芘污染對(duì)馬氏珠母貝(Pinctada martensi)D型面盤幼蟲(chóng)發(fā)育的影響

謝嘉，刁曉平 ，楊寶，趙春風(fēng)3，，杜俊俏，周海龍3，，#

1．海南大學(xué)環(huán)境與植物保護(hù)學(xué)院，?？?70228

2．海南大學(xué)海口市環(huán)境毒理學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，海口570228

3．海南省熱帶生物資源可持續(xù)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，海口570228

4．海南大學(xué)農(nóng)學(xué)院，?？?70228

多環(huán)芳烴是(PAHs)是一類廣泛存在于環(huán)境中的難降解、半揮發(fā)性有機(jī)污染物，具有致癌、致畸、致突變等特性［1］。其主要來(lái)源于人類活動(dòng)和能源利用過(guò)程，比如沿海城市生活污水、工業(yè)廢棄物、汽車尾氣的排放，石油、煤、木材等的不完全燃燒和海上石油開(kāi)發(fā)及石油溢漏等［2］。多環(huán)芳烴是由2個(gè)或2個(gè)以上苯環(huán)分子組成的以線狀、角狀或簇狀排列的碳?xì)浠衔?，可分?類:第1類是含有2～3環(huán)的低分子量芳烴(LMW PAHs)，如萘(NA)、菲(PHE)等;第2類是含有4～6環(huán)的高分子量芳烴(HMW PAHs)，如熒蒽(FA)、屈(CHR)、芘(Py)、苯并［a］芘(B［a］P)等［3］。低環(huán)多環(huán)芳烴具有分子量小、易揮發(fā)，且對(duì)水生生物的毒性作用大的特點(diǎn)，高環(huán)多芳烴分子量大、難揮發(fā)，具有強(qiáng)致癌和致突變的作用。PAHs通常以水體中的懸浮物和大氣溶膠為主要載體，進(jìn)入海洋環(huán)境并廣泛分布。迄今為止，已發(fā)現(xiàn)致癌性的多環(huán)芳烴及其衍生物多達(dá)400多種。海洋環(huán)境中的PAHs會(huì)通過(guò)生物積累和食物鏈作用進(jìn)入魚(yú)類、貝類等海洋生物體中，不僅影響海洋生物的生殖繁衍，而且會(huì)破壞海洋生態(tài)環(huán)境，影響海產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量繼而影響人類健康。

芘(pyrene)是多環(huán)芳烴類的一種重要代表性污染物。在水體中，芘會(huì)隨著食物鏈進(jìn)入生物體內(nèi)并積累，繼而對(duì)海洋動(dòng)物產(chǎn)生毒害作用。軟體動(dòng)物為沿海生態(tài)系統(tǒng)中的優(yōu)勢(shì)種，且具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值［4］。胚胎和早期幼蟲(chóng)發(fā)育是軟體動(dòng)物的生活史中的組成部分，因此早期幼蟲(chóng)數(shù)量的變動(dòng)將影響成體的數(shù)量。馬氏珠母貝(Pinctadamartensi)，又名日本合浦珠母貝，海產(chǎn)軟體動(dòng)物，瓣鰓綱(Lamellibranchia)，珍珠貝目(Pterioida)，珠母貝科(Pteriidae)，廣泛分布于熱帶和亞熱帶沿海，屬于熱帶海洋環(huán)境中的一種優(yōu)勢(shì)貝類，是國(guó)內(nèi)生產(chǎn)海水珍珠的主要種類，因此具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值［5-6］。海洋貝類在幼蟲(chóng)階段對(duì)外界環(huán)境的變化比較敏感，而幼蟲(chóng)的生長(zhǎng)及存活情況對(duì)種群的可持續(xù)發(fā)展非常重要［7］。何盛毅等［8］在研究外界海洋環(huán)境酸化脅迫對(duì)馬氏珠母貝胚胎和早期幼蟲(chóng)發(fā)育的影響中發(fā)現(xiàn)，海洋酸化雖然未明顯影響馬氏珠母貝胚胎發(fā)育，但對(duì)D型幼蟲(chóng)的影響是顯著的。王鵬飛等［9］報(bào)道馬氏珠母貝在D型面盤幼蟲(chóng)階段對(duì)外界環(huán)境的影響較敏感。但是，目前芘對(duì)馬氏珠母貝早期發(fā)育毒性作用的相關(guān)研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本文擬通過(guò)芘污染對(duì)馬氏珠母貝胚胎發(fā)育的毒理效應(yīng)研究，探討芘污染對(duì)馬氏珠母貝種群發(fā)育的影響，為評(píng)估芘污染對(duì)海洋動(dòng)物的影響提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法(M aterials and methods)

