、－80 ℃低溫冰箱(Forma-86c)、超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)(Scientz-ⅡD)、離心機(jī)(Beckman Coulter)、酶標(biāo)儀(Thermo Multiskan Mk3)、膠片(Kodak X-OMAT，USA)PVDF 膜(BioTrace，Pall Corporation，USA)、AlphaEaseFC 軟件(美國 Alpha Innotech公司)、德國 Siemens 3.0T(Verio Syngo B15)超導(dǎo)磁共振成像系統(tǒng)。

1.3 實(shí)驗(yàn)試劑

0.9 %NaCl注射液、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、多聚甲醛、恩氟烷 (河北九派制藥)、10%水合氯醛(華瑞制藥)。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 大鼠MCAO模型

大鼠稱質(zhì)量后，在4% ～5%恩氟烷、30%O2/70%N2O下誘導(dǎo)麻醉。約5 min后將其尾部抬起無任何張力且隨重力自然落下表示誘導(dǎo)麻醉成功。將大鼠固定于操作臺上，手術(shù)顯微鏡放大倍數(shù)調(diào)節(jié)至16倍，進(jìn)行氣管插管。插管成功后迅速連接動物呼吸機(jī)，在1% ～2%恩氟烷、30%O2/70%N2O下維持麻醉。將大鼠仰臥于手術(shù)臺上，取頸部正中切口，小心分離皮下脂肪和肌肉，右側(cè)頸總動脈(common carotid artery，CCA)、頸外動脈(external carotid artery，ECA)和頸內(nèi)動脈(internal carotid artery，ICA)。分離ECA主干，鈍性分離出甲狀腺動脈和枕動脈，并電灼切斷。在CCA分叉處遠(yuǎn)端約1 cm處結(jié)扎、電灼、切斷ECA，并在CCA分叉處結(jié)扎一道縫合線，不做緊密結(jié)扎。仔細(xì)分離ICA至其發(fā)出翼腭動脈(pterygopalatine artery，PPA)和入顱動脈處。用微小動脈夾臨時(shí)夾閉CCA和ICA，用眼科剪在ECA殘端剪一個(gè)小口，插入線栓，扎緊縫合線，松開ICA動脈夾，慢慢推動線栓進(jìn)入ICA，使其進(jìn)入ICA入顱動脈支。線栓穿過距ICA和ECA分叉處約2 cm左右，有阻力感時(shí)，表明線栓已將大腦中動脈堵塞，放開CCA動脈夾，結(jié)扎CCA分叉處縫合線，縫合頸部皮膚。缺血2 h后，再次麻醉大鼠，打開頸部切口，將線栓拔出，電凝ECA殘端后將頸部切口縫合，腦缺血8、24 h和3、7、14、30 d后處死。假手術(shù)組的大鼠接受所有的手術(shù)過程但不插入線栓。

1.4.2 RIPostC 方法

大鼠雙側(cè)腹股溝處的皮膚備皮消毒之后，各做一處長約1 cm的切口，鈍性分離出雙側(cè)股動脈，在再灌注即刻，以臨時(shí)血管夾夾閉/放開雙側(cè)股動脈，夾閉10 mins，放開10 mins，如此3次循環(huán)。

1.4.3 動物分組

104只健康雄性SD大鼠采用數(shù)字表法隨機(jī)分為13組，每組8只:① 假手術(shù)組(S);② RIPostC 8 h組(R8 h);③ 8 h對照組(C8 h);④ RIPostC 24 h組(R24 h);⑤24 h對照組(C24 h);⑥ RIPostC 3 d組(R3 d);⑦3 d對照組(C3 d);⑧ RIPostC 7 d組(R7 d);⑨ 7 d對照組(C7 d);⑩ RIPostC 14 d組(R14 d);?14 d 對照組(C14 d);?RIPostC 30 d 組(R30 d);?30 d 對照組(C30 d)。

