血漿ADMA水平與急性腦梗死的相關性研究＊

佘瑞芳，伏 兵，劉建華，錢明月，田亞平，陳皆春△

（1.蚌埠醫(yī)學院附屬連云港醫(yī)院神經內科，江蘇連云港 222000；2.中國人民解放軍總醫(yī)院生化科，北京 100853）

腦卒中位列全球人口全因病死率第4位，尤其在低、中等收入國家，其發(fā)病率仍在不斷升高［1］。有研究提出，非對稱性二甲基精氨酸（asymmetric dimethylarginine，ADMA）可能是一個新的心腦血管疾病危險因子，并可預示心腦血管疾病的患病風險和病死率［2］。Worthmann等［3］提出，血漿 ADMA水平可獨立推測腦卒中預后。然而，血漿ADMA水平與腦梗死病灶大小及病情嚴重程度有無相關性，及相互作用的病理生理機制如何，目前相關文獻較少。本研究從臨床實踐中探索血漿ADMA水平與急性腦梗死病灶大小及病情嚴重程度的相關性，以期為臨床提供一種急性腦梗死病情判斷的指標，并為缺血性腦卒中探尋新的治療靶點。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年12月至2013年6月蚌埠醫(yī)學院附屬連云港醫(yī)院，符合標準神經內科住院的急性腦梗死患者及體檢中心同期健康體檢者共186例。其中急性腦梗死組126例，男73例，女53例，平均年齡（63.44±9.92）歲；健康體檢者60例為對照組，其中男34例，女26例，平均年齡（63.85±8.57）歲。急性腦梗死組納入標準：首次發(fā)?。荒挲g40～80歲；病程72h內；梗死位于前循環(huán)供血區(qū)；符合全國第4屆腦血管病會議修訂的關于腦梗死的診斷標準［4］，并經頭顱CT／磁共振成像／磁共振擴散加權成像等影像學證實；知情同意，依從性好。排除標準：有嚴重感染或自身免疫性疾病者；有腦腫瘤、腦出血、出血性腦梗死的患者；近3個月有心肌梗死病史者；心房顫動、甲狀腺疾病，嚴重心、肝、腎功能不全者。對照組納入標準：年齡、性別與急性腦梗死組相匹配，經詢問病史既往無腦血管病病史。

1.2 方法 急性腦梗死組依據(jù)梗死灶面積大小分為4組［5］：腔隙性梗死組（梗死最大徑線1.5cm以下）；小梗死組（梗死最大徑線為1.6～3.0cm）；中梗死組（梗死小于一個腦葉，最大徑線為3.1～5.0cm）；大梗死組（超過一個腦葉，或最大徑線5 cm以上）。神經功能缺損程度分型：按美國國立衛(wèi)生研究所卒中量表（NIHSS）評分進行神經功能缺損程度評估，分為輕型梗死組（＜4分）、中型梗死組（4～15分）、重型梗死組（＞15分）［6］。標本采集：所有患者于入院后第2天清晨空腹時，用肝素鋰抗凝管收集新鮮靜脈血3mL，離心（3000r／min，10 min），吸取上清血漿置于－80℃冰箱中保存。為減小批間誤差和測量誤差，完成全部標本采集后一次性成批檢測。血漿ADMA采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）進行檢測，試劑盒及質控品購自北京九強生物技術股份有限公司，操作完全按照說明書進行。三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）的測定用RxL Max HM全自動生化分析儀。

1.3 統(tǒng)計學處理 采用SPSS13.0軟件進行數(shù)據(jù)處理。對所有計量資料進行正態(tài)性或方差齊性檢驗，符合正態(tài)分布的資料采用表示，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗；多組間比較采用單因素方差分析。計數(shù)資料采用頻數(shù)、百分比表示，組間比較采用χ2檢驗。相關性分析采用Spearman相關分析法。所有檢驗均采用雙側檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 急性腦梗死組與對照組基本資料比較 兩組研究對象的性別、年齡，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。吸煙史、高血壓病史、糖尿病病史、TG、LDL、HDL比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 急性腦梗死組與對照組一般資料比較

2.2 血漿ADMA濃度與腦梗死病灶面積的關系 腔隙性梗死組、小梗死組、中梗死組、大梗死組的血漿ADMA水平均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。不同梗死面積組間多重比較，腔隙性梗死組與小梗死組、中梗死組、大梗死組比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＝0.010、P＝0.000、P＝0.000）；小梗死組與中梗死組、大梗死組比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＝0.035、P＝0.000）；中梗死組與大梗死組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＝0.028）。見表2。Spearman相關分析發(fā)現(xiàn)血漿ADMA水平與病灶面積大小呈正相關（r＝0.633，P＝0.000）。

2.3 血漿ADMA濃度與神經功能缺損程度的關系 輕型梗死組、中型梗死組、重型梗死組的血漿ADMA水平均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。不同神經損傷程度組間多重比較，輕型梗死組與中型梗死組、重型梗死組比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＝0.017、P＝0.000）；中型梗死組與重型梗死組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＝0.010），見表3。Spearman相關分析發(fā)現(xiàn)血漿ADMA與神經功能缺損程度呈正相關（r＝0.392，P＝0.000）。

