姜匯涓
肺炎衣原體致急性呼吸系統(tǒng)感染的臨床分析
姜匯涓
目的研究呼吸系統(tǒng)感染患者在急性肺炎衣原體感染的發(fā)病情況以及臨床特征表現(xiàn)。方法選取220例住院患者均為呼吸系統(tǒng)感染,隨機(jī)分為肺炎衣原體急性感染患者組50例和非肺炎衣原體急性感染患者組170例。采集標(biāo)本為咽拭子以及痰標(biāo)本,肺炎衣原體DNA的表達(dá)檢測(cè)采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)進(jìn)行檢測(cè),肺炎衣原體的IgG和IgM抗體表達(dá)情況采取靜脈血進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果本研究呼吸系統(tǒng)感染患者的肺炎衣原體IgG抗體的陽(yáng)性率為70%(154/220),聯(lián)合應(yīng)用兩種方法的陽(yáng)性表達(dá)率為23%(50/220)。肺炎衣原體患者的急性感染常以肺炎、支氣管哮喘患者的急性發(fā)作、急性支氣管炎患者的表現(xiàn)及慢性阻塞性肺疾病患者的急性加重表現(xiàn)為常見(jiàn),其臨床表現(xiàn)無(wú)特征性癥狀。結(jié)論本研究成年人呼吸系統(tǒng)感染的患者在肺炎衣原體患者急性感染的發(fā)病發(fā)生率較高,分析肺炎衣原體可能是呼吸系統(tǒng)感染的重要致病原。
呼吸系統(tǒng)感染;肺炎衣原體;臨床分析
上世紀(jì)八十年代后期發(fā)現(xiàn)的呼吸系統(tǒng)病原體為肺炎衣原體,其可導(dǎo)致鼻竇炎、咽炎,嚴(yán)重者可發(fā)生急性支氣管炎和肺炎[1]。本研究通過(guò)檢測(cè)肺炎衣原體DNA在痰與咽拭子中的表達(dá),以及檢測(cè)血清中肺炎衣原體的抗體表達(dá)情況,對(duì)肺炎衣原體引起的急性呼吸道感染的住院患者進(jìn)行臨床分析,現(xiàn)將本實(shí)驗(yàn)研究統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果報(bào)告如下。
1.1 一般資料收集2012年1月~12月于葫蘆島市中心醫(yī)院呼吸科住院患者220例,年齡14~81歲,其中女60例,男180例。上述病例均有呼吸系統(tǒng)疾病感染,包括上呼吸道感染10例,急性支氣管炎16例、支氣管擴(kuò)張癥和肺膿腫16例,支氣管哮喘伴有急性發(fā)作14例,慢性阻塞性肺疾病伴有急性加重54例,肺結(jié)核12例,肺炎40例,肺癌48例,其它疾病并發(fā)肺部感染10例。隨機(jī)分為肺炎衣原體急性感染患者組 50例和非肺炎衣原體急性感染患者組170例。
1.2 分析內(nèi)容包括呼吸系統(tǒng)疾病患者入院前所使用的抗生素等藥物、發(fā)病時(shí)間以及臨床癥狀表現(xiàn)、體征、既往病史;通過(guò)輔助檢查胸部影像學(xué)變化及臨床診斷情況等。
1.3 常規(guī)檢查實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測(cè)包括痰液的細(xì)菌以及真菌培養(yǎng),血常規(guī)檢測(cè)、血液的細(xì)菌以及真菌培養(yǎng)、巨細(xì)胞病毒(CMV)IgG和IgM抗體的檢測(cè)、血清冷凝集試驗(yàn)、軍團(tuán)菌免疫熒光抗體的檢測(cè)和EB病毒的IgA抗體檢測(cè)等。
1.4 標(biāo)本采集
1.4.1 血清標(biāo)本的處理患者入院后立即收集血液標(biāo)準(zhǔn),其中132例(60%)于1~2w之后收集第2份血液標(biāo)本,分離出的血清置于冰箱冰凍等待檢測(cè)。
1.4.2 痰液及咽拭子標(biāo)本的收集當(dāng)患者入院后醫(yī)護(hù)人員立即收集咽拭子及從呼吸道深部咳出下呼吸道的痰液標(biāo)本。痰液:加入 1~2ml的液化劑進(jìn)行混勻,抽取0.5ml液化的痰液,然后加入1ml液化劑,振蕩達(dá)到無(wú)可見(jiàn)的塊狀物標(biāo)準(zhǔn),離心 5min后棄上清液,加入 0.5ml PBS,置于冰箱冰凍等待檢測(cè)。咽拭子:標(biāo)本收集后隨即置于1ml生理鹽水中洗滌,于冰箱冰凍等待檢測(cè)。
1.5 血清學(xué)檢測(cè)本實(shí)驗(yàn)采用 Grayston[2]描述的MIF試驗(yàn)檢測(cè)肺炎衣原體IgG和IgM的表達(dá)情況??贵w是兔抗人IgG和羊抗人IgM。