1.4.4 神經(jīng)功能評分

1)Longa 評分法［5］評分標(biāo)準(zhǔn)為:采用 Longa 等［5］推薦的5分法，并稍作改變，對大鼠神經(jīng)功能進(jìn)行評分:0分:正常;1分:腦缺血對側(cè)的前肢不能伸展;2分:腦缺血對側(cè)的前肢屈曲;3分:實(shí)驗(yàn)動物向缺血對側(cè)輕度轉(zhuǎn)圈;4分:實(shí)驗(yàn)動物明顯向缺血對側(cè)轉(zhuǎn)圈;5分:實(shí)驗(yàn)動物爬行時(shí)倒向缺血對側(cè)。

2)前肢踩空試驗(yàn)［6］:主要檢測實(shí)驗(yàn)動物的視覺、觸覺以及前肢對感覺及運(yùn)動的整合能力。整個(gè)空格的面積為10 cm×110 cm，由許多正方形小網(wǎng)格組成(面積9 cm2)，小網(wǎng)格網(wǎng)絲的直徑為1.0 mm，放置在離地面1 m的高度。在實(shí)驗(yàn)中，讓大鼠在1 min內(nèi)，由空格的一端爬向另一端。如果爬行中，動物的前肢掉入網(wǎng)格里，記為1次前肢踩空，它主要是因?yàn)槟X組織缺血損傷導(dǎo)致運(yùn)動功能失調(diào)?？偣灿?jì)數(shù)1 min內(nèi)實(shí)驗(yàn)動物腦缺血對側(cè)前肢出現(xiàn)的踩空錯誤次數(shù)。

3)12分評分法:根據(jù) Belayev等［7］的12分評分法:(1)姿勢反射測驗(yàn)，即提尾懸空試驗(yàn):無明顯神經(jīng)功能缺失為0分，梗死對側(cè)肢體屈曲為1分，側(cè)推試驗(yàn)陽性為2分。(2)肢體放置試驗(yàn):① 視覺亞實(shí)驗(yàn)，即前方刺激——實(shí)驗(yàn)者將動物握于手中，使其前爪懸空，自桌面上方10 cm處向桌面緩慢斜線靠近(此時(shí)桌子位于大鼠前方)，大鼠正常反應(yīng)為前肢即刻抓向桌面，損傷大鼠則表現(xiàn)為肢體反應(yīng)延遲。0分:動物肢體放置反應(yīng)正常;1分:反應(yīng)延遲但不超過2 s;2分:反應(yīng)延遲且超過2 s。側(cè)方刺激，此時(shí)桌子位于動物側(cè)方，其余實(shí)驗(yàn)方法及評分標(biāo)準(zhǔn)同前方刺激。② 觸覺亞實(shí)驗(yàn)，將動物雙眼遮住，并使其前爪懸空，此時(shí)大鼠應(yīng)該既看不見，也不能用胡須觸及桌面，用其前爪背側(cè)輕觸桌面，刺激深度僅達(dá)皮膚和毛發(fā)，動物反應(yīng)及評分同視覺亞實(shí)驗(yàn)，觸覺刺激同樣分前方及側(cè)方刺激。③本體覺亞實(shí)驗(yàn)，操作及評分同觸覺亞實(shí)驗(yàn)，僅刺激深度不同，本體覺亞實(shí)驗(yàn)給予前爪較大壓力，刺激深達(dá)肌肉及關(guān)節(jié)。該亞實(shí)驗(yàn)只有前方刺激。動物前肢放置實(shí)驗(yàn)總分范圍為0～10分，功能損傷越重，得分越高。

1.4.5 大鼠頭顱磁共振掃描

大鼠分別在腦缺血后 8、24 h 和 3、7、14、30 d 后行大鼠冠狀位磁共振T1WI、T2WI檢查。使用德國Siemens 3.0T(Verio Syngo B15)超導(dǎo)磁共振成像系統(tǒng)，大鼠專用線圈。大鼠水合氯醛腹腔注射麻醉后，取俯臥位，頭置線圈中央，行冠狀位連續(xù)掃描，層厚2 mm，層間隔0 mm，層數(shù)11。T1WI采用SE序列，TR/TE/NEX(500 ms/13 ms/2)，F(xiàn)OV 78 mm×78 mm，矩陣256×256;T2WI采用SE序列，TR/TE/NEX(4 000 ms/92 ms/2)，F(xiàn)OV 64 mm×64 mm，矩陣 192×192;DWI采用單次激發(fā) SE-EPI序列，b值取50 s/mm2、500 s/mm2、1 000 s/mm2，TR/TE/NEX(3 500 ms/80 ms/5)，F(xiàn)OV 94 mm×94 mm，矩陣80×80。像后處理使用Siemens Leonardo工作站。

