冠心病合并糖尿病患者血清sLR11水平變化及其與冠脈病變的關(guān)系

許瑾瑾，張菲斐

(鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院心內(nèi)科 河南鄭州 450052)

臨床實踐表明，合并糖尿病的冠心病患者冠脈病變彌漫狹窄、增生、鈣化嚴(yán)重，但具體機(jī)制尚未完全明了。長期的高血糖狀態(tài)使細(xì)胞生長因子及炎癥因子產(chǎn)生過多，使調(diào)節(jié)細(xì)胞遷移和增生的信號通路異常［1］，可能與冠心病合并糖尿病患者冠脈病變程度嚴(yán)重有關(guān)。有研究報道［2］，低密度脂蛋白受體(low density lipoprotein receptor，LDLR)家族成員LR11在血管平滑肌細(xì)胞(smooth muscle cells，SMCs)的遷移、增生過程中起重要作用，臨床研究表明血清可溶性形式sLR11與頸動脈粥樣斑塊形成密切相關(guān)，但血清sLR11水平升高是否與冠心病合并糖尿病患者冠脈病變程度相關(guān)尚未見報道。本研究通過檢測冠心病合并糖尿病患者血清sLR11水平變化并結(jié)合冠狀動脈造影結(jié)果進(jìn)行相關(guān)分析，旨在討論冠心病合并糖尿病患者血清sLR11水平及與其冠脈病變程度的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 研究對象 選取2011年10月至2012年5月在鄭大第一附屬醫(yī)院心內(nèi)科住院并行冠脈造影患者102例，對照組25例，男性16例，女性9例，年齡(57.41±7.25)歲。單純冠心病組48例:男性36例，女性12例，年齡(66.52±7.25)歲。冠心病合并糖尿病組29例:男性20例，女性9例，年齡(62.42 ±9.62)歲。冠脈未見明顯狹窄組為對照組;單純冠心病組:選擇性冠狀動脈造影左主干狹窄＞30%，或其他3支至少有1支冠狀動脈狹窄＞50%;根據(jù)造影結(jié)果入選標(biāo)準(zhǔn)診斷為冠心病組且符合1999年WHO糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)。以上3組均排除白血病、惡性腫瘤、阿爾茨海默病、嚴(yán)重肝腎功能不全、嚴(yán)重感染、自身免疫性疾病、急慢性心功能不全等。所有受試患者均測定血脂、空腹血糖(FPG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)。

1.2 標(biāo)本的收集及處理 所有入選受試患者空腹12 h肘靜脈取血3～5 ml干燥試管，3 000 r/min離心10 min后取血清，－80℃保存待測。空腹血糖(FPG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDLC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDLC)等生化指標(biāo)，由本院臨床檢驗中心全自動生化儀測定。

1.3 可溶性低密度脂蛋白受體檢測 用ELISA法檢測血清sLR11(試劑盒購自美國R＆D公司)，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作，在96孔板中依次加入待測樣品及標(biāo)準(zhǔn)品、Tris緩沖液、反應(yīng)底物，37℃水浴30 min后加入終止液及顯色液，室溫孵育10 min再于波長450 nm處讀取數(shù)據(jù)，根據(jù)吸光度值換算成濃度，檢測符合實驗室質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。

1.4 冠狀動脈病變程度評定 采用標(biāo)準(zhǔn)Judkins法對每血管至少3個以上多體位投照。由2名或2名以上有經(jīng)驗的醫(yī)師對冠脈病變程度定量評定，采用Gensini積分系統(tǒng)［3］對每支血管狹窄程度進(jìn)行定量評定，各病變支得分總和即為患者冠脈病變狹窄程度總積分。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，正態(tài)分布的計量資料以±s表示，兩組間均數(shù)比較采用t檢驗，多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析，非正態(tài)分布資料的相關(guān)性分析采用Speaman秩相關(guān)。P＜0.05有差異性統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組一般臨床資料比較 各組間性別比、年齡、血壓、體重指數(shù)(BMI)、TG、TC、HDL-C和 LDL-C 差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。冠心病合并糖尿病組FPG及HbA1c高于單純冠心病組及對照組(P＜0.05)，見表 1。

