園林地被植物連錢草的組培繁殖試驗(yàn)

王素玲，劉洪志，季小慧

(1.黑龍江省齊齊哈爾林業(yè)學(xué)校，黑龍江 齊齊哈爾161006；2.黑龍江省葦河林業(yè)局青山林木種子園，黑龍江 哈爾濱150628；3.黑龍江省森林與環(huán)境科學(xué)研究院，黑龍江 齊齊哈爾161005)

連錢草(Glechomalongituba)(活血丹)為唇形科活血丹屬多年生草本，具匍匐莖，逐節(jié)生根，直立莖，高6～30cm，基部通常淡紫紅色，被短柔毛，單葉對(duì)生，葉片心型或倒腎型，長(zhǎng)0.8～3.2cm，寬1～3cm，邊緣具圓齒，被短柔毛，背面常常紫色。輪傘花絮，通常2花，稀具3～5花，花唇型，花冠淡藍(lán)色，淡紫色至淡藍(lán)紫色，長(zhǎng)1.4～2.3cm，花期5—6月，果期6—7月，綠期4—10月，生于林緣、林下、山坡、路旁，黑龍江省大部分地區(qū)有分布。

連錢草是黑龍江省西部半干旱地區(qū)園林綠化中不可多得的耐陰地被植物。連錢草綠期長(zhǎng)，枝葉繁茂，稠密，根系發(fā)達(dá)，極耐干旱，花后即匍地生長(zhǎng)，形成地毯狀地面，草層低矮，在林下侵占能力強(qiáng)，一旦成片，雜草不易侵入，在株行距15cm×15cm，全光照條件下，45d左右蓋度可達(dá)100%。在一定庇陰條件下，如40%～60%光照條件下生長(zhǎng)最為宜，觀賞效果最好，在20%的光下也能生長(zhǎng)，耐陰性較強(qiáng)，耐踐踏，而且生長(zhǎng)速度不很快，不會(huì)瘋長(zhǎng)、失控，繁殖容易，管理粗放，適宜做庇陰條件下的地被，在封閉性林下或林緣成片進(jìn)行栽植，或栽植于大型公園林下作地被，其粗糙寬大的葉片，能夠增加許多野趣[1]。

連錢草以往的繁殖方式以種子和扦插繁殖為主，然而，種子量少，不易采集。扦插繁殖系數(shù)較低，影響推廣應(yīng)用進(jìn)度。為此，開展組培快繁對(duì)于擴(kuò)大連錢草種群規(guī)模、保存種質(zhì)資源等具有十分重要的意義。我們與2011—2012年對(duì)其進(jìn)行了組培快繁的試驗(yàn)研究。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

植株新萌發(fā)的側(cè)芽為外植體

1.2 激素及其純度

6- 芐基腺嘌呤(BA)、α- 萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA)，均為分析純?cè)噭缮虾２畩W生物科技有限公司提供。生產(chǎn)試驗(yàn)中使用的瓊脂粉也由上海伯奧生物科技有限公司提供，以綿白糖代替蔗糖。

1.3 培養(yǎng)條件

誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基：1／2MS＋BA 2.0mg·L-1＋NAA 0.5mg·L-1(單位下同)；增殖培養(yǎng)基：MS＋BA 0.5～1.5＋ NAA 0.1～0.5(見表1)；生根培養(yǎng)基：1／2MS＋I(xiàn)BA 0～1.0＋NAA 0～1.0(見表2)。誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基和增殖培養(yǎng)基蔗糖濃度為2.0%，生根培養(yǎng)基蔗糖濃度為2.0%；瓊脂6g·L-1；pH值在高壓滅菌前保持5.8～6.0；培養(yǎng)溫度(25±2)℃、光照強(qiáng)度2000lx，連續(xù)光照10h·d-1。

1.4 試驗(yàn)材料的處理

側(cè)芽連同莖段取出，流水下沖洗30min后，留上部莖段長(zhǎng)0.5～1.0cm，置超凈工作臺(tái)中，先在75%酒精中浸30s，用無菌水沖洗1次，轉(zhuǎn)入0.1%升汞中消毒30s～1min，用無菌水沖洗3～5次后，用無菌吸水紙吸去材料表面水分，接種到誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基中，再依次轉(zhuǎn)入增殖、生根培養(yǎng)基中，觀察培養(yǎng)結(jié)果，生根后煉苗移栽。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同激素配比對(duì)增殖率的影響

在誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基中20d左右的無菌苗四周萌發(fā)不定芽。將苗切下轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基中。

表1 不同激素對(duì)連錢草組培苗增殖的影響

表1顯示，連錢草在設(shè)計(jì)的幾種培養(yǎng)基中均能繁殖、分化，相比之下，不同細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素濃度處理中，組培苗以培養(yǎng)基1／2MS＋BA1mg·L-1＋NAA1mg·L-1中的側(cè)芽萌發(fā)迅速，30d形成叢生苗，長(zhǎng)勢(shì)良好，繁殖系數(shù)可達(dá)5.5左右。BA濃度低增殖率下降，BA濃度過高，組培苗分化多、長(zhǎng)勢(shì)弱。

2.2 不同激素配比對(duì)組培苗生根的影響

從增殖培養(yǎng)基中切取長(zhǎng)為1cm左右的莖段連同小葉，轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基(見表2)中。結(jié)果表明：連錢草容易生根，在設(shè)計(jì)的幾種培養(yǎng)基中均能生根，相比之下1／2MS＋NAA0.1＋I(xiàn)BA0.1的生根最佳，生根率達(dá)100%。根部成輻射狀對(duì)稱。

表2 不同生根培養(yǎng)基對(duì)組培苗生根的影響

2.3 煉苗與移栽管理

將連錢草生根培養(yǎng)瓶上的扎口繩松開，使組培苗初步接觸空氣，讓植株開始長(zhǎng)出角質(zhì)層。然后移去瓶口包扎物，讓組培苗充分接觸空氣，2～3d后，組培苗對(duì)外界環(huán)境已逐漸適應(yīng)，且培養(yǎng)基已開始長(zhǎng)出菌類，此時(shí)進(jìn)行組培苗的出瓶煉苗。首先，小心地用鑷子夾持組培苗將苗從瓶中移出，用流水慢慢沖凈植株根部的培養(yǎng)基，注意切勿傷及根部的根毛，小心地將洗凈的脫毒苗移栽到事先已經(jīng)滅菌處理過的營(yíng)養(yǎng)杯中，并用塑料膜進(jìn)行覆蓋，使?fàn)I養(yǎng)杯內(nèi)的相對(duì)濕度保持在80%左右，以后定期放風(fēng)，逐漸降低棚內(nèi)的相對(duì)濕度，直至將塑料膜去掉，移栽成活率在95%以上。

3 結(jié)論

通過試驗(yàn)篩選出連錢草增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基，并成功移栽組培苗，發(fā)現(xiàn)連錢草在離體條件下生長(zhǎng)迅速，分化和生根培養(yǎng)良好，作為黑龍江省少有的地被植物，在繁殖過程中，應(yīng)該考慮在簡(jiǎn)化組織培養(yǎng)程序后，開展工廠化生產(chǎn)來提高繁殖系數(shù)，擴(kuò)大連錢草種群，早日廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)。

[1]王杰青.地被植物連錢草和紫花地丁的研究[D].哈爾濱：東北林業(yè)大學(xué)，2002