比較P C R檢驗(yàn)法和細(xì)菌培養(yǎng)法用于陰道細(xì)菌檢驗(yàn)的效果

王一葉

廣州市廣空后勤醫(yī)院，廣東廣州510000

陰道炎為婦女最為常見疾病之一，由于其起病緩慢，不易引起患者的注意，嚴(yán)重會(huì)導(dǎo)致腹部及盆腔疾病，甚至不孕[1]。因此對(duì)于該病及時(shí)有效的診斷，明確致病菌對(duì)治療顯得尤為重要[2]。該研究選取該院2012年9月—2013年5月收取的100例患者，于患者陰道后穹窿出采集陰道分泌物，分別用PCR檢查法與細(xì)菌培養(yǎng)法做陰道細(xì)菌學(xué)檢查，比較兩組方法所得結(jié)果。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該研究選取該院收取的100例患者，全部為育齡期婦女，年齡24～48歲，平均年齡（34.13±3.12）歲。所有患者均存在外陰瘙癢、異味、陰道炎以及白帶分泌物增多等現(xiàn)象。

1.2方法

根據(jù)該研究所選患者，在其陰道后穹窿處用無菌棉簽取其分泌物放入無菌鹽水中保存，分別用PCR檢驗(yàn)法和細(xì)菌培養(yǎng)法做陰道細(xì)菌檢查。

1.2.1 PCR檢驗(yàn)法 取1 000 μL混有生理鹽水的陰道分泌物置于離心管中離心，1 200 r/min，持續(xù)15 min，離心后將所得上清液全部去除。向所得分泌物中加入組織裂解液，放于60℃水浴鍋中，10～15 min 后取出，1 200 r/min，離心 10 min，所得上清液取少許即可用來制作DNA模板。在進(jìn)行DNA擴(kuò)增對(duì)細(xì)菌進(jìn)行陽(yáng)性與陰性比較的時(shí)候要選取制作一個(gè)作為陰性對(duì)照，里面除了不加入模板DNA外，其余均相同。在擴(kuò)增模板DNA時(shí)，向其中加入引物、緩沖對(duì)、雙蒸餾水以及模板等，放入PCR儀中進(jìn)行循環(huán)。

1.2.2 細(xì)菌培養(yǎng)法 將放入生理鹽水中的棉簽上面的陰道分泌物取出，放于培養(yǎng)基中，在CO2孵箱中進(jìn)行培養(yǎng)，時(shí)間為48 h。待長(zhǎng)成菌落后將上面光滑、灰色、露滴狀以及半透明樣的菌群挑取出來進(jìn)行生化鑒定，并且嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。

1.3 觀察指標(biāo)

在兩種實(shí)驗(yàn)方法中，對(duì)所測(cè)得的細(xì)菌種類進(jìn)行分析統(tǒng)計(jì)。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

數(shù)據(jù)全部采用SPSS16.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

PCR檢驗(yàn)法和細(xì)菌培養(yǎng)法兩種檢驗(yàn)方法結(jié)果經(jīng)實(shí)驗(yàn)后得出數(shù)據(jù)，PCR檢驗(yàn)法檢驗(yàn)結(jié)果呈陽(yáng)性者共有78例，其中棒狀桿菌13例，戛納桿菌55例，腸球菌10例，陰性20例，檢出率為79.6%；細(xì)菌培養(yǎng)法檢驗(yàn)結(jié)果呈陽(yáng)性者共有67例，其中棒狀桿菌10例，戛納桿菌50例，腸球菌7例，陰性31例，檢出率為68.3%。由此我們可以得出，PCR檢查法在臨床療效上較細(xì)菌培養(yǎng)檢查法有更加準(zhǔn)確的檢出率，并且該法在臨床中操作簡(jiǎn)便易行，無論是大中型醫(yī)院還是社區(qū)醫(yī)院均可以實(shí)行，相反，細(xì)菌培養(yǎng)法要求較高，難以廣泛開展。經(jīng)比較，PCR檢驗(yàn)法和細(xì)菌培養(yǎng)法兩種檢驗(yàn)方法檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