2.2 3組血清sLR11水平比較 冠心病合并糖尿病組、單純冠心病組血清sLR11水平顯著高于對照組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P ＜0.01，P ＜0.05)，見表2。

表1 3組一般臨床資料分析 (±s)

表1 3組一般臨床資料分析 (±s)

注:與對照組、冠心病組比較，*P ＜0.05。

指標(biāo) 對照組(n=25)冠心病組(n=48)冠心病合并糖尿病組(n=29)性別(男)16 36 20年齡(歲) 57.41 ±7.25 66.52 ±7.25 62.42 ±9.62 BMI(kg/m2) 24.03 ±1.41 25.12 ±1.81 25.33 ±1.90 HP(%) 56.31 63.83 58.75 TG(mmol/L) 1.52 ±1.03 1.59 ±1.31 1.85 ±1.63 TC(mmol/L) 3.75 ±1.20 4.07 ±1.36 4.31 ±1.26 HDL-C(mmol/L) 1.21 ±0.53 1.17 ±0.33 1.08 ±0.29 LDL-C(mmol/L) 2.35 ±0.24 2.39 ±0.72 2.61 ±0.59 FPG(mmol/L) 4.82 ±0.53 5.31 ±0.59 7.74 ±1.35*HbA1c(%) 5.45 ±0.47 5.62 ±0.55 8.19 ±1.38*

表2 3組患者血清sLR11水平比較 (±s)

表2 3組患者血清sLR11水平比較 (±s)

注:與對照組比較，*P ＜0.05，#P ＜0.01;與冠心病組比較，#P ＜0.05。

組別 n sLR11濃度(ng/ml)對照組25 16.09 ±2.98冠心病組 48 27.21 ±6.23*冠心病合并糖尿病組29 35.62 ±9.80#

2.3 血清sLR11水平與Gensini評分的關(guān)系 冠心病合并糖尿病組(r=0.855，P＜0.01)及單純冠心病組(r=0.570，P ＜0.01)血清 sLR11 水平與 Gensini評分均呈正相關(guān)。

2.4 血清sLR11水平與HbA1c的關(guān)系 冠心病合并糖尿病患者血清sLR11水平與HbA1c呈正相關(guān)(r=0.746，P ＜0.01)。

3 討論

冠狀動脈狹窄起始步驟是內(nèi)皮受損，但冠狀動脈狹窄進(jìn)展主要是與內(nèi)膜的增厚有關(guān)。研究表明［4］，血管SMCs從中膜遷移至內(nèi)膜是動脈粥樣硬化形成的關(guān)鍵步驟。Bujo H在1996年［5］發(fā)現(xiàn)一種新的 LDL受體:LR11，主要由內(nèi)膜 SMCs、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞分泌，有跨膜和可溶性兩種形式，可溶性形式在循環(huán)中可被檢測到，稱為sLR11，它可通過誘導(dǎo)SMCs的遷移和增殖導(dǎo)致動脈粥樣硬化。國外研究表明［6］，高膽固醇可誘導(dǎo)sLR11水平升高，且在動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)的內(nèi)膜SMCs高表達(dá)sLR11mRNA，特別在病灶深處，并且以未成熟SMCs表達(dá)最高，說明sLR11參與了動脈粥樣硬化斑塊的形成。