1．1 實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ絼?dòng)物為馬氏珠母貝(Pinctada maetensi)，購(gòu)自海南省陵水縣黎安鎮(zhèn)貝類養(yǎng)殖場(chǎng)，挑選性腺成熟，健康的個(gè)體作為親貝，貝齡約為2年，殼高(8．0 ± 0．6)cm，殼長(zhǎng)(7．6 ± 0．1)cm，殼厚(2．8± 0．2)cm，質(zhì)量(68．3 ± 0．3)g，實(shí)驗(yàn)所用海水均取自海南陵水黎安港無(wú)污染區(qū)域的自然海水，經(jīng)80目篩絹網(wǎng)過(guò)濾處理后待用。

1．2 儀器與試劑

儀器:BX41/45顯微鏡(Olympus公司，日本)、5702臺(tái)式冷凍低速離心機(jī)(Eppendorf公司，德國(guó))。

試劑:芘(Sigma公司，美國(guó))、丙酮(Amresco公司，美國(guó))等均為分析純。

1．3 實(shí)驗(yàn)方法

根據(jù)國(guó)內(nèi)外自然海區(qū)中芘的污染情況［10-11］和預(yù)實(shí)驗(yàn)，將芘以丙酮為溶劑配制成2、4、8、16和32 μg·L-15個(gè)濃度，作為實(shí)驗(yàn)組，同時(shí)分別設(shè)置丙酮和海水空白對(duì)照組。馬氏珠母貝進(jìn)行人工受精［12］，然后在鹽度為32‰、pH 值為8．3、溫度為(27±1)℃的海水中待發(fā)育到D型期，然后將馬氏珠母貝胚胎轉(zhuǎn)移到不同芘濃度的海水中進(jìn)行暴露實(shí)驗(yàn)，每個(gè)處理組胚胎初始密度為3．5～4個(gè)·mL-1。同時(shí)，設(shè)置3個(gè)平行。然后，分別于 12、24、36、48、60、72 和 84 h各取100 mL D型面盤幼蟲(chóng)，在25℃、以2 000 r·min-1離心5 min，再將幼蟲(chóng)樣品鋪于載玻片上，于顯微鏡下統(tǒng)計(jì)死亡數(shù)和畸形數(shù)。

1．4 數(shù)據(jù)分析

1．4．1 死亡率和畸形率

死亡率和畸形率的計(jì)算方法參照金啟增等［6］的方法，其中畸形評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)參考His等［13］的報(bào)道:D型幼蟲(chóng)畸形包括殼緣內(nèi)凹、絞合線內(nèi)凹、鋸齒狀的殼緣、不完全的殼和凸出覆蓋物的個(gè)體。死亡率=(初始密度-D型期密度)/初始密度，密度單位為個(gè)·mL-1;畸形率為某一時(shí)期畸形個(gè)數(shù)占測(cè)量總個(gè)體數(shù)的百分率。

1．4．2 半數(shù)致死濃度(LC50)

對(duì)于LC50的計(jì)算，參照解靜芳等［14］的方法:采用直線回歸法，以避免一些主觀因素的影響，直線回歸方程為y=bx+a。式中:x為濃度的對(duì)數(shù);y為死亡率轉(zhuǎn)換成的概率單位;a、b分別為直線的截距和斜率，當(dāng)死亡率為50%時(shí)其概率單位為y=5，即可由回歸方程求得LC50(LC50的95%置信區(qū)間計(jì)算公式為 log-1［x±2S×1．96/(2n)1/2］，式中:S為標(biāo)準(zhǔn)偏差;n為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物總數(shù))，從而求出LC50值，并制表分析。