1.4.6 HE染色測定腦梗死體積

各組大鼠分別在腦缺血再灌注后8、24 h和3、7、14、30 d后，10%水合氯醛腹腔麻醉，右心房快速灌注肝素化PBS及4%多聚甲醛進(jìn)行固定，斷頭取腦，置4%多聚甲醛中后固定48 h后放入模具，于視交叉處沿冠狀切片，向前囟方向切2張切片，向小腦方向切3張切片，每片厚約2 mm，石蠟包埋。每片腦組織第一張做HE染色，使用Image-Pro Plus 6.0圖像分析系統(tǒng)計(jì)算腦梗死體積。大鼠腦梗死百分比=(正常側(cè)大腦半球體積－梗死側(cè)非梗死區(qū)大腦半球的體積)/對側(cè)正常側(cè)大腦半球體積%=［(S1'+S2'+…+Sn')H－(S1+S2+…+Sn)H］/(S1'+S2'+…+Sn')H%，Sn'表示每片正常腦組織面積，Sn表示梗死側(cè)非梗死區(qū)每片腦組織面積，H表示每片厚度。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 16.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(ˉ±s)表示，組間比較使用one-way ANOVA方法，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 RIPostC對大鼠神經(jīng)功能的影響

各實(shí)驗(yàn)組大鼠分別在腦缺血后8、24 h和3、7、14、30 d進(jìn)行神經(jīng)功能評分。結(jié)果顯示，假手術(shù)組未見任何神經(jīng)功能缺失癥狀，而對照組與RIPostC組大鼠術(shù)后均出現(xiàn)不同程度左前肢屈曲、行走路徑向左側(cè)偏斜。

2.1.1 Longa 方法評分結(jié)果

對照組各組間比較，14和30 d的神經(jīng)功能評分明顯低于8 h、24 h、3 d(P＜0.05);RIPostC 組各組間比較，7 d、14 d、30 d 神經(jīng)功能評分明顯低于 8 h、24 h、3 d(P＜0.05);與對照組比較，RIPostC 組大鼠在7 d神經(jīng)功能評分降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，詳見圖1。

圖1 Longa評分結(jié)果Fig.1 The results of Longa scores

2.1.2 前肢踩空試驗(yàn)評分結(jié)果

對照組各組間比較，14和30 d神經(jīng)功能評分明顯低于8、24 h 和3、7 d(P＜0.05)，30 d 神經(jīng)功能評分明顯低于14 d(P＜0.05);RIPostC組各組間比較，30d神經(jīng)功能評分明顯低于 8、24 h和 3、7、14 d(P＜0.05)，14 d神經(jīng)功能評分明顯低于8和24 d(P＜0.05)，7 d神經(jīng)功能評分明顯低于24 d(P＜0.05);與對照組比較，RIPostC組大鼠3 d和7 d神經(jīng)功能評分顯著降低，并且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，說明RIPostC改善了大鼠腦缺血再灌注損傷的神經(jīng)功能恢復(fù)，詳見圖2。

圖2 前肢踩空試驗(yàn)評分結(jié)果Fig.2 The scores of the forelimb test

2.1.3 神經(jīng)功能12分評分結(jié)果

對照組各組間比較，14和30 d的神經(jīng)功能評分明顯低于8 h、24 h、3 d、7 d(P＜0.05);RIPostC 組各組間比較，30 d神經(jīng)功能評分明顯低于8 h、24 h、3 d、7 d(P＜0.05)，3和14 d神經(jīng)功能評分明顯低于8和24 h(P＜0.05)，7 d神經(jīng)功能評分明顯低于24 h(P＜0.05);與對照組比較，RIPostC組大鼠3 d和7 d神經(jīng)功能評分顯著降低，并且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，進(jìn)一步說明RIPostC對腦缺血再灌注損傷的神經(jīng)功能恢復(fù)的保護(hù)作用，詳見圖3。

