光纖藥物溶出度實時測定儀監(jiān)測乙酰螺旋霉素片實時溶出度

楊 靜，苗愛東，徐軼飛

乙酰螺旋霉素屬大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，臨床用于治療需氧革蘭陽性球菌和桿菌所致的感染。近年利用光纖藥物溶出儀測定藥物溶出度的報道很多［1-5］，它能實現(xiàn)藥物的連續(xù)、在線、實時分析，是評價藥物動態(tài)溶出過程的有效方法，也是衡量工藝穩(wěn)定性的重要手段。本文采用光纖藥物溶出度實時測定儀對5個廠家6個批次的乙酰螺旋霉素片的溶出過程進(jìn)行實時、在線分析，以期評價藥品內(nèi)在質(zhì)量。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 FODT-601光纖藥物溶出度實時測定儀(上海富科思分析儀器有限公司);UV-2450島津紫外－可見分光光度計(日本島津公司);MettLer-AG285型電子分析天平 (MettLer公司)。

1.2 試藥 乙酰螺旋霉素標(biāo)準(zhǔn)品(中國藥品生物制品檢定所，批號:130347-200403，含量:78.3%);乙酰螺旋霉素片:均為國產(chǎn)，規(guī)格:0.1 g/片。A廠，A1、A2，批 號:080309、0656006;B 廠，批 號:1070186;C廠，批號:20060804;D廠，批號:061003;E廠，批號:070625。純化水自制。

2 方法與結(jié)果

采用FODT-601光纖藥物溶出度實時測定儀，按照《中華人民共和國藥典》2010年版中乙酰螺旋霉素片溶出度測定條件［6］，以《中華人民共和國藥典》2010年版(二部)附錄XC第一法(轉(zhuǎn)籃法)，對樣品進(jìn)行測定。

2.1 檢測波長及探頭的選擇 精密稱取乙酰螺旋霉素標(biāo)準(zhǔn)品35.42 mg，置250 ml量瓶中，用鹽酸溶液(稀鹽酸24→1000)制成 110.9 μg/ml的對照品溶液，即相當(dāng)于900 ml溶出介質(zhì)中乙酰螺旋霉素片100%溶出時的濃度。采用 FODT-601在220～600 nm波長范圍掃描吸收光譜，選擇最大吸收波長232 nm為測定波長，與國家藥品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的測定波長一致。在550 nm處無吸收，故選擇550 nm作為參比波長。根據(jù)朗伯比爾定律結(jié)合實踐，確定最佳光程為2.0 cm，即選用1.0 mm的光纖探頭。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 精密稱取乙酰螺旋霉素標(biāo)準(zhǔn)品69.97 mg，置250 ml量瓶中，用鹽酸溶液溶解并定容，制成219.15 μg/ml的儲備液，分別精密量取儲備液 5、10、20、30、40、50、60 ml置 100 ml量瓶中，用鹽酸溶液稀釋至刻度得10.96、21.91、43.83、65.74、87.66、109.58、131.49 μg/ml的乙酰螺旋霉素系列溶液，相當(dāng)于 9.86%、19.72%、39.45%、59.17%、78.90%、98.62%、118.34%的藥物溶出百分率。以鹽酸溶液為空白，分別取上述溶液，在6個通道上同時測定在232 nm波長處的吸收度，系統(tǒng)自動回歸得每個通道的線性方程(Y=bX+a，式中Y:溶出百分率，X:吸收度)，見表1。結(jié)果表明乙酰螺旋霉素濃度在10.96～131.49 μg/ml范圍內(nèi)時，濃度與吸收度呈良好的線性關(guān)系。

表1 6個通道的乙酰螺旋雷素溶出度與吸收度線性方程及相關(guān)系數(shù)

2.3 精密度試驗 將光纖探頭放入上述系列乙酰螺旋霉素溶液中，在FODT-601“對照品”模式考察日內(nèi)、日間精密度，其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)分別為0.4%和 0.9%(n=5)。

2.4 溶出度測定 以脫氣后的鹽酸溶液(稀鹽酸24→1000)900 ml為溶出介質(zhì)，溫度:37℃，轉(zhuǎn)籃法，轉(zhuǎn)速100 r/min，溶出時間45 min，檢測波長232 nm，溶出限度75%。在每批樣品中隨機取樣12片，分別投入轉(zhuǎn)籃中，應(yīng)用光纖藥物溶出度實時測定儀每隔30 s自動記錄吸光度及溶出度。

