不同品種甘薯藤蔓部分活性成分含量的比較

羅 霞，魏 巍，余夢瑤，江 南，伍 明,2，許曉燕,*

(1.四川省中醫(yī)藥科學(xué)院，四川 成都 610041；2.四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，四川 成都 610064)

甘薯(Ipomoea batata Lam.)是旋花科1年生或多年生草本植物，又稱紅薯、白薯、番薯、紅苕等。目前，我國的甘薯總種植面積保持在620萬公頃左右，總產(chǎn)量穩(wěn)定在1億t以上，占全世界的80%，是世界上最大的生產(chǎn)國。然而，當(dāng)收獲甘薯的塊莖后，還留下大量地面的藤蔓(包括葉、柄和莖)部分，其中小部分作為家畜飼料，其余大部分被棄置于田間自然降解，既污染環(huán)境，又造成極大的資源浪費。

現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，甘薯藤蔓除含有豐富的纖維素、蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)和維生素等營養(yǎng)物質(zhì)外，還有含有大量的多糖、黃酮類化合物、多酚、類胡蘿卜素、綠原酸、咖啡酸等生物活性的物質(zhì)，具有抗腫瘤[1]、抑菌[2]、降血脂[3]、抗氧化[4]、提高免疫[5]等功能，此外具有降低多種糖尿病動物模型血糖的功能[6-8]，可作為保健品甚至藥品開發(fā)的原料。而現(xiàn)有文獻(xiàn)大多是對甘薯藤蔓化學(xué)成分的分析研究，少有對多個品種甘薯藤蔓的化學(xué)成分進行比較，對此，本實驗通過對四川不同甘薯主栽品種的藤蔓進行活性物質(zhì)的含量測定，比較不同品種間活性成分的差異，為其精深加工研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

渝甘、綿粉等7個不同品種甘薯的藤蔓，由四川光友薯業(yè)有限公司提供，均產(chǎn)自四川省綿陽市的甘薯種植基地，為收獲甘薯后的地面部分(包括葉、柄和莖)，清凈晾干，粉碎后在干燥箱中60℃烘至恒質(zhì)量，編號樣品A、B、C、D、E、F、G，干燥器中保存。

β-胡蘿卜素、綠原酸、咖啡酸、矢車菊素-3-O-葡萄糖苷標(biāo)準(zhǔn)品 中國食品藥品檢定研究院；蘆丁、沒食子酸、牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品 美國Sigma公司；HPLC測試中所用乙腈、甲醇為色譜純，其余試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

KXH-101-2A電熱鼓風(fēng)干燥箱 上?？莆鲈囼瀮x器廠；SY-1000E多用途超聲恒溫提取機 北京弘祥隆生物技術(shù)有限公司；00-048型中藥粉碎機 上海淀久中藥機械制造有限公司；Sorvall Evolution RC高速冷凍離心機 美國Thermo公司；UV-2802紫外-可見分光光度計 美國優(yōu)尼科公司；1525-2487高效液相色譜 美國Waters公司。

1.3 方法

1.3.1 水溶性蛋白含量的測定

取樣品0.1g，放研缽內(nèi)加pH7.5磷酸緩沖液2mL研磨至糊狀，然后加5mL緩沖液浸提30min，5000r/min離心，將上清液定容至25mL。取定容提取液1mL，放入試管，以牛血清白蛋白作為標(biāo)準(zhǔn)對照，采用Bradford法[9]在595nm處測定吸光度。

1.3.2 多糖的測定

樣品粉碎后過100目篩，精密稱取本品粉末2g，置索氏提取器中，加入90mL蒸餾水，100℃加熱回流提取至提取液無色，定容至100mL，精密量取10mL，加入95%乙醇150mL，搖勻，4℃沉淀過夜。取出，離心，傾去上清液，沉淀加水溶解定容至50mL，以葡萄糖作為標(biāo)準(zhǔn)對照，采用“硫酸-蒽酮法”[10]在620nm波長處測定吸光度。

1.3.3 多酚的測定

精密稱取樣品2g，加入50mL 60%乙醇80℃回流提取1h，過濾，于60℃減壓旋至無乙醇味，蒸餾水定容至250 mL，以沒食子酸作為標(biāo)準(zhǔn)對照，采用“福林酚法”[11]，在760nm波長處測定吸光度。

1.3.4 黃酮的測定

精密稱取樣品2g，加入50mL 70%乙醇回流提取2h，粗提液冷卻后，減壓抽濾，并用少量25%乙醇溶液洗滌濾渣，合并濾液。在50℃條件下減壓蒸餾，除去其中的乙醇。倒出瓶內(nèi)溶液，用30mL熱水分3次洗滌燒瓶，抽濾后，濾液以75mL氯仿萃取3次，收集水層溶液定容至60mL。稱取1～2g經(jīng)預(yù)處理的聚酰胺樹脂粉末，濕法裝柱，用水飽和，吸取上述脫脂后的水溶液2mL，沿層析柱慢慢滴入柱內(nèi)，放置一定時間待充分吸附后，用50mL 70%乙醇洗脫，定容至100mL，以蘆丁作為標(biāo)準(zhǔn)對照，采用“亞硝酸鈉-硝酸鋁-氫氧化鈉比色法”[12]，在510nm波長處測定吸光度。

