黨參對小鼠抗疲勞及耐缺氧作用的觀察

韓玉娟 ，常洪 ，黃紀勇 ，孫蓉峰 ，張桂林 ，呂芳 ，梅春麗 ，寧康健

（1.廬山區(qū)畜牧獸醫(yī)局，江西 九江 332000；2.安徽科技學院）

黨參(Codonopsis)為桔梗科植物黨參的干燥根，其味甘、性平，入脾、肺二經，具有補中益氣、生津和胃、健脾益肺之功效，主治脾肺虛弱、氣短心悸、食少便溏、虛喘咳嗽、內熱消渴等癥[1]。黨參在臨床應用具有多種功能的作用，這是與黨參含有多糖和構成營養(yǎng)物質的多種氨基酸（賴氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸等）、多種無機元素有關。這些是黨參作為補益的藥物基礎，其中菊糖不僅是營養(yǎng)素而且為佐劑、鐵、銅、鈷等微量元素，對血液的形成有重要的影響；鈣可促進生長發(fā)育和提高性功能；鉀、鈉、鈣、鎂等元素對調節(jié)神經、肌肉的功能和酶代謝，以及維持水電解質平衡、保持人體環(huán)境有重要作用[2]。

黨參的醇沉液、水煎液皮下注射或口服，可使兔的紅細胞增加。此外，黨參液灌注小鼠胃，亦能使紅細胞增加，促進造血機能，血紅蛋白顯著增加[3]。皮下注射可使白細胞、網織細胞顯著增加[4]。黨參能增加網狀內皮系統(tǒng)的吞噬功能，故能提高機體的抵抗力抗病能力[5]。傅盼盼等[3]研究表明黨參多糖可以很好地清除氧自由基，同時SOD 活性升高，MDA 含量減少。

在大量動物實驗研究中發(fā)現，黨參還有抗高溫、升高血糖、促進血凝、調節(jié)胃腸道及抗?jié)兊淖饔肹6，7]。黨參堿具有明顯的降血壓作用，其提取物能提高心輸血量而不增加心率，并能增加腦、下肢和內臟血液量。

此實驗通過口服黨參水煎液和腹腔注射黨參水煎醇沉液，觀察黨參對小鼠抗疲勞和耐缺氧的作用，旨在擴大其應用價值，為黨參在畜牧生產及獸醫(yī)臨床中的應用提供實驗依據。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

昆明種健康小鼠，體重22±2g，由安徽科技學院實驗動物中心提供；小鼠日糧由碭山某飼料公司提供，營養(yǎng)水平見表1。

表1 小鼠日糧營養(yǎng)水平 %

1.2 供試藥品

黨參（Codonopsis）產地：甘肅（安徽海鑫中藥飲片有限公司，生產批號：080901）；鈉石灰（上?；瘜W試劑采購供應站）；凡士林；無水乙醇（蚌埠化學試劑廠，批號：20050829）。

1.3 儀器

旋轉蒸發(fā)器RE52－98（江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司）；SHB－Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長城科工貿有限公司）；離心機（TDL80－2B型，上海安亭科學儀器廠）；YP600型雙圓牌電子天平（上海精科電子設備有限公司）；密閉型廣口瓶、剪刀、線、注射器、負重物、秒表等。

1.4 試驗設計

1.4.1 黨參水煎液準備。稱取黨參200g，加適量水浸泡 30min，煎煮 3次，每次分別為 60、40、20min。合并濾液，蒸發(fā)濃縮至200mL(每毫升含生藥1g)，離心（4 000r/min）10min,取100mL 上清液裝瓶，消毒備用。

1.4.2 黨參水煎醇沉液的制備。取100 g 黨參水煎液，加入無水乙醇，使含醇量達60%（體積分數），靜置24 h，置于旋轉蒸發(fā)器回收乙醇，離心（4 000 r/min），定容至100mL。再加無水乙醇使含醇量達80%，二次醇沉淀過程同上，定容至原體積（含生藥1g/mL）裝瓶高壓消毒備用。

