愈傷接骨丹薄層色譜定性鑒別研究

方 磊 ，姚 蓉 ，羅疆南 ，丁 野

(1.湖南省食品藥品檢驗研究院，湖南 長沙 410001;2.湖南食品藥品職業(yè)技術學院，湖南 長沙 410004)

愈傷接骨丹由黃芩、酒大黃、蘇木、桃仁、當歸等13味組方，為醫(yī)院制劑，具有活血祛瘀、止痛功效，主要用于各種損傷、局部腫痛、骨折早期。原質量標準僅有顯微鑒別和化學鑒別，無薄層色譜鑒別項?，F(xiàn)我院參考相關資料[1]，采用薄層色譜法對其中黃芩、大黃、蘇木、赤芍、乳香5味中藥進行了定性鑒別研究，報道如下。

1 儀器與試藥

CG－300型超聲波清洗器(張家港市港威超聲有限公司);硅膠G薄層板(青島海洋化工廠);聚酰胺薄膜(浙江省臺州市路橋四甲生化塑料廠)。乳香對照藥材(批號為120970－200403)，黃芩對照藥材(批號為967－9201)，黃芩苷對照品(批號為110715－200514)，大黃對照藥材(批號為967－9201)，大黃素甲醚對照品(批號為 110758－200610)，大黃素對照品(批號為 110756－200110)，赤芍對照藥材(批號為121093－200402)，芍藥苷對照品(批號為 110736－200933)，蘇木對照藥材(批號為 121067－200503)，均由中國藥品生物制品檢定所提供;水為純化水，其他化學試劑均為分析純。愈傷接骨丹制劑及陰性樣品由某中醫(yī)醫(yī)院提供。

2 方法與結果

2.1 黃芩

取本品適量，研細，取5 g，加乙酸乙酯－甲醇(3∶1)的混合溶液30 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇2 mL使溶解，取上清液作為供試品溶液。取黃芩對照藥材1 g，同法制成對照藥材溶液。取不含黃芩的陰性對照樣品，同法制成缺黃芩的陰性對照品溶液。另取黃芩苷對照品適量，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國藥典(一部)》附錄ⅥB]試驗，吸取上述4種溶液各2 μL，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯－乙酸乙酯－甲醇－甲酸(10∶3∶1∶2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照品溶液無干擾(見圖1 A)。

2.2 大黃

取本品3 g，研細，加甲醇30 mL，超聲處理20 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水50 mL使溶解，加鹽酸5 mL，置水浴中加熱30min，立即冷卻，置分液漏斗中，用乙醚振搖提取2次，每次20mL，合并乙醚液，揮干，殘渣加乙酸乙酯2 mL使溶解，作為供試品溶液。另取大黃對照藥材0.05 g，同法制成對照藥材溶液。取不含大黃的陰性對照樣品，同法制成缺大黃的陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國藥典(一部)附錄ⅥB]試驗，吸取上述3種溶液各2 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯－乙酸乙酯－甲酸(15∶2∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上顯相同的橙黃色熒光斑點(見圖1 B)，氨蒸氣中熏后斑點變?yōu)榧t色，陰性對照品溶液無干擾(見圖1 C)。

2.3 蘇木[2]

取本品5 g，研細，加甲醇30 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取蘇木對照藥材0.5 g，同法制成對照藥材溶液。取不含蘇木的陰性對照樣品，同法制成缺蘇木的陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國藥典(一部)》附錄ⅥB]試驗，吸取上述3種溶液各3 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷－丙酮－甲酸(10∶4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，放置12 h后日光下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上顯相同顏色的斑點，陰性對照品溶液無干擾(見圖1 D)。

2.4 赤芍

取芍藥苷對照品適量，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。取不含赤芍的陰性對照樣品，同法制成缺赤芍的陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國藥典(一部)》附錄ⅥB]試驗，吸取蘇木鑒別項下供試品溶液與上述兩種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷－乙酸乙酯 － 甲醇 － 甲酸(40 ∶5 ∶10 ∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應的位置上顯相同顏色的斑點，陰性對照品溶液無干擾(見圖1 E)。

2.5 乳香

取本品5 g，研細，加乙醇30 mL，超聲處理30 min，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取乳香對照藥材0.2 g，同法制成對照藥材溶液。取不含赤芍的陰性對照樣品，同法制成缺赤芍的陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國藥典(一部)》附錄ⅥB]試驗，取上述3種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷－乙酸乙酯(9∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1%4－二甲氨基苯甲醛的2%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應的位置上顯相同顏色的斑點，陰性對照品溶液無干擾(見圖1 F)。

圖1 薄層色譜圖

3 討論

本品組方較復雜，相互干擾因素較多，在試驗過程中，應用多種展開系統(tǒng)和提取方法，摸索出方中黃芩、大黃、蘇木、赤芍、乳香5種中藥的薄層色譜定性鑒別方法。在展開劑摸索過程中，用毒性較小的甲苯、環(huán)己烷、二氯甲烷分別取代苯、正己烷、三氯甲烷，除赤芍薄層色譜鑒別用二氯甲烷取代未能獲得滿意的分離條件外，其余均取得較好效果。同時考察了不同溫濕度條件下的薄層色譜效果，結果表明方法重現(xiàn)性好，專屬性強，可有效控制愈傷接骨丹的產品質量。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:282.

[2]陳玉平，畢 丹，屠鵬飛.蘇木的質量標準研究[J].中國中藥雜志，2010，35(16):2 068 － 2 071.