1.3.5 花青素的測定

樣品粉碎至20目。取樣品1g加入甲醇試劑，置振蕩機上振蕩20min，過濾。共萃取3次，固液比分別為1： 9、1：8、1：7，將3次萃取液合并定容于25mL容量瓶中。以矢車菊素-3-O-葡萄糖苷為標(biāo)準(zhǔn)品，采用“草醛-鹽酸法”[13]，在500nm 波長處測定吸光度。

1.3.6 β-胡蘿卜素的測定

樣品粉碎后過100目篩，稱取1g于100mL具塞三角瓶中，加入40mL丙酮-石油醚溶液(3：7，V/V)，塞緊瓶塞，暗處放置15h以上，抽濾，定容至50mL，以β-胡蘿卜素為標(biāo)準(zhǔn)對照，在波長450nm處測定吸光度[14]。

1.3.7 綠原酸的測定

樣品粉碎后過40目篩，稱取0.5g加70%乙醇100mL，密塞，浸漬0.5h，超聲提取40min(功率250W，頻率35kHz)，取出，冷卻，用70%乙醇定容至刻度，搖勻，靜止，上清液用0.45μm濾膜濾過。以綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品為對照。色譜柱：Waters Symmetry C18柱(4.6m×250mm，5μm)；流動相：乙腈-0.4%磷酸溶液(15：85，V/V)；進樣量：10μL；流速：1.0mL/min；柱溫：30℃；檢測波長：327nm[15]。

1.3.8 咖啡酸的測定

樣品粉碎后過40目篩，稱取1g烘干樣品置250mL圓底燒瓶中, 精密加入50%甲醇50mL浸泡1h后回流提取2h。放冷濾過，用50%甲醇沖洗2～3次，蒸干。殘渣加氯仿適量浸漬3min，棄去氯仿液，殘渣揮去氯仿，用50%甲醇溶解并定容至10mL，用0.45μm濾膜濾過。以咖啡酸標(biāo)準(zhǔn)品為對照，色譜條件除以下兩項外同1.3.7節(jié)：柱溫：25℃；波長：323nm[16]。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

每個樣品重復(fù)測定5次，結(jié)果取平均值進行統(tǒng)計。

2 結(jié)果與分析

2.1 水溶性蛋白

由表1可以看出，水溶性蛋白在不同品種之間存在差異，以樣品B可溶性蛋白含量最高，達(dá)到16.89mg/g，其次為樣品C和E，水溶性蛋白含量分別為13.739mg/g和13.419mg/g，樣品D的水溶性蛋白含量最低為9.54mg/g。

表1 不同藤蔓中水溶性蛋白、多糖、多酚、黃酮、花青素、β-胡蘿卜素、綠原酸、咖啡酸的含量Table 1 Chemical composition of sweet potato vines from seven cultivars

2.2 多糖

由表1可以看出，甘薯藤蔓多糖含量在品種間的差異較大，以樣品F含量最高，含量達(dá)到8.79mg/g，其次為樣品D、E和C分別為5.95、4.48、4.29mg/g，樣品A、G多糖含量較低為2.95、2.63mg/g。

2.3 多酚

由表1 可以看出，樣品B 多酚含量最高，達(dá)到43.21mg/g，樣品F的多酚含量最低僅為18.89mg/g。

2.4 黃酮

由表1可以看出，黃酮在樣品D中含量最高，含量達(dá)到41.52mg/g，其次為C、E和G含量分別為30.96、30.61mg/g和28.71mg/g，其余樣品多酚含量較低均不到20mg/g。

2.5 花青素

由表1可以看出，花青素在樣品B、G、A、C和E中含量豐富，含量最高的樣品為B，花青素含量達(dá)到4.00mg/g，其余含量均在3.40～4.00mg/g之間；樣品D和F花青素含量較低分別為2.11mg/g和1.83mg/g。

2.6 β-胡蘿卜素

由表1可以看出，β-胡蘿卜素在幾個樣品中的含量存在差異，其中樣品C中的β-胡蘿卜素含量最高為2.88mg/g，其次為樣品G，含量為2.03mg/g，最低樣品F，含量為1.26mg/g。

2.7 綠原酸

由表1可以看出，綠原酸含量在樣品之間的差異較明顯，樣品B、E和G中綠原酸含量最高，分別為1150.61、1080.46、924.51μg/g，其次樣品A、C和D含量在500～600μg/g之間，而樣品F的綠原酸含量僅有69.38μg/g。