胡錦濤總書(shū)記在慶祝清華大學(xué)建校100周年大會(huì)上指出，要“著力增強(qiáng)學(xué)生服務(wù)國(guó)家服務(wù)人民的社會(huì)責(zé)任感、勇于探索的創(chuàng)新精神、善于解決問(wèn)題的實(shí)踐能力，努力培養(yǎng)德智體美全面發(fā)展的社會(huì)主義建設(shè)者和接班人”[1]。《國(guó)家中長(zhǎng)期教育改革與發(fā)展規(guī)劃綱要》也明確要求“著力提高學(xué)生服務(wù)國(guó)家服務(wù)人民的社會(huì)責(zé)任感、勇于探索的創(chuàng)新精神和善于解決問(wèn)題的實(shí)踐能力”[2]。可見(jiàn)，社會(huì)責(zé)任感教育問(wèn)題已上升到國(guó)家戰(zhàn)略層面。高校校園文化作為一種重要的教育形式，在師生中具有持久的向心力和凝聚力，對(duì)于培養(yǎng)大學(xué)生的社會(huì)責(zé)任感具有重要作用。

1．5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

采用SPSS 17．0統(tǒng)計(jì)分析軟件，在P=0．05的置信水平對(duì)死亡率和畸形率進(jìn)行單因素方差分析(One– Way ANOVA)。

2 結(jié)果(Results)

2．1 芘對(duì)馬氏珠母貝D型面盤幼蟲(chóng)死亡率的影響

在芘暴露下，D型面盤幼蟲(chóng)死亡率情況如表1所示。海水空白對(duì)照與丙酮溶劑對(duì)照組的死亡率無(wú)顯著差異(P ＞0．05)，染毒初期(12 h)隨著濃度的增加，D型面盤幼蟲(chóng)死亡率不斷增加，LOEC(最低可見(jiàn)有效濃度)為16 μg·L-1，最大濃度組(32 μg·L-1)的死亡率為14．90%;染毒36 h后，LOEC變化為2 μg·L-1，LOEC并未隨染毒時(shí)間的延長(zhǎng)而變化，直至染毒后84 h，LOEC 仍為2 μg·L-1。84 h時(shí)，最高濃度組(32μg·L-1)死亡率達(dá)到56．75%，顯示出明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系。從8μg·L-1濃度組開(kāi)始，死亡率超過(guò)50%，呈現(xiàn)出明顯的時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系。

隨著染毒時(shí)間的推移，不同濃度組D型面盤幼蟲(chóng)死亡率不斷增加。16和32μg·L-1濃度組在初始染毒時(shí)(12 h)，死亡率與空白對(duì)照組相比，就表現(xiàn)出明顯差異(P ＜0．05)分別達(dá)到15．40%和14．90%;隨著時(shí)間的推移，染毒36 h后，從最低濃度組(2μg·L-1)開(kāi)始，死亡率就顯著高于對(duì)照組，呈明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系，染毒36 h、84 h 后，最高濃度組(32 μg·L-1)的死亡率分別達(dá)33．67%和56．75%，與對(duì)照組相比，有極顯著差異(P＜0．01)。上述結(jié)果表明，芘污染對(duì)馬氏珠母貝D型面盤幼蟲(chóng)死亡率有明顯的影響。

表1 在不同濃度芘中暴露不同時(shí)間后馬氏珠母貝D型面盤幼蟲(chóng)的死亡率Table 1 Mortality of D-shaped veliger larvae of Pinctadamartensi after exposure to pyrene at different concentrations for different times

