六堡茶對小鼠免疫功能的影響

劉冠萍 黃宇聲 張栩顏 饒偉源 鄧聿胤 覃良

六堡茶是以地理名稱命名的歷史名茶，原產(chǎn)于廣西梧州市蒼梧縣六堡鄉(xiāng)，至今已有1500多年歷史。六堡茶屬于溫性茶，除了具有其它茶類所共有的保健作用外，具有更強(qiáng)的分解油膩、降低人體類脂肪化合物、膽固醇、三酸甘油脂的功效，長期飲用可以有健胃養(yǎng)神、消滯除脹、清熱化濕、醒酒、降脂等多種保健功效[1]，成人服用量是一次3 g，3次/d。目前關(guān)于六堡茶的研究甚少，本實(shí)驗(yàn)旨在探討六堡茶對小鼠免疫功能的影響，為六堡茶的開發(fā)與應(yīng)用提供基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 健康KM小鼠120只，體重18～22 g，雌雄兼用，廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供（許可證號：SCXK桂2009-0002）。

1.2 藥品與試劑 六堡茶水提物，由研究者自行提取，性狀為棕褐色浸膏（每毫升相當(dāng)于藥材1.87 g）。臨用時(shí)以蒸餾水配成相應(yīng)濃度使用。小牛血清，由美國Hyclone公司生產(chǎn)；RPMI l640，由美國Gibco公司生產(chǎn)；刀豆蛋白A（ConA）、四甲基偶氮唑鹽（MTT），由美國Sigma公司生產(chǎn)。其他試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.3 儀器 二氧化碳培養(yǎng)箱（美國Queue公司）；超凈工作臺（上海浦東躍欣科學(xué)儀器廠）；自動(dòng)酶標(biāo)儀（美國Bio-Rad公司）。

1.4 方法

1.4.1 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 將小鼠隨機(jī)分為四組：正常對照組、六堡茶低劑量組（3.75 g/kg）、六堡茶中劑量組（7.5 g/kg）、六堡茶高劑量組（15 g/kg），每組10只。除正常對照組外，各組每天灌胃六堡茶1次，給藥體積20 ml/kg，正常對照組灌胃等體積的蒸餾水，連續(xù)30 d后，參照文獻(xiàn)[2]方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。按下式計(jì)算吞噬率和吞噬指數(shù)。

吞噬率（%）=吞噬雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù)/巨噬細(xì)胞數(shù)×100%

吞噬指數(shù)=被吞噬的雞紅細(xì)胞總數(shù)/巨噬細(xì)胞數(shù)

1.4.2 血清溶血素測定 分組及給藥同上。于灌胃第26天給小鼠腹腔注射2%SRBC 0.2 ml/只，于免疫后第4天摘眼球采血，分離血清并在微量血凝板上進(jìn)行血清溶血素測定。37 ℃孵育3 h后，統(tǒng)計(jì)血球凝集度，計(jì)算相應(yīng)抗體積數(shù)[3]。

1.4.3 小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn) 分組及給藥同上。參照文獻(xiàn)[3]方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，末次給藥后2 h，無菌取脾細(xì)胞，常規(guī)制備小鼠脾細(xì)胞懸液，采用MTT比色法測定脾淋巴細(xì)胞增殖能力。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理，計(jì)量資料以（±s）表示，進(jìn)行單因素方差分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 六堡茶對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力的影響 由表1可見，與正常對照組比較，六堡茶高劑量小鼠的腹腔巨噬細(xì)胞吞噬率、吞噬指數(shù)明顯高于正常對照組（P<0.05），中、低劑量組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（與正常對照組比較，P>0.05）。見表1。

表1 六堡茶對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力的影響（±s）

表1 六堡茶對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力的影響（±s）

*與正常對照組比較，P<0.05

組別 劑量（g/kg）吞噬率（%） 吞噬指數(shù)正常對照組（n=10） - 23.9±4.2 0.41±0.05六堡茶低劑量組（n=10） 3.75 24.2±5.6 0.43±0.11六堡茶中劑量組（n=10） 7.5 27.1±3.7 0.45±0.06六堡茶高劑量組（n=10） 15 28.8±5.1* 0.52±0.13*

2.2 六堡茶對小鼠血清溶血素的影響 由表2可見，與正常對照組比較，六堡茶中、高劑量能明顯增加小鼠的抗體積數(shù)（P<0.05），低劑量組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），表明六堡茶具有提高小鼠血清溶血素水平的作用。

表2 六堡茶對小鼠血清溶血素的影響（±s）

表2 六堡茶對小鼠血清溶血素的影響（±s）

*與正常對照組比較，P<0.05

組別 劑量（g/kg） 抗體積數(shù)正常對照組（n=10） - 130.8±18.2六堡茶低劑量組（n=10） 3.75 137.6±13.9六堡茶中劑量組（n=10） 7.5 147.8±13.2*六堡茶高劑量組（n=10） 15 150.3±15.5*

2.3 六堡茶對小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)的影響 由表3可見，與正常對照組比較，六堡茶各劑量組的淋巴細(xì)胞增殖能力均無明顯變化（P>0.05）。

表3 六堡茶對小鼠小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)的影響（±s）

表3 六堡茶對小鼠小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)的影響（±s）

淋巴細(xì)胞增殖能力（OD值）正常對照組（n=10） - 0.183±0.061六堡茶低劑量組（n=10） 3.75 0.192±0.055六堡茶中劑量組（n=10） 7.5 0.206±0.072六堡茶高劑量組（n=10） 15 0.210±0.057組別 劑量（g/kg）

3 討論

本文選用了數(shù)個(gè)免疫測定指標(biāo)觀察和探討六堡茶對小鼠免疫機(jī)能的調(diào)節(jié)作用。巨噬細(xì)胞的吞噬能力很強(qiáng)，其胞漿內(nèi)富含溶酶體、酸性磷酸酶和過氧化物酶等物質(zhì)，能非特異性地吞噬多種抗原，在機(jī)體的非特異性免疫反應(yīng)中具有十分重要的作用。吞噬作用常作為反映巨噬細(xì)胞功能狀況的指標(biāo)[2]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，六堡茶高劑量能明顯提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)和吞噬率，說明六堡茶能夠增強(qiáng)機(jī)體的非特異性免疫能力。

血清溶血素是B淋巴細(xì)胞在接受各種抗原刺激后分泌的抗體，是衡量機(jī)體體液免疫水平的重要指標(biāo)[4]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，六堡茶能使正常小鼠血清溶血素的含量明顯增高，提示其具有增強(qiáng)小鼠體液免疫功能的作用。

可見，六堡茶具有增強(qiáng)免疫力的功能，但其增強(qiáng)免疫功能的機(jī)制及對免疫分子的作用有待于進(jìn)一步研究。

[1] 楊柳.六堡茶工藝的探討[J].廣西輕工業(yè)，2008，9（4）：13-15.

[2] 孫晶，徐儉.木脂素對小鼠免疫功能的影響[J].哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，44（5）：467-470.

[3] 宋琳琳，陳立，陳五嶺.食源性生物活性肽對小鼠免疫功能的影響[J].西北大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2009，39（4）：612-616.

[4] 王麗葉，馬利芹，徐倩倩，等.蔥乙醇提取物對小鼠免疫功能的影響[J].中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2010，26（20）：7-10.