圖3 12分評分結(jié)果Fig.3 The results of the 12 scores

2.2 RIPostC對大鼠腦梗死體積的影響

2.2.1 HE染色測定腦梗死體積

兩種神經(jīng)功能評分均顯示，RIPostC對腦缺血再灌注損傷7 d和14 d具有保護(hù)作用，筆者進(jìn)一步應(yīng)用HE染色觀察RIPostC是否可以影響大鼠腦缺血再灌注后的遠(yuǎn)期腦梗死體積。鏡下可見，腦梗死形態(tài)為多角形或扇形，梗死側(cè)神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)量減少，軸突缺失，神經(jīng)元細(xì)胞周圍可見較多有空泡的神經(jīng)纖維。結(jié)果顯示:與對照組相比，RIPostC組大鼠在腦缺血再灌注損傷后8 h、24 h、3 d、7 d腦梗死體積均明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，但14和30 d腦梗死體積在兩組間比較差異并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果如圖4所示HE染色，圖5為HE染色的腦梗死體積定量。

2.2.2 大鼠頭顱磁共振掃描結(jié)果

為進(jìn)一步確認(rèn)本模型的穩(wěn)定性以及RIPostC對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。筆者分別對RIPostC組和對照組大鼠在腦缺血再灌注損傷后8、24 h和3、7、14、30 d行頭顱磁共振掃描，腦梗死區(qū)域在MRI的T2加權(quán)像上所見彌散性高信號的影像學(xué)改變，詳見圖6。

圖4 HE染色Fig.4 The results of the hematoxylin-eosin stain

圖5 RIPostC對大鼠腦梗死體積的影響Fig.5 The results of RIPostC on the cerebral infarction volumes of the rats

3 討論

在以往關(guān)于RIPostC的研究中，我們已經(jīng)得到在腦缺血即刻和腦缺血再灌注即刻對大鼠實(shí)施遠(yuǎn)隔夾閉/放開雙側(cè)股動脈，夾閉10 min，放開10 min，如此3次循環(huán)的RIPostC可以減少大鼠腦缺血后24 h的腦梗死體積，并提高神經(jīng)功能評分，其腦保護(hù)機(jī)制可能是通過降低C/EBP同源蛋白和caspase-3的表達(dá)來發(fā)揮其腦保護(hù)的作用［8-12］。本研究應(yīng)用大鼠大腦MCAO模型著重研究RIPostC對大鼠腦缺血的遠(yuǎn)期保護(hù)作用，結(jié)果證明遠(yuǎn)隔夾閉/放開雙側(cè)股動脈，夾閉10 min，放開10 min，如此3次循環(huán)的RIPostC可以減少大鼠腦缺血后8 h、24 h、3 d和7 d的腦梗死體積，改善腦缺血后3和7d的神經(jīng)功能評分，具有神經(jīng)保護(hù)作用，但是對14 d和30 d的腦梗死體積和神經(jīng)功能評分均無明顯影響。