2．2 芘對(duì)馬氏珠母貝D型面盤幼蟲(chóng)畸形率的影響

芘對(duì)D型面盤幼蟲(chóng)畸形率的影響結(jié)果見(jiàn)表2。海水空白對(duì)照與丙酮溶劑對(duì)照組的畸形率無(wú)顯著差異(P ＞0．05)，在相同的染毒時(shí)間內(nèi)，不同濃度組D型面盤幼蟲(chóng)畸形率與對(duì)照組相比均有顯著差異(P＜0．05)，表現(xiàn)出一定的劑量-效應(yīng)關(guān)系，最大的畸形率達(dá)8．66%(8 μg·L-1，84 h)。D 型面盤幼蟲(chóng)畸形率隨時(shí)間的延長(zhǎng)而增加，表現(xiàn)出一定的時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系;60～84 h期間8和16μg·L-1濃度組的畸形率與對(duì)照相比，差異極顯著(P ＜0．01)，且平均畸形率高于32 μg·L-1濃度組，其中8 μg·L-1濃度組從60 h開(kāi)始，畸形率皆高于其他濃度組，并與對(duì)照組相比存在極顯著差異(P ＜0．01);染毒72 h時(shí)后，從8μg·L-1濃度組開(kāi)始，D型面盤幼蟲(chóng)的畸形率與對(duì)照相比均有極顯著差異(P ＜0．01)。結(jié)果表明，芘暴露對(duì)馬氏珠母貝D型面盤幼蟲(chóng)的形態(tài)有明顯影響。

2．3 芘對(duì)馬氏珠母貝D型面盤幼蟲(chóng)形態(tài)學(xué)的影響

在實(shí)驗(yàn)中觀察到以下幾種畸形個(gè)體形態(tài):殼緣內(nèi)凹、絞合線內(nèi)凹、不完全的殼、鋸齒狀的殼緣、凸出覆蓋物(見(jiàn)圖1)。

表2 在不同濃度芘中暴露不同時(shí)間后D型面盤幼蟲(chóng)的畸形率Table 2 Abnormalities of D-shaped veliger larvae after exposure to pyrene at different concentrations for different times

圖1 芘染毒后D型面盤幼蟲(chóng)的幾種畸形形態(tài)(40×)Fig．1 Abnormal types of D-shaped veliger larvae after exposure to pyrene(40×)

此外，隨著時(shí)間的推移，D型幼蟲(chóng)的畸形程度也逐漸加大，在12～48 h期間，D型幼蟲(chóng)的畸形形態(tài)不明顯(圖2A)，絞合線及殼緣輕微的凹陷，到60 h時(shí)D型幼蟲(chóng)的畸形形態(tài)明顯，殼的四周開(kāi)始出現(xiàn)清晰裂痕，并開(kāi)始出現(xiàn)凸出覆蓋物個(gè)體(圖2B)，直至84 h殼發(fā)生破裂。另外，由于限食，幼蟲(chóng)的發(fā)育受到影響［15］，出現(xiàn)了空殼的現(xiàn)象(圖2C)。

2．4 芘對(duì)馬氏珠母貝D型面盤幼蟲(chóng)的LC50

在芘暴露下，通過(guò)計(jì)算，隨著時(shí)間的推移LC50呈下降趨勢(shì)(見(jiàn)圖3)，60 h后逐漸趨于平穩(wěn)，12、24、36、48、60、72 和 84 h 的 LC50分別為 309．43、110．39、67．31、56．28、43．50、40．17 和 33．87 μg·L-1，60 h和72 h這2個(gè)時(shí)間點(diǎn)的LC50無(wú)顯著性差異(P＞0．05)。

3 討論(Discussion)

已有研究發(fā)現(xiàn)，PAHs對(duì)很多物種的早期發(fā)育階段能夠產(chǎn)生一定的毒性效應(yīng)。例如，1989年美國(guó)油輪?？松ね郀柕掀?Exxon Valdez)號(hào)原油泄漏事故引起了一系列關(guān)于PAHs對(duì)在近海岸水域和潮間帶產(chǎn)卵的太平洋鯡魚(yú)(Clupea pallasi)和粉鮭(Oncorhynchus gorbuscha)發(fā)育毒性的研究［16-21］。叢偉等［22］研究了多環(huán)芳烴對(duì)海洋魚(yú)類斜帶髭鯛(Hapalogenys nitens Richardson)和鱸魚(yú)(Lateolabrax japonicus)胚胎的發(fā)育毒性效應(yīng)，發(fā)現(xiàn)PAHs暴露能激活芳香烴受體AhR通道及誘導(dǎo)基因、酶的表達(dá)，繼而導(dǎo)致魚(yú)類胚胎出現(xiàn)一系列異常癥狀，使其在發(fā)育階段出現(xiàn)死亡和畸形。目前，關(guān)于PAHs對(duì)水生生物早期發(fā)育階段的毒性效應(yīng)研究主要集中在魚(yú)類，而對(duì)貝類早期幼蟲(chóng)發(fā)育的影響探討較少。

