高效液相色譜技術(shù)在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用及進(jìn)展

喬蕾 任航

(哈爾濱市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心 黑龍江哈爾濱 150001)

我國(guó)對(duì)醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的管理中主要采取的是藥品的檢測(cè),通過(guò)對(duì)藥品的檢測(cè)來(lái)把好藥品質(zhì)量關(guān)。同時(shí),在藥品檢測(cè)過(guò)程中國(guó)家采取了各種相對(duì)有效的科技手段,這使得藥品檢測(cè)具有很好的可靠性。而高效液相色譜技術(shù)就是藥品檢測(cè)中的一項(xiàng)很有效的先進(jìn)技術(shù),這項(xiàng)技術(shù)不僅在技術(shù)操作上,而且在儀器自動(dòng)化水平上都表現(xiàn)出了很大的優(yōu)勢(shì)。

高效液相色譜法,是由原始的普通液相色譜法衍生而來(lái)的一種新型、高效的分離分析方法。其作用原理是混合組分在流動(dòng)相和固定相中的分配系數(shù)不同,樣品在固液相中反復(fù)多次分配后達(dá)到分離的效果。該方法目前已成為諸多學(xué)科中的重要分析方法,特別是在藥品檢驗(yàn)中發(fā)揮了重要作用,成為藥品質(zhì)量監(jiān)控的關(guān)鍵技術(shù)之一。

1 高效液相色譜法簡(jiǎn)介

1906年,俄國(guó)植物學(xué)家茨維特首次提出而浦發(fā)和色譜圖的概念。在1931年以后相繼出現(xiàn)了離子交換色譜和薄層色譜等液相色譜技術(shù)。隨著科技的不斷進(jìn)步和發(fā)展,液相色譜法進(jìn)一步向前推進(jìn),衍生得到現(xiàn)在的高效液相色譜法。

高效液相色譜法的特點(diǎn)可以概括為“三高一廣一快”:①高壓,流動(dòng)相流經(jīng)色譜柱時(shí)收到很大的阻力,必須對(duì)載液加高壓才能使液相迅速通過(guò)色譜柱。②高效,即分離效能高。③高靈敏度,其進(jìn)樣量極低,可達(dá)微升數(shù)量級(jí)。④應(yīng)用范圍廣,該方法對(duì)70%以上的有機(jī)化合物都能進(jìn)行分離。⑤分析速度快,與經(jīng)典液相色譜法相比,高效液相色譜法分析樣品的速度要快得多,一般每個(gè)樣品都小雨1小時(shí)。

2 高效液相色譜法在藥品檢驗(yàn)上的應(yīng)用

2.1 藥品中有效成分的檢測(cè)

每一種新藥品上市之前都要進(jìn)行有效成分含量的檢測(cè),有效成分含量達(dá)到規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)后才能生產(chǎn)上市。而高效液相色譜技術(shù)在檢測(cè)藥物有效成分上發(fā)揮著重要作用。使用該技術(shù)可以準(zhǔn)確、靈敏的檢測(cè)出藥物中有效部分所占比率,有效避免附加劑對(duì)測(cè)定結(jié)果的干擾。

例如,使用高效液相色譜法測(cè)定鳳尾茶中能夠發(fā)揮藥效的成分黃酮的含量,測(cè)定方法簡(jiǎn)單,測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定。因此該技術(shù)在鳳尾茶進(jìn)出口海關(guān)時(shí)發(fā)揮重要作用。

有報(bào)道說(shuō)使用高效液相色譜法測(cè)定不同產(chǎn)地和不同成熟程度的黃芪藥材中有效成分的含量,從而確定什么產(chǎn)地的黃芪質(zhì)量更好,以及哪個(gè)生長(zhǎng)時(shí)期的黃芪藥效最好。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明用高效液相色譜法測(cè)定藥物有效成分含量簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性也很好。

2.2 藥品中雜質(zhì)含量的檢測(cè)

我國(guó)藥品質(zhì)監(jiān)部門關(guān)于藥品質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定越來(lái)越嚴(yán)格,因此對(duì)于藥品中除有效成分以外的其他雜質(zhì)和有害物質(zhì)或違禁物質(zhì)含量的檢測(cè)也更加嚴(yán)格。在藥品在生產(chǎn)過(guò)程中的各種條件如溫度、pH等會(huì)使一小部分原料衍生成一些無(wú)作用的附加成分,這類物質(zhì)一旦超標(biāo),藥品的有效成分降低,甚至達(dá)不到相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。所以必須嚴(yán)格控制附加成分的生成。生產(chǎn)實(shí)踐中長(zhǎng)利用高效液相色譜法監(jiān)測(cè)藥品生產(chǎn)過(guò)程中附帶產(chǎn)物的生成量。該技術(shù)能靈敏地檢測(cè)到常規(guī)液相色譜法無(wú)法檢測(cè)到的微量成分。

