枸杞多糖的化學(xué)分析與降血糖作用研究進(jìn)展

唐華麗孫桂菊陳 忱

TANG Hua－li1，2SUN Gui－ju2CHEN Chen2

（1.重慶三峽學(xué)院生命科學(xué)與工程學(xué)院，重慶 萬州 404000；2.東南大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，江蘇 南京 210009）

糖尿病是嚴(yán)重影響人類健康的非傳染性疾病之一。據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）估算［1］，目前全球約有1.8億糖尿病患者，其中中國為3 000萬人。而到2030年糖尿病患者的數(shù)量將會成倍的增加，中國的糖尿病患者總數(shù)將接近1億人，是臨床亟待解決的問題之一。研究［2］證明，長期使用常見的臨床降糖藥，效果不佳，且有較嚴(yán)重的副作用，因此世界各國醫(yī)務(wù)工作者和研究人員紛紛致力于從天然藥物中篩選和研究降糖藥物。

枸杞子為中國國家公布的藥食同源品種之一，具有獨(dú)特的營養(yǎng)和藥用價值［3，4］。其中枸杞多糖 （Lyciumbarbarumpolysaccharides，LBP）作為枸杞發(fā)揮功效的重要活性成分而成為近年來一個研究的熱點(diǎn)。枸杞多糖能夠降低動物及Ⅱ型糖尿病患者空腹和餐后血糖的作用已被證實(shí)，但是關(guān)于枸杞多糖是如何進(jìn)入體內(nèi)，代謝生成何種物質(zhì)，代謝組分如何發(fā)揮功效作用等問題尚不清楚。文章就近年來國內(nèi)外在枸杞多糖化學(xué)分析和降血糖作用方面的研究進(jìn)行綜述，旨在為枸杞多糖的吸收、代謝以及降血糖機(jī)制等研究提供參考。

1 枸杞多糖的化學(xué)分析

1.1 枸杞多糖的純度鑒定

枸杞多糖的生物學(xué)活性與其相對分子質(zhì)量有很大關(guān)系，因此在對枸杞多糖生理功能及其作用機(jī)制的深入研究中，相對分子質(zhì)量是一個重要指標(biāo)。要測定枸杞多糖的相對分子質(zhì)量，首先要求鑒定其純度。多糖的純度標(biāo)準(zhǔn)不能用一般化合物的純度標(biāo)準(zhǔn)來衡量，因?yàn)榧幢闶嵌嗵羌兤?，其微觀結(jié)構(gòu)也是不均一的，它實(shí)際上是一定相對分子質(zhì)量范圍內(nèi)的多糖的均一組分，它的純度只能代表相似鏈長的多糖分子的平均分布。國內(nèi)外對枸杞多糖純度鑒定的方法有比旋度法、層析法、超離心法、電泳法、色譜法、示差折射法、紫外檢測法等［5］。在實(shí)際應(yīng)用中，一般至少需要兩種方法同時對樣品進(jìn)行純度驗(yàn)證。王建華［6］對純化后的枸杞多糖亞組分同時采用Sephadex G－200和SDS－PAGE進(jìn)行純度驗(yàn)證，結(jié)果均表明枸杞多糖各亞組分分子量分布均一。張民等［7］同時采用瓊脂糖凝膠電泳法及高效液相色譜法（HPLC）對經(jīng)DEAE纖維素和Sephadex G－75色譜柱純化后的枸杞多糖組分進(jìn)行純度驗(yàn)證，結(jié)果均表明LBP－4a和LBP－5b都是均一的多糖組分。朱彩平等［8］采用瓊脂糖凝膠電泳和紙色譜的方法驗(yàn)證經(jīng)Sephadex G－75純化后收集的多糖組分為單一組分。近年來，高效凝膠滲透色譜（HPGPC）結(jié)合示差檢測器檢測的方法［9－13］。由于其省時、準(zhǔn)確度高等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用于多糖的純度測定中，多糖組分經(jīng)凝膠色譜得到一對稱峰，通過面積歸一化法計(jì)算不同相對分子質(zhì)量多糖的組成。