圖6 頭顱磁共振掃描圖Fig.6 The results of the magnetic resonance imaging

Ren等［10］通過永久性大腦中動脈阻塞和30 min雙側(cè)頸總動脈夾閉制造小鼠腦缺血模型。雙側(cè)頸總動脈恢復(fù)血流后，給予下肢股動脈連續(xù)3次15 min缺血和15 min再灌注的RIPostC，2 d后測定腦梗死體積。結(jié)果雙側(cè)頸總動脈恢復(fù)血流后立即實(shí)施RIPostC，與對照組相比，腦梗死體積下降67%。雙側(cè)頸總動脈恢復(fù)血流后3 h實(shí)施RIPostC，與對照組相比，腦梗死體積下降47%。說明RIPostC對腦缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用，而且實(shí)施的越早效果可能越好。Stavros等［11］在短暫肢體缺血產(chǎn)生RIPostC實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，上肢反復(fù)3次的缺血再灌注刺激可以使機(jī)體產(chǎn)生保護(hù)作用，但是如果這種刺激減少到反復(fù)2次，這種保護(hù)作用就消失。同時(shí)RIPostC的保護(hù)程度也取決于接受缺血再灌注刺激的組織體積，因?yàn)橄轮磸?fù)2次的缺血再灌注刺激可以使機(jī)體對內(nèi)皮的缺血再灌注損傷產(chǎn)生保護(hù)作用。以上結(jié)果提示RIPostC刺激也存在一定的閾值，但是由于目前基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)證據(jù)不充分，無法確定閾刺激的具體值。

關(guān)于RIPostC的治療時(shí)間窗的研究中，Ren等［10］在肢體的RIPostC保護(hù)小鼠的局灶性腦梗死實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，再灌注即刻實(shí)施的RIPostC可以使腦梗死體積比對照組下降67%，再灌注后3h實(shí)施的RIPostC可以使腦梗死體積比對照組下降47%，將RIPostC的實(shí)施延長到再灌注后6h，腦梗死體積與對照組比較無明顯差異，提示RIPostC存在治療時(shí)間窗，這項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中RIPostC的治療時(shí)間窗為到再灌注后的3 h。Faraz等［4］在利用腎動脈短暫的缺血再灌注產(chǎn)生RIPostC來減少心肌梗死面積的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，對小鼠實(shí)施左冠狀動脈阻塞30 min，制造心肌缺血模型，于心肌缺血24 min時(shí)夾閉腎動脈血流5 min，松解腎動脈并于1 min后進(jìn)行左冠狀動脈再灌注，可使心肌梗死面積比對照組減少了50%。而延時(shí)的RIPostC，即在左冠狀動脈阻塞26 min后實(shí)施RIPostC，其心肌梗死面積與對照組相比無明顯差異。此項(xiàng)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步說明，與傳統(tǒng)的心肌缺血后適應(yīng)一樣，RIPostC需要于再灌注的早期完成，這樣才可以發(fā)揮它的保護(hù)作用。本研究課題組前期的研究發(fā)現(xiàn)RIPostC在再灌注30 mins內(nèi)給予，24 h后測定腦梗死體積，具有保護(hù)作用，進(jìn)一步明確了RIPostC應(yīng)用的時(shí)間窗(尚待發(fā)表)。上述實(shí)驗(yàn)研究為臨床實(shí)施RIPostC提供了一定參考，但是究竟如何選擇RIPostC的最佳治療時(shí)間窗，有待于進(jìn)一步深入研究。

本課題采用線栓法制備比較符合人類常見缺血性卒中類型的大鼠MCAO模型，大腦中動脈阻塞2 h后進(jìn)行再灌注。RIPostC的具體操作方法為:在大鼠腦缺血即刻夾閉雙側(cè)股動脈10 min，放開10 min，此為1個(gè)循環(huán)，共進(jìn)行3個(gè)循環(huán)，分別在腦缺血再灌注后8、24 h 和 3、7、14、30 d 進(jìn)行神經(jīng)功能評分和頭顱核磁平掃并留取腦組織標(biāo)本。結(jié)果顯示與對照組相比，RIPostC可以減少腦缺血后8、24 h和3、7 d的腦梗死體積，降低3和7 d的神經(jīng)功能評分，說明RIPostC能改善缺血再灌注早期的神經(jīng)功能評分，對缺血再灌注后遠(yuǎn)期(14和30 d)的腦梗死體積和神經(jīng)功能并無影響，其原因可能與嚙齒類動物的神經(jīng)恢復(fù)功能很強(qiáng)，對照組的自身恢復(fù)已經(jīng)使晚期的神經(jīng)功能評分檢測不出兩組的差異。同時(shí)本課題只在腦缺血再灌注的早期給予了RIPostC，缺乏長期的應(yīng)用，也可能是出現(xiàn)上述結(jié)果的原因之一。

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