1.4.3 分組與處理。取小鼠160只，體重22±2g，隨機均分16 組，每4 小組為一組實驗組，共4 組實驗組。在4 組實驗中，Ⅰ組為對照組，分別灌胃和腹腔注射等量生理鹽水，Ⅱ～Ⅳ組分別按5.0（低劑量）、10.0（中劑量）、20.0（高劑量）g/kg 劑量分別灌胃和腹腔注射黨參水煎液和黨參醇沉液，1次/d，連續(xù)給藥3d，于末次給藥后30min 后，依次測定小鼠負重負重游泳時間和耐缺氧時間，觀察并記錄其抗疲勞能力及缺氧環(huán)境中的存活時間。

1.4.4 小鼠負重負重游泳時間測定方法。各組最后一次給藥后30min，小鼠尾根部束體重5%的負重物，然后將小鼠放入玻璃缸（50cm×50cm，水深40cm，常溫），當小鼠頭部沉入水中10s 不能浮出水面者即為體力耗竭，從開始游泳到體力耗竭的時間記為小鼠負重游泳時間。

1.4.5 小鼠耐缺氧時間測定方法[8，9]。各組最后一次給藥后30min，將小鼠放入盛有15g 鈉石灰的500mL磨口廣口瓶中（每瓶1 鼠），用凡士林密封瓶口后開始計時，用秒表記錄從瓶口密封到小鼠死亡的時間。

1.5 數據處理

試驗數用平均數±標準差表示，采用SPSS11.0軟件進行t 檢驗，比較組間差異。

2 結果

2.1 腹腔注射黨參水煎醇沉液對小鼠負重游泳時間的影響

腹腔注射黨參水煎醇沉液各劑量組小鼠負重游泳時間與對照組比較有一定的延長，與對照組比較，低、中、高劑量組都有極顯著延長（P＜0.01），與低劑量比較，高劑量小鼠負重游泳時間明顯延長（P＜0.01）；說明3種劑量的黨參醇沉液均有明顯的抗疲勞作用。（見表2）

2.2 腹腔注射黨參水煎醇沉液對小鼠耐缺氧時間的影響

腹腔注射黨參水煎醇沉液各劑量組小鼠的耐缺氧時間與對照組比較均有一定的延長，與對照組比較，低、中、高劑量組都顯著延長（P＜0.01）；與低劑量組比較，中、高劑量耐缺氧時間縮短（P＜0.01）；說明3種劑量黨參水煎醇沉液均能提高小鼠耐缺氧的能力，以小劑量組最佳。（見表3）

表3 腹腔注射黨參水煎醇沉液對小鼠耐缺氧時間的影響

2.3 口服黨參水煎液對小鼠負重游泳時間的影響

口服黨參水煎液各劑量組小鼠負重游泳時間與對照組比較均無延長（P>0.05），說明三種劑量的黨參水煎液對小鼠均無抗疲勞作用。（見表4）

表4 口服黨參水煎液對小鼠負重游泳時間的影響

2.4 口服黨參水煎液對小鼠耐缺氧時間的影響

口服黨參水煎液各劑量組小鼠的耐缺氧時間與對照組比較均無延長（P>0.05），說明3種劑量黨參水煎液均不能提高小鼠耐缺氧的能力。（見表5）

表5 口服黨參水煎液對小鼠耐缺氧時間的影響

3 討論

應激反應是機體在受到各種內外環(huán)境因素刺激時所出現的非特異性全身反應，與在刺激作用下機體神經內分泌系統(tǒng)的變化密切相關[10]，外界環(huán)境的不良刺激如過度疲勞、過冷或過熱、缺氧等以及人體自身過度的憂、思、恐、怒等情感刺激均可構成應激原，使機體處于應激狀態(tài)，人體的抗應激生理功能會隨著年齡的增長而逐漸下降，有研究表明[11]機體清除自由基的能力也隨著年齡的增長而下降。老年人隨著年齡的增長、對各種應激因子的適應能力明顯減退，本文研究的抗疲勞耐缺氧等指標均屬于應激能力的范疇。

