老年垂體腺瘤患者PTTG表達(dá)和MVD計數(shù)與垂體腺瘤侵襲性的關(guān)系

孫慧莉 崔玉蘭 邢紹芝 (濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院門診部，山東 濱州 256603)

垂體腺瘤是由于垂體前葉腺細(xì)胞單克隆增生而形成的腺瘤，是較常見的顱內(nèi)腫瘤，約占所有顱內(nèi)腫瘤的10% ～15%。根據(jù)垂體腺瘤的生物學(xué)行為，可將其分為侵襲性和非侵襲性垂體腺瘤，侵襲性垂體腺瘤的生物學(xué)行為介于良性與惡性腺瘤之間，可破壞并侵襲患者鞍區(qū)骨質(zhì)和海綿竇等鞍區(qū)結(jié)構(gòu)，具有治愈率低、術(shù)后復(fù)發(fā)率和并發(fā)癥發(fā)生率高、內(nèi)分泌學(xué)緩解率低等特點(diǎn)，是臨床治療的難點(diǎn)〔1，2〕。侵襲性垂體腺瘤的發(fā)生機(jī)制與細(xì)胞周期調(diào)節(jié)、細(xì)胞增生活性、血管生成、細(xì)胞外基質(zhì)調(diào)控、癌基因及抑癌基因等相關(guān)，但目前尚無有效的指標(biāo)來評判垂體腺瘤的生物學(xué)性質(zhì)〔3〕。本文觀察老年垂體腺瘤患者垂體瘤轉(zhuǎn)化基因(PTTG)表達(dá)和微血管密度(MVD)計數(shù)與垂體腺瘤侵襲性的關(guān)系，為垂體腺瘤的臨床治療與預(yù)后評估提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2009年1月至2012年3月，在我科住院治療的老年垂體腺瘤患者52例，均有完備的臨床資料，無嚴(yán)重的基礎(chǔ)性疾病或重要臟器功能不全，排除了伴發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)其他腫瘤或惡性腫瘤腦轉(zhuǎn)移。根據(jù)臨床相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)分為侵襲性組和非侵襲性組，侵襲性組29例，男性16例，女性13例，年齡61～71歲，平均(66.2±3.6)歲;非侵襲性組23例，男性13例，女性10例，年齡60～72歲，平均(64.7±3.3)歲。兩組入選患者年齡、性別、患者基礎(chǔ)狀況等比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 侵襲性垂體腺瘤評判標(biāo)準(zhǔn) (1)根據(jù)Wilson-Hardy分類法〔4〕，選擇Ⅲ ～ Ⅳ級或者 C、D、E 分期的患者;(2)根據(jù) MRI的Knosp分級標(biāo)準(zhǔn)〔5〕，選擇3級以上的患者;(3)術(shù)中觀察腫瘤組織侵犯到鞍區(qū)骨質(zhì)、海綿竇、血管神經(jīng)和腦組織等周邊結(jié)構(gòu);(4)術(shù)后經(jīng)病理診斷證實患者伴硬腦膜的腫瘤侵犯。綜合以上評判標(biāo)準(zhǔn)，診斷垂體腺瘤是否具有侵襲性。

1.3 檢查方法 術(shù)后將腫瘤組織10%甲醛固定，組織包埋后連續(xù)切片，切片厚度3 μm。根據(jù)免疫組化試劑說明書，微波抗原修復(fù)后分別按序滴加一抗和二抗。PTTG檢測采用兔抗人多克隆抗體試劑盒，CD34檢測采用鼠抗人單克隆抗體試劑盒。

1.4 檢測評判標(biāo)準(zhǔn) (1)PTTG評判標(biāo)準(zhǔn)：染色后染色部位位于瘤細(xì)胞的胞核及胞質(zhì)，根據(jù)染色陽性腫瘤細(xì)胞數(shù)，半定量評判檢測結(jié)果：陰性或陽性細(xì)胞數(shù)＜5%為(-);陽性細(xì)胞數(shù)5% ～25%為(+);陽性細(xì)胞數(shù)25% ～50%為(?);陽性細(xì)胞數(shù)50% ～75%為(?);陽性細(xì)胞數(shù)＞75%為();陽性細(xì)胞為(+)及以上即計為陽性患者;(2)腫瘤組織內(nèi)MVD評定方法〔6〕：CD34染色部位位于細(xì)胞核膜，在低倍鏡(×40)下選擇陽性染色最為明顯的5個區(qū)域，接著在高倍鏡(×200)下進(jìn)行計數(shù)，將與腫瘤細(xì)胞、毗鄰微血管和周圍結(jié)締組織不相連的內(nèi)皮細(xì)胞簇作為一條獨(dú)立的微血管，將有平滑肌圍繞的大血管、管腔內(nèi)紅細(xì)胞超過8個的血管除外，腫瘤壞死區(qū)域、硬化區(qū)域和腫瘤細(xì)胞稀少區(qū)域的微血管不計入，取5個高倍鏡下微血管數(shù)的平均值計為微血管密度(MVD)。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 計數(shù)資料采用百分率表示，計量資料采用s表示，使用SPSS16.5統(tǒng)計學(xué)軟件分別行χ2檢驗和t檢驗。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者PTTG表達(dá)和MVD計數(shù)比較 侵襲性組和非侵襲性組患者PTTG表達(dá)陽性率分別為89.7%(26例)和17.4%(4例)，組間比較差異顯著(P＜0.01);MVD計數(shù)均值分別為39.26±7.38和20.17±5.34，組間比較差異顯著(P＜0.01)。