1.2 枸杞多糖含量的測定

目前枸杞多糖含量測定最常用的方法是苯酚—硫酸法［14－17］和蒽酮—硫酸法［18，19］，其原理是多糖在強(qiáng)酸作用下首先水解為單糖，然后迅速脫水生成糠醛或糠醛衍生物，糠醛物質(zhì)與酚類或胺類化合物縮合，生成有特殊顏色的物質(zhì)，利用有色物質(zhì)在特定波長下的吸收強(qiáng)度來計(jì)算枸杞多糖的含量。但同時這兩種方法在測定枸杞多糖含量方面還存在爭議，其一是因?yàn)槎嗵潜旧聿⒉皇怯赡骋惶囟▎翁墙M分構(gòu)成，且枸杞多糖為一種蛋白多糖，以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)物參照不合理；其次枸杞多糖的純化很難完全排除單糖等雜質(zhì)組分的干擾。此外，也有人［20－23］將比旋度法、示差折射法、紫外檢測和硫酸—咔唑法等應(yīng)用于多糖的成分檢測。

1.3 枸杞多糖相對分子質(zhì)量的測定

多糖的生理活性通常與其相對分子質(zhì)量（Mr）有關(guān)，因此測定枸杞多糖的Mr是深入研究其構(gòu)效關(guān)系及作用機(jī)制的重要工作。多糖的Mr只能代表相似鏈長的平均分布，有數(shù)均相對分子質(zhì)量（Mn）、重均相對分子質(zhì)量（Mw）和粘均相對分子質(zhì)量（Mv）3種表示方法，文獻(xiàn)資料通常使用Mw表示多糖的Mr。過去用于測定多糖Mr的方法主要有：超速離心沉降法、滲透壓法、蒸汽壓法、端基法、光散射法、黏度法、凝固點(diǎn)下降法等［5］，可根據(jù)待測多糖的分子量范圍選擇測定。目前常用于枸杞多糖Mr測定的方法主要有：凝膠滲透色譜 法［9，24，25］和高效 液 相 色 譜 法［7，13，26］，這 兩 種 方 法 均 要 以已知Mr的標(biāo)準(zhǔn)系列右旋糖酐（dextran）作對照來測定枸杞多糖的Mr。為了避免標(biāo)曲制作時試驗(yàn)步驟繁瑣以及試驗(yàn)誤差，周鵬等［26］采用高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用（HPLCMS）的方法對茶多糖蛋白進(jìn)行分子量測定，王戰(zhàn)勇等［9］采用凝膠滲透色譜和激光光散射聯(lián)用儀（GPC－LLS）測定枸杞多糖的Mr，既不需使用多糖標(biāo)準(zhǔn)品又取得了理想的試驗(yàn)效果。

1.4 枸杞多糖的分析方法及結(jié)構(gòu)描述

1.4.1 枸杞多糖結(jié)構(gòu)分析方法 同樣是生物大分子，多糖的結(jié)構(gòu)遠(yuǎn)比蛋白質(zhì)和核酸復(fù)雜，沿用蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的分類方法將多糖分為一、二、三、四級結(jié)構(gòu)［27］，其中一級結(jié)構(gòu)為初級結(jié)構(gòu)，包括糖基的組成、糖基排列順序、相鄰糖基的連接方式、異頭碳構(gòu)型以及糖鏈有無分支、取代位置、官能團(tuán)類型和含量等。二、三、四級結(jié)構(gòu)為高級結(jié)構(gòu)，是指多糖鏈在以氫鍵和非共價鍵為主的作用下連接而成的空間構(gòu)象。糖鏈結(jié)構(gòu)的微觀不均一性，使糖鏈的一級結(jié)構(gòu)測定工作更加復(fù)雜化，所以目前對枸杞多糖結(jié)構(gòu)的研究多限于其一級結(jié)構(gòu)的分析，主要有化學(xué)分析法、儀器分析法、生物學(xué)方法以及它們之間聯(lián)用的方法，主要結(jié)構(gòu)分析方法見表1。