疲勞是機體在一定環(huán)境條件下，由于長時間或過于繁重、緊張的勞動而引起的工作效率暫時明顯降低的一種生理病理現象。由于肌肉運動時，能量代謝加快，代謝產物大量增加，肌纖維大量充血，肌肉膨脹，造成肌肉血管變窄，使肌肉缺氧，能量供應不足，代謝產物不能及時排除，導致疲勞加?。煌瑫r，大量的研究證明，長時間、大強度的運動能使機體產生大量的自由基離子，脂質過氧化程度增強，導致運動疲勞的產生和誘發(fā)一些疾病的發(fā)生。游泳是全身消耗性運動，劇烈的運動消耗大量的能量和氧氣，同時產生大量的乳酸。黨參溶液能增加機體儲能物質,減少引起疲勞的代謝產物的產生，從而能延緩疲勞的發(fā)生和加速疲勞消除；同時黨參液與提高中樞神經系統(tǒng)的興奮性[12]，提高機體活力能力有關，故而能減輕疲勞感。

缺氧是機體引起疲勞的原因之一。缺氧是一種緊張性刺激，可引起機體產生各種應激性反應。嚴重缺氧會引起組織器官的代謝障礙和功能紊亂，甚至發(fā)生組織壞死和機體死亡。生命活動的重要器官如腦和心臟缺氧是小白鼠常壓缺氧死亡的主要原因[13]。缺氧對機體是一種劣性刺激，影響機體各種代謝，特別是影響機體的氧化供能，最終會導致機體的心腦等重要器官缺氧，供能不足而死亡。黨參具由抗氧化性，可提高機體的血氧利用率、降低機體耗氧量，同時可擴張血管（特別是冠脈和軟腦膜血管），改善微循環(huán)，增加供氧量，從而改善機體缺氧狀態(tài)[13]。有研究表明[3]：黨參可以有效地清除活性氧和自由基，并且清除能力隨濃度的增大而增大，在脫氧核糖體系中加入抗壞血酸/金屬離子可以產生羥自由基進攻脫氧核糖使其降解，而在加入黨參后，低濃度的黨參即可抑制金屬離子催化的脫氧核糖降解。在黃嘌呤-腺嘌呤氧化酶體系中產生超氧陰離子，黨參在40 mmol/L 是時抑制率達到50%，對自由基引發(fā)的脂質氧化有很好的抑制效果。另外，黨參還有助于維持細胞內環(huán)境平衡，誘導具有內環(huán)境的蛋白質表達，減輕了氧化產物對機體的損傷尤其是那些在被氧化的大分子物質清除過程中起一定作用的蛋白質。最近的研究表明[12]：黨參確實可以引起微支肽和其他物質基因的轉錄。這一點進一步證明了黨參可以緩解疲勞和延長了缺氧環(huán)境中的存活時間。

試驗中腹腔注射組小鼠負重游泳時間都明顯延長，表明黨參具有一定的抗疲勞作用；而口服黨參水煎液的小鼠負重游泳時間和耐缺氧時間沒有延長，可能是口服水煎液要通過胃腸道吸收，黨參水煎液中一些有效成分不能完全被吸收，或者由于通過小腸吸收，藥物經過腸黏膜和肝藥酶的首過消除后，有效成分被轉化，從而達不到有效的血濃度。在耐缺氧試驗中，腹腔注射水煎醇沉液各劑量組小鼠的存活時間均顯著延長，表明黨參對常壓狀態(tài)下引起的缺氧現象有一定的對抗作用，可提高小鼠對缺氧的耐受力。

4 結論

此項研究可以看出，腹腔注射低、中、高劑量的黨參水煎醇沉液均能夠提高小鼠抗疲勞、耐缺氧的能力，說明黨參水煎醇沉液腹腔注射能夠提高小鼠抗疲勞、耐缺氧的能力，而水煎液口服效果不明顯。

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