2.2 侵襲性組患者PTTG陽性程度與MVD計數(shù)相關(guān)性分析將PTTG(+)～()分別計為1～4級，PTTG(+)MVD計數(shù)(33.52±6.17)個，PTTG(?)MVD 計數(shù)(36.38±6.63)個，PTTG(?)MVD計數(shù)(40.76±7.28)個，PTTG()MVD計數(shù)(44.64±7.71)個。分析不同級別與其相應(yīng)MVD計數(shù)均值的相關(guān)性，r=0.806，P＜0.01，說明侵襲性老年垂體腺瘤患者PTTG陽性程度與MVD計數(shù)呈正相關(guān)。

3 討論

近年來，隨著細(xì)胞遺傳學(xué)與現(xiàn)代分子生物學(xué)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的不斷發(fā)展，對垂體腺瘤的認(rèn)識已經(jīng)從細(xì)胞水平逐漸達(dá)到分子水平。目前臨床研究證實，侵襲性垂體腺瘤的發(fā)生與發(fā)展，是由多種細(xì)胞因子及多基因相互作用的結(jié)果〔7〕。

正常人垂體中PTTG處于低水平表達(dá)，但在垂體腺瘤患者中其處于過度表達(dá)。PTTG誘發(fā)垂體腺瘤機(jī)制為：(1)PTTG通過與堿性成纖維細(xì)胞生長因子間形成正反饋環(huán)路，可以刺激腫瘤的血管生成;(2)PTTG通過激活c-Myc基因及其他脯氨酸增殖基因，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的增殖;(3)當(dāng)機(jī)體內(nèi)PTTG過度表達(dá)時，可造成機(jī)體出現(xiàn)非整倍性的細(xì)胞分裂，造成遺傳的不穩(wěn)定性。臨床研究證實，PTTG與垂體腺瘤、乳腺癌及肺癌等腫瘤的浸潤性相關(guān)，其可能的機(jī)制為：(1)PTTG通過促進(jìn)機(jī)體內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)的表達(dá)，從而促進(jìn)了細(xì)胞基質(zhì)的產(chǎn)生;(2)PTTG通過促進(jìn)bFGF和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá)，而形成了三者間的正反饋?zhàn)饔?，bFGF和VEGF可顯著促進(jìn)腫瘤內(nèi)血管的生成，到患者垂體腺瘤出現(xiàn)侵襲性〔8～10〕。

微血管生成是指在原微血管的基礎(chǔ)上，通過出芽的方式形成微血管(小靜脈及毛細(xì)血管)的過程。Folrman等〔11〕通過臨床試驗證實，機(jī)體內(nèi)腫瘤組織的生長以及轉(zhuǎn)移，均依賴于局部微血管的生成。這一觀點(diǎn)已得到臨床的證實與廣泛的認(rèn)同，同時通過臨床進(jìn)一步的研究證實，微血管生成在腫瘤組織的生長、轉(zhuǎn)移和侵襲過程中起到了極其重要的作用，若沒有局部新生微血管的支持，腫瘤組織無法達(dá)到3 mm以上，新生的微血管為腫瘤組織提供了必要的營養(yǎng)并帶走生長過程中的廢物，同時為腫瘤組織的侵襲或轉(zhuǎn)移提供了必要的途徑。因此，侵襲性垂體腺瘤內(nèi)MVD計數(shù)與其侵襲性密切相關(guān)，臨床研究同時也提示，MVD計數(shù)與腫瘤的病理分級、轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)密切相關(guān)，MVD計數(shù)可作為判斷腫瘤預(yù)后的獨(dú)立性指標(biāo)，MVD計數(shù)較高往往提示腫瘤的預(yù)后不良〔12〕。

本文研究證實，老年患者中PTTG表達(dá)和MVD計數(shù)與垂體腺瘤侵襲性密切相關(guān)。兩項指標(biāo)可提示老年垂體腺瘤患者的預(yù)后，指導(dǎo)臨床治療。

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