2.8 咖啡酸

由表1可以看出，咖啡酸含量在樣品之間的差異較明顯，樣品B中咖啡酸含量達(dá)到426.85μg/g，其次樣品D、E含量為214.32、107.89μg/g，其余樣品均不到100μg/g。

3 結(jié) 論

甘薯藤蔓中含有豐富的生物活性成分，是巨大的藥用資源寶庫，其生物活性成分與其功效的研究近年來也逐步受到重視，具有重要的科研價值。雖然目前對甘薯藤蔓中活性成分的研究不少，但基于不同品種的研究卻沒有。本實驗通過對四川省內(nèi)7個主栽品種的研究，發(fā)現(xiàn)生物活性成分在不同的品種間存在明顯的差異，除水溶性蛋白以外，咖啡酸，多糖、多酚、黃酮等生物活性成分，其含量在不同甘薯品種的藤蔓間差異顯著。其中差異最大的是綠原酸，品種間含量差異可達(dá)16倍，其次為咖啡酸，多糖、多酚、黃酮、花青素、β-胡蘿卜素含量最高值與最低值之間也有2～4倍的差異。因此，本研究認(rèn)為，在進行甘薯藤蔓的開發(fā)利用中，首先應(yīng)對品種進行確定，再有針對性的進行精深加工，根據(jù)不同品種的特性，開發(fā)不同的精深加工產(chǎn)品類型，滿足不同的市場的需求。

[1] 羅麗萍, 高蔭榆, 洪雪娥, 等. 甘薯葉柄藤類黃酮的抗腫瘤作用研究[J]. 食品科學(xué), 2006, 27(6)： 248-250.

[2] 王世寬, 許艷麗, 潘明, 等.甘薯葉中綠原酸的提取及抑菌作用的研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué), 2010, 38(11)： 5862-5863; 5876.

[3] 王世寬, 吳平, 許艷麗, 等. 甘薯葉的營養(yǎng)成份與應(yīng)用前景[J]. 四川理工學(xué)院學(xué)報： 自然科學(xué)版, 2009, 22(6)： 57-59; 62.

[4] 劉主, 朱必鳳, 彭凌, 等. 甘薯糖蛋白降血糖與抗氧化作用研究[J]. 食品科學(xué), 2008, 29(11)： 582-584.

[5] 劉主, 朱必鳳, 彭凌, 等. 甘薯糖蛋白SPG-1抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)作用研究[J]. 食品科學(xué), 2008, 28(5)： 312-316.

[6] 趙蕊, 李青旺, 張濤. 紅薯葉黃酮對老齡糖尿病模型大鼠的免疫調(diào)節(jié)作用[J]. 中國老年學(xué)雜志, 2009, 30(10)： 1395-1397.

[7] 孫小新, 李青旺, 段艷粉, 等. 紅薯葉黃酮對四氧嘧啶糖尿病小鼠降血糖作用的研究[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī)： 科技版, 2010(6)： 140-142.

[8] 馮彩寧, 李青旺, 李鳳林, 等. 紅薯葉黃酮對糖尿病PDX-1基因表達(dá)的影響[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī)： 科技版, 2009(10)： 108-109.

[9] 李海玲, 彭書明, 李凜, 等. 4種常用蛋白濃度測定方法的比較[J]. 中國生化藥物雜志, 2008, 29(4)： 277-278; 282.

[10] 吳曉青, 陳丹, 邱紅鑫, 等. 芙蓉李中總多酚含量測定方法的優(yōu)選[J]. 中國中醫(yī)藥科技, 2011, 18(2)： 131-133.

[11] 白鴻. 保健食品功效成分檢測方法[M]. 北京： 中國中醫(yī)藥出版社, 2011.

[12] 李鳳林, 李青旺, 高大威, 等. 超聲波法提取甘薯葉總黃酮的工藝研究[J]. 江蘇調(diào)味副食, 2008, 25(3)： 13-18.

[13] 張素華. 沙棘及其提取物中原花青素含量的分析測定[J]. 沙棘, 2008, 21(1)： 16-18.

[14] 李堅, 滕咸, 柳琪, 等. 甘薯中胡蘿卜素含量測定方法的探討[J]. 萊陽農(nóng)學(xué)院學(xué)報, 1991, 8(2)： 154-157.

[15] 史克莉, 許蠟英, 等. 不同提取方法對金銀花中綠原酸含量測定的影響[J]. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊, 2007, 25(4)： 820-822.

[16] 吳媛媛, 蔣桂華, 譚鐳, 等. 高效液相色譜法測定川滇產(chǎn)亞貢葉中咖啡酸的含量[J]. 成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報, 2010, 33(1)： 76-78.