CTGF在急性氨中毒患者血清中的表達(dá)及意義

張洪明 何 平 陳 紅

1.沈陽(yáng)市第九人民醫(yī)院，遼寧沈陽(yáng) 110024；2.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)盛京醫(yī)院，遼寧沈陽(yáng) 110024；3.沈陽(yáng)工業(yè)大學(xué)，遼寧沈陽(yáng) 110024

職業(yè)性急性氨中毒是在職業(yè)活動(dòng)中，短時(shí)間內(nèi)吸入高濃度氨氣后對(duì)呼吸道粘膜產(chǎn)生強(qiáng)烈的刺激作用，可表現(xiàn)為急性化學(xué)性氣管、支氣管炎，可出現(xiàn)喉頭水腫、肺泡水腫或肺間質(zhì)。損傷后的氣道周圍炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，釋放多種炎癥介質(zhì),引起的以呼吸系統(tǒng)損害為主的全身性疾病，常伴有眼和皮膚灼傷,嚴(yán)重者可出現(xiàn)急性呼吸窘迫綜合征，可以引起支氣管、肺的永久性損害[1]。近年發(fā)現(xiàn)的結(jié)締組織生長(zhǎng)因（Connective －tissue growth factor ，CTGF）具有促進(jìn)胞外基質(zhì)合成、成纖維細(xì)胞有絲分裂等功能，在肺、肝、腎等器官纖維化過(guò)程中具有重要作用[2]，但是否參與急性氨中毒的炎癥反應(yīng)尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察CTGF在急性氨中毒患者血清的表達(dá)變化，旨在初步揭示CTGF在急性氨中毒病理過(guò)程中的作用。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

2009年我市發(fā)生16人氨氣中毒事故，隨后7例男患、9例女患均于該院進(jìn)行搶救，年齡15～31歲，平均（25.2 ±5.2）歲，既往無(wú)病史。16例氨中毒患者按國(guó)家“職業(yè)性急性氨中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)”分級(jí)[1]，刺激反應(yīng)11例及輕度氨中毒組5例。對(duì)照組16例為健康者，從該院體檢中心募集，其中男7例，女9例，年齡19～31歲，平均年齡（27.3±6.4）歲。

1.2 方法

氨中毒患者入院后，抽取3 mL空腹靜脈血,放入試管中常溫凝固后離心（3000轉(zhuǎn)/分）10 min，分離血清,當(dāng)日測(cè)定。正常對(duì)照組同上處理。ELISA法檢測(cè)人血清CTGF，操作流程按說(shuō)明書進(jìn)行，試劑盒購(gòu)自上海森雄生物試劑公司，使用sunrise（奧地利）全自動(dòng)酶標(biāo)儀檢測(cè)，在波長(zhǎng)450 nm測(cè)得O D值，根據(jù)樣品O D值及標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測(cè)樣品，操作流程按說(shuō)明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 11．0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行，血清CTG F水平以（±s）表示，兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，P ＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

氨中毒患者CTGF的峰值水平均比正常對(duì)照組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）；如表1所示。

表1 病例組與對(duì)照組血清 CTGF含量比較

由表1顯示接觸氨氣患者血清CTGF濃度均比對(duì)照組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。CTGF隨病情加重含量升高。

3 討論

氨氣屬于堿性高溶解度氣體，具有強(qiáng)烈的刺激性和腐蝕性，接觸氨氣急性期輕則引起皮膚及黏膜的刺激癥狀，重則引起肺部損傷及氨中毒[1]。刺激性氣體導(dǎo)致肺泡1型細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞損傷，肺泡內(nèi)液體滲出，通氣血流比例失調(diào)，氣體交換功能下降，2型細(xì)胞增生肥大修復(fù)損傷的1型細(xì)胞，同時(shí)引起肺間質(zhì)炎癥改變并導(dǎo)致肺纖維化。肺纖維化是多細(xì)胞、多因子共同參與，經(jīng)過(guò)成纖維細(xì)胞異常增殖和轉(zhuǎn)化，導(dǎo)致肺組織結(jié)構(gòu)重建失敗的結(jié)果[3]。在參與肺纖維化的細(xì)胞因子中，CTGF是近年發(fā)現(xiàn)的一種新的可刺激成纖維細(xì)胞增殖和分泌膠原的生長(zhǎng)因子[4]。本研究顯示氨中毒病例組的CTGF水平高于對(duì)照組，提示CTGF參與了氨中毒的病情進(jìn)展，與氨中毒纖維化的發(fā)生發(fā)展可能相關(guān)。在急性氨中毒發(fā)病過(guò)程中CTGF上升的機(jī)制尚不清楚。已有研究表明TGF－β1是一種作用廣泛的生長(zhǎng)因子，在某些炎癥過(guò)程中過(guò)度表達(dá)，可能誘導(dǎo)其下游因子CTGF表達(dá)上調(diào)，并由后者作為下游效應(yīng)介質(zhì)作用于結(jié)締組織和成纖維細(xì)胞，刺激成纖維細(xì)胞增殖和細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）合成最終導(dǎo)致組織器官纖維化[5]。

以往氨中毒診斷分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)主要依靠皮膚、眼、呼吸系統(tǒng)臨床表現(xiàn)及胸部X線征象[6]。本實(shí)驗(yàn)中診斷為刺激反應(yīng)患者中只有2例CTGF值在定診急性氨中毒患者的結(jié)果范圍中，分別存在肝功能改變和CK升高，余診斷急性輕度氨中毒患者CTGF水平均高于刺激反應(yīng)者。氨中毒是一個(gè)對(duì)多系統(tǒng)損傷的疾病。CTGF存在于心、腦、肺、肝、腎、子宮、胰腺、結(jié)締組織等多種組織器官，其中腎臟含量最高。成纖維細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、腎小球系膜細(xì)胞（MC）和某些腫瘤細(xì)胞等均可合成CTGF[7]。不同種類細(xì)胞產(chǎn)生的CTGF的功能不盡相同。其通過(guò)自分泌、旁分泌途徑發(fā)揮下列生物學(xué)功能：①促進(jìn)細(xì)胞增殖、分化。②介導(dǎo)細(xì)胞黏附和遷移。③提高細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)含量，誘導(dǎo)基質(zhì)沉積，進(jìn)而促進(jìn)器官纖維化。④其他：促進(jìn)血管形成以及胚胎發(fā)育，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，創(chuàng)傷修復(fù)等。正常情況下體內(nèi)的CTGF表達(dá)很低或無(wú)表達(dá)。在病理狀態(tài)下，CTGF的過(guò)度表達(dá)則與某些纖維化或增殖性疾病的發(fā)生密切相關(guān)，如腎纖維化、動(dòng)脈粥樣硬化、肺纖維化、肝纖維化等[8]。CTGF測(cè)得值可能整體上反應(yīng)損傷的嚴(yán)重程度。提示臨床上應(yīng)用血清CTGF含量的變化，對(duì)急性氨中毒的診斷、損傷程度評(píng)價(jià)可能有一定的參考價(jià)值。但其在其作用的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑、作用發(fā)生的階段、早期干預(yù)能否預(yù)防氨中毒的損傷以及如何延緩其進(jìn)展尚待進(jìn)一步研究。

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