產(chǎn)蛋雞群低致病性禽流感疑似病例綜合診斷

史 輝 劉恩昌 張兆成 （山東省昌樂縣畜牧獸醫(yī)局 262400）

禽流感是由正黏病毒科、流感病毒屬、A型流感病毒引起的一種急性、高度接觸性傳染病，可分為高致病性和低致病性兩種。低致病性禽流感雖不能造成雞群的大量死亡，但是最近研究證明可以引起雞群的免疫抑制，從而繼發(fā)其他的疾病，產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟損失。因此,做好低致病性禽流感的防控工作，有助于控制其他疾病的傳播，提高生產(chǎn)效益、減少經(jīng)濟損失。

發(fā)病雞群表現(xiàn)發(fā)病急、傳播快，病情很快波及全群；臨床表現(xiàn)體溫升高，精神沉郁，叫聲減小，縮頸，嗜睡，腫眼流淚，呼嚕、甩鼻、尖叫，張口呼吸等呼吸道癥狀，病雞采食量下降，拉白色稀糞或不消化的料糞，產(chǎn)蛋率下降，出現(xiàn)許多砂殼蛋、軟殼蛋、畸形蛋、軟皮蛋等，后期部分雞只有神經(jīng)癥狀，表現(xiàn)頭頸后仰，抽搐，運動失調(diào)，癱瘓等，并有一定程度的死亡率。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 主要器材 切片機，切片刀，融水式電熱恒溫培養(yǎng)箱，熔蠟箱，包埋工具，微量加樣器，超凈工作臺，玻璃研磨器，孵化箱，高速離心機，96孔V形反應板等。

1.1.2 病料 來自全省各地前到臨床病理學實驗室診斷的低致病性禽流感產(chǎn)蛋雞疑似病例。

1.1.3 主要試劑 10%的福爾馬林的固定液，二甲苯，梯度酒精(70%、80%、90%、95%、100%)液體蠟，蘇木素，伊紅，AIV(H5、H9)和ND單因子陽性血清，SPF雞胚，PBS緩沖液。

1.2 方法

1.2.1 流行病學調(diào)查及臨床癥狀觀察 對前來診斷的病雞仔細登記基本信息，向畜主詳細詢問發(fā)病情況、治療情況及臨床表現(xiàn)，對活著的病雞仔細觀察臨床癥狀。

1.2.2 剖檢病變觀察 將病雞放血致死，剖檢病、死雞，仔細觀察各組織器官的病理變化并記錄眼觀病變。

1.2.3 病理組織學觀察 剖檢時取氣管、肺臟、腎臟、胰腺、腦等器官組織，10%福爾馬林溶液固定，常規(guī)石蠟切片、HE染色，光鏡下觀察組織病理學變化。

1.2.4 病毒分離鑒定 剖檢病、死雞時無菌采集氣管、肺臟，低溫冰箱保存,之后研磨病料，反復凍融3次之后，離心取上清液，將處理好的病料經(jīng)尿囊腔接種雞胚，取24h之后死亡的雞胚，收取尿囊液，做交叉HA和HI試驗，同時與NDV、AIV(H9、H5)單因子陽性血清做HI交叉抑制試驗，記錄結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 剖檢病變觀察

剖檢發(fā)現(xiàn)眼結(jié)膜充血、出血，有許多漿液性滲出物；鼻腔充滿黏液，喉頭、氣管黏膜充血、出血有許多黏液滲出；腎顏色變淡、腫脹，常見花斑腎病變；卵泡充血出血或液化破裂，輸卵管黏膜表面有許多灰白色黏液，黏膜充血水腫；胃、腸黏膜充血、出血有較多黏液滲出。有些雞群繼發(fā)大腸桿菌感染，肝周炎、心包炎，有些雞群發(fā)生卵黃破裂，形成卵黃性腹膜炎。有的則形成腹水。

2.2 病理組織學觀察

病理組織學病變主要表現(xiàn)為：呼吸道黏膜上皮細胞脫落，黏膜固有層充血、出血，水腫、淋巴細胞浸潤，呈卡他性或出血卡他性炎癥；肺間質(zhì)、肺房壁充血、出血、淋巴細胞浸潤呈間質(zhì)性肺炎病變；腎小管上皮細胞顆粒變性、水泡變性、壞死呈變質(zhì)性腎炎病變；腦血管充血，周圍少量淋巴細胞浸潤，神經(jīng)元變性壞死，周圍見膠質(zhì)細胞形成的衛(wèi)星或噬神經(jīng)現(xiàn)象，呈輕度病毒性腦炎病變；漿液纖維素性或纖維素性膿性炎癥；胰腺上皮細胞的變性壞死；有的出現(xiàn)脾臟紅髓充血，白髓淋巴組織顆粒、水泡變性，甚至表現(xiàn)壞死。

2.3 病毒分離的結(jié)果

保留有血凝性的尿囊液接種雞胚之后，雞胚全身出血。病毒液的血凝價為26與 NDV、AIV(H9和H5)等單因子陽性血清HI交叉抑制試驗：分離毒僅與H9N2亞型AIV因子血清產(chǎn)生血凝抑制，HI效價為27～29與其它無反應,證實該分離毒為低致病性禽流感病毒。

3 治療

對H9N2亞型禽流感，在嚴格隔離的條件下，使用抗病毒藥物仍有一些早期預防、減輕癥狀和減少損失的作用。抗病毒藥物，如鹽酸金剛乙胺0.01%拌料連用5～7d，病毒唑0.005%～0.01%飲水，連用4～5d，也可以用些中草藥來減輕癥狀，如板藍根或是黃芪多糖等?？咕幬锶绛h(huán)丙沙星、氟甲砜霉素、強力霉素等0.008%～ 0.01%飲水，連用5～7d，以防止大腸桿菌、支原體等繼發(fā)感染與 混合感染。同時可以在飼料水中增加0.18%的蛋氨酸、0.05%的賴氨酸、0.03%的VC或是多維素飲水，以抗應激，緩解癥狀，加快恢復體質(zhì)。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，山東省各地絕大多數(shù)產(chǎn)蛋雞群尤其是種雞群的低致病性禽流感免疫狀況良好，30份病雞中有19份檢測到H9為陽性，說明部分產(chǎn)蛋雞已發(fā)生感染。由于本省產(chǎn)蛋雞群均為多次免疫雞群，產(chǎn)蛋雞群發(fā)生的低致病性禽流感一般為非典型病例，只靠癥狀觀察、剖檢病變的臨床診斷不能確定，確診必須進行實驗室診斷。