表2 不同梗死面積組與對照組血漿ADMA比較

表3 不同神經功能缺損程度與對照組血漿ADMA比較

3 討 論

ADMA是一種內源性一氧化氮合酶抑制劑，主要由蛋白精氨酸甲基轉移酶－1（protein arginine methyltransferase，PRMT－1）催化含甲基化精氨酸殘基的蛋白水解產生［7］，大部分在二甲基精氨酸二甲胺水解酶－1（dimethylarginine dimethylaminohydrolase DDAH－1）的作用下代謝為L－胍氨酸和二甲胺［8］，從而形成一條 PRMT1－ADMA－DDAH1代謝軸。若該代謝軸兩端的表達或功能異常，就可致ADMA堆積。具體概述為：（1）PRMT－1基因表達或酶活性增強：氧化應激增強［9］、氧化修飾型LDL增多等［10］。（2）甲基化蛋白水解速率增加：見于機體代謝增加的情況下，如發(fā)燒、甲狀腺功能亢進等。（3）腎功能不全使濾過功能下降導致排泄減少。（4）DDAH－1基因表達或酶活性下降：氧化應激、高血糖、高同型半胱氨酸、高血壓、氧化修飾型LDL、炎性反應等［11］。（5）其他因素：如堿性氨基酸轉運蛋白－1表達下降使從循環(huán)中攝取ADMA到細胞內的量減少，從而導致血漿中ADMA水平升高［12］。

腦梗死急性期腦組織缺血缺氧氧化應激釋放活性氧族物質，梗死病灶越大其釋放越多，再加上酸中毒、炎性反應等影響，使PRMT－1基因表達上調及酶活性增強，DDAH－1基因表達下調、酶活性受抑制，從而導致ADMA積聚。先前研究提出，腦梗死急性期ADMA在血漿［13］和腦脊液［14］中的濃度均有增加。本研究將急性腦梗死患者依據(jù)病灶面積大小分為腔隙性、小、中、大梗死4個亞組，檢測血漿ADMA水平，比較組間差異，分析其與病灶大小的相關性。結果發(fā)現(xiàn)急性腦梗死組血漿ADMA水平高于對照組，并且血漿ADMA水平與病灶大小呈正相關（r＝0.633，P＝0.000）。研究表明ADMA參與了急性腦梗死的病理生理過程，通過測定血漿ADMA水平能反映中樞神經細胞的損傷和死亡程度，這與Leong等［15］研究結果基本一致。本研究還發(fā)現(xiàn)血漿ADMA水平與入院時NIHSS評分呈正相關（r＝0.392，P＝0.000），提示血漿 AD－MA水平可反映急性腦梗死患者病情的嚴重程度，與金艷等［16］研究結果相符。

綜上所述，急性腦梗死患者血漿ADMA水平升高，且隨病灶增大和神經功能缺損程度加重而升高，提示ADMA參與了急性腦梗死的病理生理過程。測定血漿ADMA水平對評估急性腦梗死患者病灶大小、病情嚴重程度，進而判斷其預后具有重要意義。

［1］Lozano R，Naghavi M，F(xiàn)oreman K，et al.Global and regional mortality from 235causes of death for 20age groups in 1990and 2010：a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2010［J］.Lancet，2012，380（9859）：2095－2128.

［2］Sibal L，Agarwal SC，Home PD，et al.The role of asymmetric dimethylarginine（ADMA）in endothelial dysfunction and cardiovascular disease［J］.Curr Cardiol Rev，2010，6（2）：82－90.

［3］Worthmann H，Chen S，Martens－Lobenhoffer J，et al.High plasma dimethylarginine levels are associated with adverse clinical outcome after stroke［J］.J Atheroscler Thromb，2011，18（9）：753－761.

［4］中華神經科學會中華神經外科學會.各類腦血管疾病診斷要點［J］.中華神經科雜志，1996，29（6）：379－380.

［5］黃如訓.神經病學［M］.4版.北京：高等教育出版社，2010：332.

［6］饒明俐.中國腦血管病防治指南［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2007：140－141.

［7］Leiper J，Nandi M.The therapeutic potential of targeting endogenous inhibitors of nitric oxide synthesis［J］.Nat Rev Drug Discov，2011，10（4）：277－291.

［8］Blackwell S.The biochemistry，measurement and current clinical significance of asymmetric dimethylarginine.［J］.Ann Clin Biochem，2010，47（Pt 1）：17－28.

［9］Himmelfarb J.Uremic toxicity，oxidative stress，and hemodialysis as renal replacement therapy［J］.Semin Dial，2009，22（6）：636－643.

［10］Ueda S，Yamagishi S，Okuda S.New pathways to renal damage：role of ADMA in retarding renal disease progression［J］.J Nephrol，2010，23（4）：377－386.

［11］卜云濤，邊波，萬征.非對稱性二甲基精氨酸和冠狀動脈性心臟病及其危險因素的關系［J］.中國循證心血管醫(yī)學雜志，2011，3（1）：63－66.

［12］Teerlink T.ADMA metabolism and clearance［J］.Vasc Med，2005，10（1）：73－81.

［13］Wanby P，Teerlink T，Brudin L，et al.Asymmetric dimethylarginine（ADMA）as a risk marker for stroke and TIA in a Swedish population［J］.Atherosclerosis，2006，185（2）：271－277.

［14］Brouns R，Marescau B，Possemiers I，et al.Dimethylarginine levels in cerebrospinal fluid of hyperacute ischemic stroke patients are associated with stroke severity［J］.Neurochem Res，2009，34（9）：1642－1649.

［15］Leong T，Zylberstein D，Graham I，et al.Asymmetric dimethylarginine independently predicts fatal and nonfatal myocardial infarction and stroke in women：24－year follow－up of the population study of women in Gothenburg［J］.Arterioscler Thromb Vasc Biol，2008，28（5）：961－967.

［16］金艷，張春和，王艷玲.脂蛋白相關磷脂酶A2和非對稱二甲基精氨酸與急性缺血性腦卒中的相關性研究［J］.中國醫(yī)藥，2012，7（11）：1366－1368.