圖2 芘染毒48(A)、60(B)和84 h(C)后D型幼蟲(chóng)的形態(tài)學(xué)變化(40×)Fig．2 Abnormalities of D-larvae after exposure to pyrene for 48(A)，60(B)and 84 h(C)(40×)

圖3 D型面盤幼蟲(chóng)半數(shù)致死濃度(LC50)Fig．3 Half lethal concentration of B［a］P for D-larvae of Pinctadamartensi

本研究是第一次探討芘脅迫對(duì)海洋貝類早期幼蟲(chóng)發(fā)育的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，芘對(duì)馬氏珠母貝的死亡率有顯著影響，在2～32μg·L-1濃度的芘暴露下，D型面盤幼蟲(chóng)死亡率隨著濃度的升高而增大，呈明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系;并且在初始的12 h，高濃度組(16 μg·L-1和32 μg·L-1)就出現(xiàn)了較高的死亡率，分別達(dá)到15．40%和14．90%，這表明D型面盤幼蟲(chóng)對(duì)芘污染敏感。劉睿智［23］等發(fā)現(xiàn)，PAHs引發(fā)的胚胎和仔魚(yú)的毒性效應(yīng)基本上隨暴露濃度的升高而升高，并隨其結(jié)構(gòu)中苯環(huán)數(shù)的增加有增強(qiáng)趨勢(shì)。此外，隨著染毒時(shí)間延長(zhǎng)，死亡率迅速升高，染毒36 h后，從最低濃度組(2μg·L-1)開(kāi)始，死亡率就顯著高于對(duì)照組;到72 h時(shí)，8、16 和32 μg·L-1濃度組死亡數(shù)平均已過(guò)半(51．74%)，有明顯的時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系。有研究報(bào)道，聯(lián)苯胺類化合物對(duì)斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育均具有明顯抑制作用，可以造成仔魚(yú)畸形甚至死亡［24］。氯代酚和烷基酚使最初72 h內(nèi)發(fā)育的斑馬魚(yú)胚胎出現(xiàn)死亡，且這種影響表現(xiàn)出劑量-效應(yīng)正相關(guān)性［25］。引起死亡率增加的原因可能有以下兩種:第一，芘暴露對(duì)幼蟲(chóng)組織結(jié)構(gòu)的破壞性，且伴隨著濃度的增加而增大;第二，畸形個(gè)體的基本功能受阻導(dǎo)致其存活率大大降低，從而影響死亡率。有報(bào)道指出，芘通過(guò)作用于AhR對(duì)發(fā)育相關(guān)的酶CYPlA產(chǎn)生影響，會(huì)導(dǎo)致胚胎發(fā)育時(shí)期的多種畸形如外周循環(huán)系統(tǒng)障礙、貧血、心包囊水腫和神經(jīng)管細(xì)胞非正常死亡等［26-28］。