表1 多糖結(jié)構(gòu)分析方法Table1 The structure analysis method of polysaccharide

1.4.2 枸杞多糖的結(jié)構(gòu)描述 研究枸杞多糖的結(jié)構(gòu)對其發(fā)揮生理功能的作用機(jī)制的深入研究，以及更好的利用和開發(fā)枸杞多糖具有重要意義。由于組成枸杞多糖的單糖種類和數(shù)目等的不同，其結(jié)構(gòu)非常復(fù)雜，目前，國內(nèi)外對枸杞多糖的結(jié)構(gòu)研究主要集中在其分子量測定、單糖組成及比例、糖環(huán)形式（吡喃環(huán)或呋喃環(huán)）、單糖殘基類型及糖苷鍵連接位點(diǎn)、糖苷取代的異頭異構(gòu)形式（α－或β－）等初級結(jié)構(gòu)的表達(dá)上。趙春久等［36］采用DEAE柱層析法從枸杞多糖中分離得到4個水溶性多糖均一體，除LBPC4的分子量1.0×104，為α－（1→4）（1→6）連接的葡聚糖肽外，LBPC3、LBPC2、LBPC1分別為分子量6.6×104、1.2×104、0.8×104，β－（1→4）（1→6）連接的雜多醣肽。田庚元等［37］早期研究從枸杞子中分離純化得到一種糖蛋白LbGP，經(jīng)電泳法測定分子量為88kD，該糖蛋白含量為70%，蛋白質(zhì)含量30%，檢測出16種氨基酸，單糖組成為Arb∶Gal∶Glu＝25∶10∶1，為Glycan－O－Ser鏈接的糖蛋白。郭琦等［38］將純化得到的枸杞多糖組分LBP3－I進(jìn)行結(jié)構(gòu)和組成分析，紅外光譜表明LBP3－I具有明顯的糖類物質(zhì)特征吸收峰且含有吡喃環(huán)，掃描電鏡觀察得知LBP3－I主要呈鏈狀伴隨著高度分支結(jié)構(gòu)，且糖鏈間多相互纏繞聚集成環(huán)狀，氣相色譜分析得出其單糖組成分別為鼠李糖基、阿拉伯糖基、木糖基、甘露糖基、葡萄糖基和半乳糖基，且摩爾比率為2.07∶2.38∶3.11∶1.00∶1.12∶2.86，是一種含有結(jié)合蛋白的多糖復(fù)合物，和田庚元的研究結(jié)論相符。Zou等［39］將經(jīng)DEAE離子交換純化得到的LBP－1進(jìn)行 HPLC和GC分析，得出LBP－1由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、半乳糖、甘露糖和半乳糖醛酸殘基組成，摩爾比為1.00∶7.85∶0.37∶0.65∶3.01∶8.16，對 LBP－1進(jìn)行 FT－IR、GCMS、1H－NMR和13C－NMR分析，研究結(jié)果表明：各單糖的連接順序依次為（1→5）－α－D－阿拉伯糖－（1→4）－α－D－半乳糖醛酸，通過－（3→6）－連接－（1）－甘露糖分支，鏈終端連接－（1）－甘露糖。目前對枸杞多糖的結(jié)構(gòu)鑒定與描述均建立在：對枸杞多糖進(jìn)行分離純化得到各種分子量均一的多糖組分，然后選取相對含量較多的組分按表1的方法進(jìn)行分析，按照單糖的組成和糖苷鍵連接順序?qū)M分多糖進(jìn)行結(jié)構(gòu)描述。隨著分析分離技術(shù)的發(fā)展，糖鏈結(jié)構(gòu)分析工作進(jìn)展迅速，趨向于用少量樣品（幾十微克到幾毫克）在較短時間內(nèi)（幾星期內(nèi)）就能得到糖鏈結(jié)構(gòu)的大部分或幾乎全部信息。相比之下，目前對化學(xué)和儀器分析方面的技術(shù)方法研究較多，生物學(xué)方面的方法研究還比較薄弱。