1.6 擴(kuò)增肺炎衣原體的DNA表達(dá)檢測(cè)本實(shí)驗(yàn)采用文獻(xiàn)記載的肺炎衣原體的DNA擴(kuò)增方法[3]:①引物:HM-1-HR-1為特異的474bp的PstⅠ限制性片段,其選自肺炎衣原體的基因,其核苷酸的序列為:HR-1,TGCATAACCTACGGTGTGTT; HM-1, GTGTCATTCGCCAAGGTTAA:擴(kuò)增的片段長(zhǎng)度是229bp。②擴(kuò)增條件:總的反應(yīng)體積50μl,每批標(biāo)本的檢測(cè)時(shí)間均設(shè)空白、陽(yáng)性以及陰性組。③結(jié)果:取10μl擴(kuò)增的產(chǎn)物,經(jīng)過(guò)1.5%瓊脂糖凝膠電泳,最后溴化乙錠進(jìn)行染色,在紫外透視儀下觀(guān)察產(chǎn)物表達(dá)情況。若可見(jiàn)與229bp平行的擴(kuò)增條帶則視為陽(yáng)性。
1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)進(jìn)行處理,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用χ2檢驗(yàn),以P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.01有顯著性的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 肺炎衣原體的 IgG抗體在不同年齡組患者中的檢查結(jié)果其中60歲以上老年呼吸疾病患者中的陽(yáng)性率最高,為 76%(68/90);20~59歲成年人呼吸疾病的陽(yáng)性率居中,為 68%(82/120);而20歲以下呼吸疾病患者的陽(yáng)性率最低,為 40%(4/10例)。220例患者當(dāng)中肺炎衣原體IgG抗體的陰性率為70%(154/220),有50例(23%)患者具有肺炎衣原體急性感染的證據(jù),其中符合急性感染的血清學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)患者有34例(16%),見(jiàn)表1。兩組呼吸疾病患者間的臨床表現(xiàn)極其相似,統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果P>0.05,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
表1 兩組呼吸系統(tǒng)疾病感染病例的臨床特征比較[n(%)]
本實(shí)驗(yàn)研究中,肺炎衣原體呼吸系統(tǒng)患者與非肺炎衣原體呼吸系統(tǒng)感染患者的臨床特征間無(wú)明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,此實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明由肺炎衣原體引起呼吸道感染患者的臨床表現(xiàn)并未體現(xiàn)出明顯的特異性標(biāo)志。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果中同時(shí)檢測(cè)出有其它致病原引起呼吸系統(tǒng)疾病患者中約有1/3,結(jié)果說(shuō)明混合感染也是常見(jiàn)的感染途徑。
咽拭子是目前臨床上檢測(cè)肺炎衣原體分離培養(yǎng)標(biāo)本的最主要來(lái)源,但對(duì)于其在血清學(xué)檢測(cè)診斷率明顯高于急性呼吸系統(tǒng)感染的診斷率。運(yùn)用PCR酶聯(lián)免疫技術(shù)實(shí)驗(yàn)方法來(lái)檢測(cè)肺炎衣原體急性呼吸道感染患者的痰標(biāo)本,有很高的特異性和敏感性,分別為99%和77%,這一結(jié)果與痰培養(yǎng)檢測(cè)結(jié)果及其相似,并且還比單獨(dú)血清學(xué)檢測(cè)的效果更好。此結(jié)果也證明至今為止,在臨床上常用的咽拭子檢測(cè)并非是最為理想的呼吸道感染選取標(biāo)本的方法,然而最可靠的還是對(duì)痰標(biāo)本的檢測(cè)。
[1] 施毅,宋勇.現(xiàn)代肺部感染學(xué)[M].北京:人民軍醫(yī)出版社出版,2010:406-411.
[2] Grayston JT,Campbell LA,Kuo CC,et al.A new respiratory tract pathogen:chlamydia pneumoniae strain TWAR[J].J Infect Dis,2008, 179:618-625.
[3] Kang Xiaoming,Song Yong.Gene amplification method for detection of pneumonia chlamydia DNA research[J].Jiangsu medicine,2008,34:153-155.
R563.1
A
1673-5846(2013)09-0085-02
葫蘆島市中心醫(yī)院呼吸內(nèi)科,遼寧葫蘆島 125001