從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，芘暴露致使D型面盤幼蟲(chóng)出現(xiàn)畸形個(gè)體，且隨著暴露濃度的增大畸形個(gè)體出現(xiàn)的數(shù)量增多，最高畸形率可達(dá) 8．66%(8 μg·L-1，84 h)。其中，8μg·L-1濃度相較于其他濃度組，其畸形率普遍高一些，即從60 h開(kāi)始至84 h，畸形率分別達(dá)到7．58%、7．73%和 8．66%，并與對(duì)照組相比存在極顯著差異(P＜0．01)，這說(shuō)明馬氏珠母貝D型面盤幼蟲(chóng)對(duì)這個(gè)濃度更敏感。此外，污染物暴露的時(shí)間與畸形率也存在時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系，相對(duì)于對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組的畸形率隨芘暴露時(shí)間的延長(zhǎng)呈遞增趨勢(shì)。李瑞霞等［29］發(fā)現(xiàn)，在苯并［a］芘、芘和菲暴露下褐菖鲉出現(xiàn)大量畸形胚胎和仔魚(yú)，而芘暴露組畸形情況最多，說(shuō)明芘的致畸性大于菲和苯并［a］芘。CO2酸化的海水(pH值為7．4左右)對(duì)雙殼類的牡蠣和紫貽貝幼蟲(chóng)也具有明顯的致畸性［30-31］，D型面盤幼蟲(chóng)期生命力和抵抗力是胚胎發(fā)育最弱的時(shí)期［32］。李秀秀等［33］發(fā)現(xiàn)，農(nóng)利靈對(duì)斑馬魚(yú)胚胎也有明顯的致畸性。此外，劉文廣等［34］發(fā)現(xiàn)，隨著發(fā)育時(shí)間的延長(zhǎng)，馬氏貝幼蟲(chóng)對(duì)CO2酸化海水(pH值為7．4左右)的耐受性逐漸下降，表現(xiàn)為其生長(zhǎng)速度下降的同時(shí)畸形率和死亡率顯著升高。

雙殼類軟體動(dòng)物幼蟲(chóng)殼的形成一般受到特殊組織-殼腺的控制，馬氏珠母貝在擔(dān)輪幼蟲(chóng)后期形成殼腺，在面盤幼蟲(chóng)初期殼腺才開(kāi)始分泌并逐漸形成第一原殼，這一過(guò)程稱為鈣化［6］。在芘暴露下，觀察到D型面盤幼蟲(chóng)畸形形態(tài)，包括殼緣內(nèi)凹 、絞合線內(nèi)凹、不完全的殼、鋸齒狀的殼緣和凸出覆蓋物，以及有些幼蟲(chóng)個(gè)體偏小等現(xiàn)象，此外，D型幼蟲(chóng)的畸形程度也隨時(shí)間加大。因此，我們推測(cè)芘污染可能在面盤幼蟲(chóng)鈣化的過(guò)程中產(chǎn)生了某些毒害作用，從而導(dǎo)致D型面盤幼蟲(chóng)出現(xiàn)畸形個(gè)體。總之，芘暴露對(duì)馬氏珠母貝D型面盤幼蟲(chóng)期有較明顯致畸性，但致畸的機(jī)理和過(guò)程有待進(jìn)一步研究。

隨著時(shí)間的推移，芘暴露對(duì)馬氏珠母貝D型面盤幼蟲(chóng)的LC50呈大幅下降趨勢(shì)，至60 h后趨于穩(wěn)定，LC50為43．50 μg·L-1，這說(shuō)明 60 h 是一個(gè)非常敏感而又關(guān)鍵的時(shí)期，且染毒60 h之前，D型面盤幼蟲(chóng)對(duì)芘的響應(yīng)敏感。然而在72 h時(shí)其LC50為40．17 μg·L-1，84 h 時(shí) LC50僅為 33．87 μg·L-1，出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因很可能是由于當(dāng)毒性作用60 h后，馬氏珠母貝D型面盤幼蟲(chóng)啟動(dòng)了自身的損傷修復(fù)機(jī)制，從而提高了對(duì)芘毒性作用的抵抗能力。

綜上所述，實(shí)驗(yàn)從個(gè)體水平上研究了芘暴露對(duì)馬氏珠母貝D型面盤幼蟲(chóng)的毒性效應(yīng)，初步闡明了在芘暴露下，馬氏貝D型面盤幼蟲(chóng)的畸形率和死亡率隨著芘暴露的濃度和時(shí)間的變化情況及其形態(tài)學(xué)影響。結(jié)果表明，芘對(duì)馬氏珠母貝D型面盤幼蟲(chóng)的死亡率、畸形率均具有明顯的影響，并存在顯著的濃度-時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系。本研究為進(jìn)一步揭示芘對(duì)馬氏珠母貝早期發(fā)育毒理機(jī)制打下一定基礎(chǔ)，同時(shí)為評(píng)價(jià)芘的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)提供了科學(xué)依據(jù)。

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