表1 PCR檢驗(yàn)法和細(xì)菌培養(yǎng)法兩種檢驗(yàn)方法結(jié)果對(duì)照[n(%)]

3 討論

白帶能夠在一定程度上反映婦女的健康狀況，當(dāng)婦女白帶分泌物增多時(shí)應(yīng)該引起婦女的重視，并到醫(yī)院進(jìn)行檢查。近幾年，由于婦女生活習(xí)慣等因素的改變致使婦女患陰道類疾病逐年增加[3]。陰道炎等婦科疾病主要是由于陰道內(nèi)寄生菌群的失衡引起，正常情況下，陰道內(nèi)寄居的各種菌群相互平衡，分泌各種物質(zhì)共同維護(hù)著陰道內(nèi)的菌群穩(wěn)定，特別是陰道桿菌以及陰道上皮細(xì)胞在其中起到關(guān)鍵性的作用[4]。當(dāng)各種因素致使陰道內(nèi)菌群的失衡，陰道桿菌大量死亡，致使致病菌群在陰道內(nèi)大量繁殖，消耗了大量糖原等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，是陰道上皮細(xì)胞失去應(yīng)有的代謝而使陰道內(nèi)酸堿平衡發(fā)生紊亂，陰道上皮細(xì)胞失去正常的保護(hù)屏障功能，引發(fā)炎癥，致使陰道炎，外陰瘙癢以及白帶增多等現(xiàn)象[5]。由于其起病緩慢，不易引起患者的注意，嚴(yán)重會(huì)導(dǎo)致腹部及盆腔疾病，甚至不孕。因此對(duì)于該病及時(shí)有效的診斷，明確致病菌對(duì)治療顯得尤為重要[6]。因此，在日常生活中婦女應(yīng)該重視外陰的清洗，保持陰道內(nèi)菌群的正常及穩(wěn)定。細(xì)菌培養(yǎng)法在臨床中一直以來被認(rèn)為是臨床檢查婦女陰道菌群的金標(biāo)準(zhǔn)，但由于其操作相對(duì)PCR檢驗(yàn)法麻煩，不易操作，實(shí)驗(yàn)室要求相對(duì)較高，難以大范圍推廣。PCR檢驗(yàn)法是臨床中目前新出現(xiàn)的一種檢驗(yàn)技術(shù)，由于其檢出率高，精度準(zhǔn)以及較易開展等優(yōu)點(diǎn)在臨床中近期得到了廣泛的應(yīng)用[7]。

經(jīng)實(shí)驗(yàn)后得出數(shù)據(jù)，PCR檢驗(yàn)法檢驗(yàn)結(jié)果呈陽(yáng)性者共有78例，其中棒狀桿菌13例，戛納桿菌55例，腸球菌10例，陰性20例，檢出率為79.6%；細(xì)菌培養(yǎng)法檢驗(yàn)結(jié)果呈陽(yáng)性者共有67例，其中棒狀桿菌10例，戛納桿菌50例，腸球菌7例，陰性31例，檢出率為68.3%。由此我們可以得出，PCR檢查法在臨床療效上較細(xì)菌培養(yǎng)檢查法有更加準(zhǔn)確的檢出率，并且該法在臨床中操作簡(jiǎn)便易行，無論是大中型醫(yī)院還是社區(qū)醫(yī)院均可以實(shí)行，相反，細(xì)菌培養(yǎng)法要求較高，難以廣泛開展。經(jīng)比較，PCR檢驗(yàn)法和細(xì)菌培養(yǎng)法兩種檢驗(yàn)方法檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

綜上所述，在PCR檢驗(yàn)法和細(xì)菌培養(yǎng)法兩種檢驗(yàn)方法中，應(yīng)選擇PCR檢驗(yàn)法。該法有效地避免了臨床中傳統(tǒng)檢查方法費(fèi)時(shí)間，操作過程復(fù)雜以及難以在小型醫(yī)院以及醫(yī)療衛(wèi)生所中檢出。

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