2 枸杞多糖的降血糖作用

大量研究表明枸杞及其多糖具有降低血糖功能，可能是通過改善胰島細(xì)胞形態(tài)功能、修復(fù)受損胰島細(xì)胞和促進(jìn)胰島細(xì)胞再生，從而達(dá)到降低血糖水平的作用。Zou等［39］研究了枸杞多糖LBP－1對大鼠胰島細(xì)胞RINm5F和人體肝細(xì)胞HepG2的體外降血糖試驗(yàn)，結(jié)果表明：LBP－1具有保護(hù)胰島細(xì)胞免受氧化損傷、顯著提高細(xì)胞存活率以及減輕HepG2的胰島素抵抗作用，對開發(fā)降血糖功能食品和藥物具有重要參考價值。趙蕊等［40，41］分別給予Ⅱ型糖尿病小鼠枸杞多糖高（40mg／kg·BW）、低（20mg／kg·BW）2個劑量水平，考查枸杞多糖對Ⅱ型糖尿病小鼠胰島細(xì)胞形態(tài)和功能的影響，給藥中期和后期高、低劑量組血糖濃度與模型組比較有顯著性差異（P＜0.05），并呈現(xiàn)出一定劑量－效應(yīng)關(guān)系，圖像分析結(jié)果表明枸杞多糖可以改善Ⅱ型糖尿病小鼠胰島細(xì)胞形態(tài)和功能并促進(jìn)胰島素的分泌，有良好的降血糖作用。王玲等［42］對四氧嘧啶誘導(dǎo)制備的糖尿病小鼠模型預(yù)防性灌胃LBP－D，觀察枸杞多糖LBP－D對帶病小鼠和正常小鼠的血糖水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：在注射四氧嘧啶前4，1h，用LBP－D灌胃給藥可使小鼠血糖濃度從對照組的21.3mmol／L降至注射四氧嘧啶后72h的10.2mmol／L，表明LBP－D有明顯預(yù)防血糖升高作用。羅瓊等［43］研究表明：經(jīng)過提純的枸杞多糖組分LBP－X對四氧化嘧啶糖尿病兔的降血糖效果優(yōu)于粗枸杞多糖，更優(yōu)于枸杞原汁，降糖效率達(dá)100%。孫桂菊等［44］研究了枸杞多糖和茶葉多糖（TPS）混合物對Ⅱ型糖尿病大鼠的控制效果，按照高（0.6g／kg·BW）、低（0.3g／kg·BW）2個劑量水平灌胃大鼠，對給藥后高、低劑量組與正常組血糖值進(jìn)行比較，結(jié)果表明：枸杞多糖、TPS混合物具有增加胰島素敏感性和肝糖原儲備，降低血糖水平的作用，對正常動物血糖水平和糖耐量未見影響；該研究組［45］還研究了枸杞多糖對Ⅱ型糖尿病大鼠血清糖基化終產(chǎn)物－肽（AGEs－P）、糖基化血紅蛋白（HbAlc）等指標(biāo)的影響，結(jié)果表明：枸杞多糖能降低Ⅱ型糖尿病大鼠血漿HbAlc、血清AGEs－P及腎臟IL－8的含量，從而起到預(yù)防糖尿病的作用。劉磊等［46］應(yīng)用枸杞多糖灌胃以四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿病小鼠，探討了枸杞多糖對糖尿病小鼠的降糖作用和對胰島B細(xì)胞的保護(hù)作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)4周后血清胰島素（Ins）水平較治療前顯著上升，說明枸杞多糖確實(shí)改善了B細(xì)胞功能從而促進(jìn)了Ins的分泌。

枸杞多糖還可能通過提高機(jī)體SOD等抗氧化劑的活力，降低機(jī)體MDA的含量，增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力及清除氧化產(chǎn)物的能力，減輕或阻止自由基對胰島β－細(xì)胞的損傷、促進(jìn)胰島β－細(xì)胞的修復(fù)與再生來實(shí)現(xiàn)其降血糖作用［47］。汪建紅等［48］通過給試驗(yàn)小鼠灌胃高（80mg／kg·BW）、中（50mg／kg·BW）、低（20mg／kg·BW）劑量的黑果枸杞果實(shí)多糖研究其降血糖功效及其機(jī)制，21d后測定試驗(yàn)小鼠血清與肝臟的超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量和肝糖原水平等指標(biāo)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：黑果枸杞果實(shí)多糖對降低糖尿病小鼠血糖含量，增強(qiáng)血清和肝臟SOD活性，降低血清和肝臟MDA含量和促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)變?yōu)楦翁窃矫婢哂酗@著的效果。陳曉琴等［49］比較了枸杞多糖與抗糖藥物鹽酸二甲雙胍的降血糖作用及抗氧化能力，研究發(fā)現(xiàn)：和鹽酸二甲雙胍相比，枸杞多糖抗氧化能力較強(qiáng)而降血糖作用稍弱。低劑量組小鼠的血清SOD活力有顯著提高（P＜0.05），高劑量組血清MDA則極顯著降低（P＜0.01）。