本研究還發(fā)現(xiàn)，在冠心病合并糖尿病患者中血清sLR11水平與HbA1c呈正相關(guān)。HbA1c是血紅蛋白在高血糖的作用下發(fā)生緩慢連續(xù)的非酶促糖化反應(yīng)的產(chǎn)物，其水平升高說明患者長期處于高血糖狀態(tài)。研究表明［7］，HbA1c與動脈粥樣硬化及冠心病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，長期的高血糖狀態(tài)使炎癥因子及生長因子產(chǎn)生過多，增加了細(xì)胞的粘附、遷移及增殖能力。研究證實［8］，高血糖狀態(tài)促進(jìn)血小板源性生長因子-BB(platelet-derived growth factor BB，PDGF-BB)表達(dá)增強(qiáng)，動物實驗證實［9］，PDGF-BB可誘導(dǎo)動脈粥樣硬化邊緣的內(nèi)膜SMCs過度表達(dá)sLR11，從而提高uPAR水平促進(jìn)SMCs遷移。而且，PDGF-BB作為調(diào)節(jié)細(xì)胞生長和分化的生長因子，可以誘導(dǎo)血管SMCs增殖和遷移，從而引起動脈內(nèi)膜增厚。上述機(jī)制可能是冠心病合并糖尿病患者冠脈病變更加嚴(yán)重的原因。既往有研究表明［7］，血清sLR11水平與HbA1c呈正相關(guān)，且多項研究表明［10］，高血糖狀態(tài)可能直接誘導(dǎo)sLR11的表達(dá)。但兩者共同對冠脈病變程度的影響尚未見相關(guān)報道。本研究進(jìn)一步證實，血清sLR11水平除可反映血糖水平外，還與冠脈病變嚴(yán)重程度密切相關(guān)，說明血清sLR11可作為冠心病合并糖尿病患者冠脈病變嚴(yán)重程度的預(yù)測因子。

綜上所述，sLR11在冠心病合并糖尿病患者中顯著升高，且與冠脈病變程度呈正相關(guān)。說明血清sLR11水平可反映冠脈病變嚴(yán)重程度，同時也進(jìn)一步證明 sLR11水平與高血糖有關(guān)。因此，測定血清sLR11水平有可能成為評估冠心病合并糖尿病病冠脈病變嚴(yán)重程度的新的預(yù)測標(biāo)志物和尋找新的有效治療手段提供科學(xué)根據(jù)。

［1］ Takahashi M，Bujo H，Jiang M，et al.Enhanced circulating soluble LR11 in patients with diabetic retinopathy［J］.Am J Ophthalmol，2012 ，154(1):187-192.

［2］ Matsuo M，Ebinuma H，F(xiàn)ukamachi I，Jianq M，et al.Development of an immunoassay for the quantification of soluble LR11，a circulating marker of atherosclerosis［J］.Clin Chem，2009，55(10):1801-1808.

［3］ Gensini G G.A more meaningful scoring system for determining the severity coronary heart disease［J］.Am J Cardiol，1983，51(3):606-607.

［4］ Ross R.Atherosclerosis-an inflammatory disease［J］.N Engl J Med ，1999，340:115-126.

［5］ Yamazaki，Bujo H，Seimiya K，et al.Elements of neural adhesion molecules and a yeast vacuolar protein sorting receptor are present in a novel mammalian low density lipoprotein receptor family member［J］.J Biol Chem，1996 ，271(40):24761-24768.

［6］ Mao Takahashi，Hideaki Bujo，Meizi Jiang，et al.Enhanced circulating soluble LR11 in patients with coronary organic stenosis［J］.Atherosclerosis，2010，210:581-584.

［7］ Trommsdorff M，Gotthardt M，Hiesberger T，et al.Reeler/Disabledlike disruption of neuronal migration in knockout mice lacking the VLDL receptor and ApoE receptor 2［J］.Cell，1999，97:689-701.

［8］ Inaba T，Ishibashi S，Gotoda T，et al.Enhanced expression of platelet-derived growth factor-beta receptor by high glucose.Involvement of platelet-derived growth factor in diabetic angiopathy［J］.Diabetes，1996，45:507-512.

［9］ Zhu Y，Bujo H，Yamazaki H，et al.Enhanced expression of the LDL receptor family member LR11 increases migration of smooth muscle cells in vitro［J］.Circulation，2002，105:1830-1836.

［10］ Kawano M，Koshikawa T，Kanzaki T，et al.Diabetes mellitus induces accelerated growth of aortic smooth muscle cells:association with over expression of PDGF beta-receptors［J］.Eur J Clin Invest，1993，23:84-90.