高效液相色譜法還能應(yīng)用在檢測(cè)藥品中違禁成分的添加量。有些不法商家為了謀求高額利益,會(huì)在藥品中添加一定量違禁成分替代價(jià)格較高的正規(guī)成分。在有關(guān)部門打假制假過(guò)程中,高效液相色譜技術(shù)發(fā)揮了及其重要的作用。應(yīng)用該技術(shù)可以精確定量藥物中及其微量的違禁成分,能夠很好的克服藥品復(fù)雜成分的干擾,做到高效、靈敏、快速。與普通的薄層色譜法相比,該技術(shù)的錯(cuò)檢率顯著降低。高效液相色譜法還被廣泛應(yīng)用在保健品中違禁成分的檢測(cè)。

2.3 抗生素含量的檢測(cè)

高效液相色譜法應(yīng)用在抗生素檢測(cè)中主要表現(xiàn)在一下幾方面:

(1)限制抗生素藥物中雜質(zhì),保證抗生素的藥效。這是早期抗生素藥物允許大量使用時(shí)高效液相色譜技術(shù)在抗生素檢測(cè)方面的作用。臨床上抗生素的使用存在許多不良反應(yīng),其原因之一是原料的中間體、降解產(chǎn)物以及聚合物引起用藥者發(fā)生不良反應(yīng),有時(shí)后果非常嚴(yán)重,甚至危機(jī)病人生命。高效液相色譜技術(shù)能夠有效檢測(cè)抗生素藥物中這類物質(zhì)的含量,因此對(duì)其雜質(zhì)的限量控制有重要意義。(2)檢測(cè)非抗生素藥物中抗生素含量,防止抗生素濫用。目前國(guó)家對(duì)抗生素的使用有嚴(yán)格限制,為避免抗生素的濫用引起人或動(dòng)物度抗生素產(chǎn)生耐藥性,必須嚴(yán)格檢測(cè)一般消炎藥物中抗生素的含量。如王一中在2004年利用反向高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方利福平膠囊中抗生素的含量,結(jié)果與利用外標(biāo)法設(shè)定的對(duì)照相比回收率高達(dá)99%以上,標(biāo)準(zhǔn)誤低于1%。(3)檢測(cè)動(dòng)物性食品中抗生素含量,防止抗生素濫用。高效液相色譜法技術(shù)也廣泛應(yīng)用在動(dòng)物性食品檢測(cè)中。利用該技術(shù)可檢測(cè)出動(dòng)物性食品中抗生素的殘留量,避免人食用含有抗生素的肉蛋奶后對(duì)抗生素產(chǎn)生耐藥性。

3 高效液相色譜法在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用進(jìn)展

目前,高效液相色譜技術(shù)廣泛應(yīng)用在生物、食品、藥品等各行各業(yè)中,隨著科技的進(jìn)步,該技術(shù)與其他新技術(shù)聯(lián)合使用如質(zhì)譜聯(lián)用,將在藥品檢驗(yàn)中發(fā)揮更大的作用。

目前國(guó)家在知識(shí)產(chǎn)權(quán)和藥品專利等方面的管理和保護(hù)愈加嚴(yán)格,使得藥品檢驗(yàn)也愈加重要。尤其在中草藥方面,國(guó)家頒布了一系列法規(guī)條例,加大對(duì)中草藥檢驗(yàn)的力度。在該方面,高效液相色譜技術(shù)也發(fā)揮了不可替代的作用。

4 結(jié)語(yǔ)

隨著我國(guó)醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展,藥品的質(zhì)量問(wèn)題也越來(lái)越嚴(yán)重。在人們的健康收到一定威脅的時(shí)候,迫切需要國(guó)家采取一些有效的措施來(lái)解決這些危及人們?nèi)松戆踩膯?wèn)題。

我國(guó)對(duì)醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的管理中主要采取的是藥品的檢測(cè),通過(guò)對(duì)藥品的檢測(cè)來(lái)把好藥品質(zhì)量關(guān)。同時(shí),在藥品檢測(cè)過(guò)程中國(guó)家采取了各種相對(duì)有效的科技手段,這使得藥品檢測(cè)具有很好的可靠性。而高效液相色譜技術(shù)就是藥品檢測(cè)中的一項(xiàng)很有效的先進(jìn)技術(shù),這項(xiàng)技術(shù)不僅在技術(shù)操作上,而且在儀器自動(dòng)化水平上都表現(xiàn)出了很大的優(yōu)勢(shì)。高效液相色譜技術(shù)在藥品檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展和藥品檢測(cè)的應(yīng)用中都發(fā)揮了巨大的作用。但是,為了加強(qiáng)藥品的檢測(cè)力度和提高檢測(cè)的可靠性,我國(guó)還有繼續(xù)加大研發(fā)力度,努力開發(fā)出更可靠、更有效的藥品檢測(cè)技術(shù)。從而使我國(guó)的健康產(chǎn)業(yè)可以更好的發(fā)展。

[1]于世林高.高效液相色譜方法及應(yīng)用[J].化學(xué)工業(yè)出版社,2005

[2]劉瑩,周建良,李萍.快速高效相色譜分離技術(shù)在中藥分析中的應(yīng)用[J].色譜,2009.05.