此外，李朝暉等的細(xì)胞試驗(yàn)［50］表明，枸杞多糖具有較好的體外降血糖作用。Luo等［51］比較了枸杞果實(shí)浸出液、粗枸杞多糖和經(jīng)純化的枸杞多糖組分LBP－X對血糖的調(diào)節(jié)作用，試驗(yàn)取等量3種物質(zhì)灌胃制備好的糖尿病兔子模型，連續(xù)灌胃10d后測定血糖濃度，結(jié)果顯示枸杞浸出液、粗枸杞多糖和LBP－X均呈現(xiàn)良好的降血糖效果，其中LBP－X的降血糖作用比枸杞浸出液和粗枸杞多糖更為顯著。

3 展望

枸杞子中的多糖成分具有許多重要生理功能且無毒副作用，因此在臨床應(yīng)用和功能食品開發(fā)方面具有廣闊的應(yīng)用前景，備受國內(nèi)外研究者的青睞，但是由于枸杞多糖結(jié)構(gòu)復(fù)雜、純化后各組分樣品量小、分析成本較高等難點(diǎn)限制了對其更深入的研究?，F(xiàn)有枸杞多糖的研究成果主要集中在提取、分離純化條件的優(yōu)化、初級結(jié)構(gòu)的表征分析以及發(fā)揮藥效的推測方面。當(dāng)前對枸杞多糖的研究需從以下幾個方面展開：① 進(jìn)一步探索并建立系統(tǒng)的綠色環(huán)保、低廉高效的提取純化方法；② 強(qiáng)化枸杞多糖低級結(jié)構(gòu)的表征分析，建立系統(tǒng)可靠的研究手段和表達(dá)方法；探索枸杞多糖高級結(jié)構(gòu)的表征和描述，進(jìn)而研究枸杞多糖結(jié)構(gòu)、溶液行為與活性、功效之間的關(guān)系；③ 研究枸杞多糖發(fā)揮生理功效的作用機(jī)理，利用動物試驗(yàn)探索枸杞多糖在體內(nèi)的降解途徑以及以何種形式、在何部位發(fā)揮其功能作用；④ 加快開發(fā)以枸杞多糖為主要成分的藥品和功能性食品。

1 Wild S，Roglic G，Green A，et al.Global prevalence of diabetes，estimates for the year 2000and projections for 2030［J］.Diabetes Care，2004（27）：1 047～1 053.

2 劉銅華，呂仁和.中醫(yī)藥防治糖尿病及其并發(fā)癥的作用途徑［J］.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2000，23（3）：69～71.

3 張靜麗，王宏勛，張雯，等.靈芝、枸杞多糖復(fù)合抗氧化作用［J］.食品與機(jī)械，2004，20（6）：11～12.

4 山永凱.枸杞中綠原酸的提取工藝研究［J］.食品與機(jī)械，2012，28（5）：127～130.

5 張惟杰.糖復(fù)合物生化研究技術(shù)［M］.第二版.杭州：浙江大學(xué)出版社，2003：104～141.

6 王建華.枸杞多糖的結(jié)構(gòu)與保健功能評價［D］.武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2001.

7 張民，馬茜，王劍，等.枸杞多糖的純化及相對分子質(zhì)量研究［J］.中國食品添加劑，2012（1）：49～54.

8 朱彩平，張民，張聲華.枸杞多糖的組成及結(jié)構(gòu)分析［J］.中草藥，2006，37（6）：872～874.

9 彭強(qiáng)，呂曉鵬，黃琳娟，等.黑果枸杞多糖的純化工藝研究［J］.西北農(nóng)業(yè)學(xué)報，2012，21（2）：121～126.

10 Zhu hongwei，Zhang yunyi，Zhang jianwen，et al.Isolation and characterization of an anti－complementary protein－bound polysaccharide from the stem barks of Encomia ulmoides［J］.International Immunopharmacology，2008，8（9）：1 222～1 230.