2.5 回收率試驗 采用FODT-601，照2.4項下的溶出度測定條件對供試品C進(jìn)行實時溶出度測定，供試品C在45 min時溶出百分率為99.1%，即溶出液的濃度為110.1 μg/ml。精密量取在45 min時的溶出液25 ml，置50 ml量瓶中，再分別精密加入555.6 μg/ml的對照品溶液 3、5、7 ml，用水稀釋至刻度，搖勻作為加樣供試品溶液(每個濃度各做3份)。在光纖藥物溶出度測定儀上分別測定供試品溶液及加樣供試品溶液的吸收度并求得其含量，計算對照品溶液的加入量及回收率。低、中、高3種濃度的回收率結(jié)果見表2。

表2 乙酰螺旋霉素片的回收率測定結(jié)果

2.6 各廠家產(chǎn)品的實時溶出度情況 5個廠家6個批次的乙酰螺旋霉素片在45 min時平均溶出率均達(dá)到75%，符合《中華人民共和國藥典》2010年版的規(guī)定。各廠家樣品間的實時溶出曲線存在較大差異，A1與D兩個樣品的溶出曲線批內(nèi)差異都較大，提示其質(zhì)量均一性較差。C廠生產(chǎn)的樣品實時溶出曲線重合性相對較好，說明制劑工藝較穩(wěn)定、均一。A廠生產(chǎn)的2批次樣品，溶出過程明顯不同，其中A2溶出較快，10 min即達(dá)平臺;A1則在16 min時才緩慢溶出，而且片間差異較大，說明該廠的制劑工藝不穩(wěn)定。見圖1。

圖1 5個廠家6批乙酰螺旋霉素片的實時溶出曲線

2.7 溶出曲線的統(tǒng)計分析 樣品 A2、B、C、E在15 min內(nèi)平均溶出率均超過85%，體內(nèi)吸收與溶出速率無關(guān)，采用單點比較法即可，無需進(jìn)行溶出曲線的比較，否則易得到錯誤結(jié)論。而A1與D兩個樣品的批內(nèi)差異都較大，在各取樣點的組內(nèi)溶出值RSD均不符合要求，因此，6批樣品的溶出曲線相似性均不能采用相似因子(f2)法進(jìn)行統(tǒng)計分析。

3 討論

通過對5個廠家6個批次的乙酰螺旋霉素片進(jìn)行實時溶出度測定，雖然體外溶出度均符合《中華人民共和國藥典》2010年版的規(guī)定，但各廠家產(chǎn)品的實時溶出曲線批內(nèi)、批間均存在明顯差異。同一種藥物由多個廠家生產(chǎn)已是一種普遍現(xiàn)象，由于生產(chǎn)廠家眾多，制劑工藝很難達(dá)到統(tǒng)一，可能是臨床普遍反映不同廠家的產(chǎn)品不僅起效時間不同，而且療效差距甚大的主要原因［7］?！吨腥A人民共和國藥典》中規(guī)定的溶出度檢查也僅是測定藥物的終點溶出度，不能反映藥物溶出的全過程，溶出曲線是嚴(yán)格控制藥品質(zhì)量的一種科學(xué)手段與有效方法。因此，要積極開展藥品上市后再評價工作，提高溶出度評價標(biāo)準(zhǔn)，完善藥物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)評價體系，促進(jìn)制藥企業(yè)改進(jìn)制劑工藝，全面提高產(chǎn)品質(zhì)量，保證臨床用藥的有效性與一致性。

溶出度是評價藥物質(zhì)量的一個內(nèi)在指標(biāo)，它已經(jīng)成為評價固體制劑生物利用度的體外方法。光纖藥物溶出度實時測定儀是一種新型的藥物溶出度測定裝置，實現(xiàn)了對藥物溶出行為的監(jiān)測。它的連續(xù)自動化檢測和分析，與現(xiàn)有的溶出度測定儀相比，不需取樣分析，不需過濾，降低了勞動強度，消除了人為因素對測定結(jié)果的影響，提高了分析檢測的準(zhǔn)確性和精密度并真正實現(xiàn)了原位實時的溶出監(jiān)測，可反映藥物的真實溶出過程［8］，是評價藥物制劑的安全性和有效性、提高藥品監(jiān)管水平的有效手段。

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［5］李建光，姚軍，艾爾肯·依不拉音，等.光纖浸入法過程監(jiān)測利福平膠囊的體外溶出度［J］.新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2008，31(2):177-179.

［6］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典［K］.二部.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:9.

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［8］楊淑梅，陳艷芬.過程分析阿莫西林分散片的溶出度［J］.新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2010，33(6):631-633.