富氫鹽水對子癇前期大鼠的保護作用探討

鄧琳琳 趙萍

子癇前期是妊娠期特有的一種疾病，屬于妊娠高血壓疾病的范疇。此病發(fā)病率高，并發(fā)癥多而且嚴重，是引起母嬰死亡的主要原因之一[1]。全身小血管痙攣引起的血管損傷是本病病理變化的基礎(chǔ)，因此如何減少血管損傷是預(yù)防和治療子癇前期及其并發(fā)癥的關(guān)鍵。

氫氣一直都被視為是一種生理性惰性氣體，直到2007年Nature上有報道明確氫氣可以選擇性地清除羥自由基和過氧亞硝基陰離子后[2]，越來越多的研究表明氫氣除了抗氧化作用外還具有抗炎、抑制細胞凋亡、抗血管增生的作用[3-4]。為探討氫氣是否可以減輕子癇前期患者的血管損傷，本文通過富氫鹽水對子癇前期大鼠的影響進行了研究，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物的準(zhǔn)備 選擇成年性成熟SD雌雄大鼠（購自河南省實驗動物中心），體重200～260 g，室溫20～25 ℃飼養(yǎng)。完全隨機法將雌雄大鼠1：1同籠飼養(yǎng)一晚，次日清晨檢查，若發(fā)現(xiàn)雌鼠陰道口或盛糞盤內(nèi)發(fā)現(xiàn)陰栓，確定為妊娠第0天。妊娠后孕鼠單籠喂養(yǎng)。

1.2 子癇前期大鼠模型的建立及分組 將確定妊娠的30只大鼠隨機分為模型組（A組）、富氫鹽水組（B組）和對照組（C組），每組10只。除對照組外其余兩組自妊娠第7日起連續(xù)5 d腹腔內(nèi)注射L-NAME 250 mg/（kg·d）建立子癇前期模型。以收縮壓升高30 mm Hg，尿蛋白大于等于（+）為建模成功。建模同時， B組給予富氫鹽水5 ml/kg腹腔灌注，其他兩組則注射等量的生理鹽水，持續(xù)12 d。

1.3 富氫鹽水的制備及使用 根據(jù)文獻[5]提供的方法，將100 ml軟塑包裝的生理鹽水瓶中空氣抽盡，接氫氣發(fā)生器，用一次性輸液針頭持續(xù)注入超純氫，制備當(dāng)日即進行大鼠的富氫鹽水腹腔灌注。

1.4 檢測方法及觀察指標(biāo)

1.4.1 血壓 用大鼠尾套無創(chuàng)血壓心率儀進行尾動脈血壓測量，每日連續(xù)測3次取其平均值。

1.4.2 24 h尿蛋白定量 將大鼠置于代謝籠內(nèi)，正常飲食，收集24 h尿液，測量尿液體積，并用全自動生化分析儀測定尿蛋白濃度，計算24 h尿蛋白量。

1.4.3 血清VEGF檢測 妊娠第12天、第20天，通過大鼠尾靜脈穿刺抽血1 ml，2000～3000 r/min離心后留取上清-20 ℃保存。ELISA法檢測VEGF含量（試劑盒購于上海滬宇生物有限公司）。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SSPS 11.0軟件包進行分析，計量資料以（±s）表示，采用t檢驗，檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 血壓及24 h尿蛋白含量 A組和B組平均動脈壓顯著高于C組（P<0.001），富氫鹽水治療后，B組血壓未發(fā)生明顯變化（P>0.05），尿蛋白量明顯降低（P<0.001），但仍高于健康孕鼠（P<0.01）。見表1。

2.2 血清VEGF含量 富氫鹽水治療后，B組血清VEGF明顯升高，高于模型組水平（P<0.05），但是與正常孕鼠相比仍然偏低（P<0.01）。見表1。

表1 各組大鼠血壓和24小時尿蛋白含量測定結(jié)果

3 討論

子癇前期的發(fā)病機制至今尚不明確，因此減輕臨床癥狀、減少并發(fā)癥成為降低其危害的關(guān)鍵。大家公認子癇前期主要病理改變是血管內(nèi)皮細胞的損傷，最終引起血管內(nèi)皮的氧化應(yīng)激增強，炎性介質(zhì)釋放增多，導(dǎo)致組織損傷[6]。

氫氣溶解度達到飽和的生理鹽水即為富氫鹽水（氫濃度約為0.6 mmol/L）[7]，研究發(fā)現(xiàn)，它可以減少缺血缺氧腦組織的氧化應(yīng)激反應(yīng)，減少相關(guān)炎性因子。近來越來越多的實驗證實，氫氣可以通過抗氧化、抗炎、抑制細胞凋亡對器官或組織的缺血再灌注進行保護[8-9]。

VEGF是內(nèi)皮細胞特異性有絲分裂原，被認為是最重要的血管生成因子。它可以刺激血管內(nèi)皮細胞的生長和趨化，從而促進新生血管的形成。研究表明，子癇前期患者血清和胎盤中的VEGF均明顯降低[10]。利用富氫鹽水對子癇前期模型大鼠進行治療，可明顯降低其尿蛋白含量，升高血清VEGF，證明富氫鹽水可以通過提高VEGF的水平來保護子癇前期大鼠的血管，減輕蛋白的滲出。另一方面，由于富氫鹽水可以幫助血管內(nèi)皮進行修復(fù)，因此，對于子癇前期所引起的并發(fā)癥同樣有輔助治療作用。

但是值得一提的是，目前富氫鹽水的制作技術(shù)尚未成熟，臨床應(yīng)用也受到了相應(yīng)的限制，氫離子是否會對子代產(chǎn)生不良影響還未知，因此將富氫鹽水應(yīng)用于對妊娠期高血壓疾病患者的治療還需要更多的努力。

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