11 王戰(zhàn)勇，閆松，商麗穎，等.枸杞多糖的提取純化及組成分析［J］.氨基酸與生物資源，2008，30（1）：22～24.

12 茍春林，茍金萍，張艷，等.枸杞多糖的提取分離及其組成研究［J］.寧夏農(nóng)林科技，2012，53（5）：89～92.

13 徐惠平，施松善，金紅英，等.枸杞多糖LBP－Ⅱ－b的分離與結(jié)構(gòu)表征［J］.上海中醫(yī)藥雜志，2013，47（1）：74～76.

14 高洪霞，劉軍海，李廣錄.枸杞多糖提取工藝的研究［J］.食品與機(jī)械，2008，24（5）：60～62.

15 黃文書，馮作山，李謹(jǐn)瑜.枸杞多糖提取條件的研究［J］.食品與機(jī)械，2007，23（3）：87～91.

16 Peng Q，Lv X P，Xu Q S，et al.Isolation and structural characterization of the polysaccharide LRGP1from Lycium ruthenicum［J］.Carbohydrate Polymers，2012（90）：95～101.

17 Li X L，Zhou A G.Evaluation of the antioxidant effects of polysaccharides extracted from Lycium barbarum ［J］.Med.Chem.Res.，2007（15）：471～482.

18 易劍平，畢雅靜，宋秀榮，等.蒽酮－硫酸法測定枸杞子多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)的研究［J］.北京工業(yè)大學(xué)學(xué)報，2005，31（6）：641～646.

19 魏苑，張盛貴.蒽酮－硫酸法測定枸杞多糖含量的研究［J］.食品工業(yè)科技，2011，32（3）：399～401.

20 陳開娟.不同等級枸杞中枸杞多糖的含量測定與比較［J］.海峽藥學(xué)，2011，23（8）：100～102.

21 孫平楠，周小玲，汪東風(fēng).一種水溶性茶多糖的單糖組成及糖醛酸含量的測定［J］.今日藥學(xué)，2008，18（1）：53～55.

22 李健，劉寧，陳平，等.香菇多糖單糖組成及含量的測定方法研究［J］.化學(xué)與黏合，2005，27（2）：71～74.

23 張錦文.紫外分光光度法測定枸杞中多糖含量［J］.亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2008，4（1）：30～31.

24 易劍平，葉曉，鐘儒剛.高效凝膠滲透色譜法測定枸杞多糖的相對分子質(zhì)量［J］.中草藥，2006，37（2）：214～215.

25 張小銳.枸杞多糖LBPF4－OL免疫調(diào)節(jié)靶細(xì)胞及其作用位點(diǎn)研究［D］.北京：中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院，2011.

26 Ouyang H X，Li Y Q，Xiao Q W.Simultaneous determination of monosaccharides and oligosaccharides in Lycium barbarum L.by high performance liquid chromatography［J］.J.Sichuan Univ（Med Sci Edi），2007，38（6）：1 040～1 042.

27 汪艷群.五味子多糖的分離、結(jié)構(gòu)鑒定及免疫活性研究［D］.沈陽：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)，2012.

28 Tikhomicrov M，Khorlin A Y.High performance liquid chromatography investigation of the amino acid，amino sugar and neutral sugar content in glycoprotein ［J］.Chromatogr，1978（167）：197～203.

29 陶樂平，丁在富，張部昌.氣相色譜在多糖結(jié)構(gòu)測定中的應(yīng)用［J］.色譜，1994，12（5）：351～354.

30 Anne Dell.Preparation and adsorption mass spectrometry of per methyl and per acetyl derivatives of oligosaccharides［J］.Methods in Enzymology，1991（193）：647～660.

31 Tina Salomonsen，Henrik Max Jensen，Dorthe Stenbaek，et al.Chemo metric prediction of alginate monomer composition：A comparative spectroscopic study using IR，Raman，NIR ［J］.Carbohydrate Polymers，2008，72（4）：730～739.

32 肖朱洋.多糖的結(jié)構(gòu)分析與構(gòu)效關(guān)系［J］.海峽藥學(xué)，2007，19（3）：98～100.

33 Stroop C J，Xu Q，Retzlaff M，et al.Strutral analysis and chemical depolymerization of the capsular polysaccharide of Streptes［J］.Carbohydrate Research，2002，337（4）：335～344.

34 Takahiro Matsumoto，Munenori Numata，Takahisa Anada，et al.Chemically modified polysacchadide schizophyllan for antisense oligonucleotides delivery to enhance the cellular uptake efficiency ［J］.Biochimica et Biophysica Acta （BBA）－General Subjects，2004，1 670（2）：91～104.

35 Golovchenko V V，Ovodova R G，Shashkov A S，et al.Structural studies of the pectic polysaccharide from duckweed Lemnaminor L［J］.Phytochemistry.2002，60（1）：89～97.

36 趙春久，李榮芷，何云慶，等.枸杞多糖的化學(xué)研究［J］.北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，1997，29（3）：231～233.

37 田庚元，王晨，馮宇澄.枸杞子糖蛋白的分離純化物理性質(zhì)及糖肽鍵特征［J］.生物化學(xué)與生物物理學(xué)報，1995，27（2）：201～205.

38 郭琦，孫潤廣，郭國赟，等.枸杞多糖分離純化及其結(jié)構(gòu)光譜分析與顯微學(xué)觀察［J］.中草藥，2012，43（4）：645～648.

39 Zou S，Zhang X，Yao W B，et al.Structure characterization and hypoglycemic activity of a polysaccharide isolated from the fruit of Lycium barbarum L.［J］.Carbohydrate Polymers，2010（80）：1 161～1 167.

40 趙蕊，李青旺，高大威，等.枸杞多糖對Ⅱ型糖尿病小鼠胰島細(xì)胞形態(tài)與功能的影響［J］.燕山大學(xué)學(xué)報，2007，31（4）：344～347.

41 劉磊，李青旺，趙蕊，等.枸杞多糖對糖尿病小鼠胰島細(xì)胞形態(tài)與功能的影響［J］.黑龍江畜牧獸醫(yī)，2008（3）：93～94.

42 王玲，張才軍，李維波，等.枸杞多糖－D對四氧嘧啶糖尿病小鼠高血糖的防治作用［J］.河北中醫(yī)，2000，22（2）：159～160.

43 羅瓊，李瑾瑋，張聲華.枸杞多糖－X組分對糖尿病家兔降血糖的效果［J］.營養(yǎng)學(xué)報，1997，19（2）：173～176.

44 孫桂菊，王少康，張勇，等.枸杞多糖、茶葉多糖混合物對Ⅱ型糖尿病大鼠降血糖作用及對糖尿病并發(fā)癥相關(guān)指標(biāo)的影響［J］.食品研究與開發(fā)，2003，24（2）：75～78.

45 孫桂菊，張勇，黃杰，等.枸杞多糖對Ⅱ型糖尿病大鼠腎臟保護(hù)作用及其機(jī)制研究［J］.營養(yǎng)學(xué)報，2006，28（1）：47～50.

46 劉磊，李青旺，趙蕊.枸杞多糖對糖尿病小鼠胰島細(xì)胞形態(tài)與功能的影響［J］.黑龍江畜牧獸醫(yī)，2008（3）：14.

47 Deng H B，Cui D P，Jiang J M，et al.Inhibiting effects of Achyranthes bidentata polysaccharide and Lycium barbarum polysaccharide on nonenzyme glycation in D－galactose induced mouse aging model［J］.Biomedical and Environmental Sciences，2003，16（3）：267～275.

48 汪建紅，陳曉琴，張蔚佼.黑果枸杞果實(shí)多糖降血糖生物功效及其機(jī)制研究［J］.食品科學(xué)，2009，30（5）：244～248.

49 陳曉琴.黑果枸杞果實(shí)多糖的制備與抗疲勞、降血糖生物功效的研究［D］.烏魯木齊：新疆師范大學(xué)，2007.

50 李朝暉，馬曉鸝，吳萬征.枸杞多糖降血糖作用的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究［J］.中藥材，2012，35（1）：124～127.

51 Luo Q，Cai Y，Yan J，et al.Hypoglycemic and hypolipidemic effects and antioxidant activity of fruit extracts from Lycium barbarum ［J］.Life Sci.，2004，76（2）：137～149.