中藥超微飲片的成分組成與原藥材成分的差異分析

袁 超

（冷水江市中醫(yī)院，湖南 冷水江 417500）

中藥超微飲片的成分組成與原藥材成分的差異分析

袁 超

（冷水江市中醫(yī)院，湖南 冷水江 417500）

目的 對(duì)中藥超微飲片的成分組成與原藥材成分的差異進(jìn)行對(duì)比分析，為中藥超微飲片在臨床上的應(yīng)用提供可靠的參考依據(jù)。方法 采取薄層色譜法、紫外分光光度法、高效液相色譜法對(duì)小柴胡湯超微飲片與原藥材展開定性鑒別、水溶性浸出物重量以及總黃酮和黃芩苷溶出量進(jìn)行測定，并對(duì)比分析測定結(jié)果。結(jié)果 定性鑒別結(jié)果顯示超微飲片與原藥材在對(duì)照品相應(yīng)位置上均出現(xiàn)相同斑點(diǎn)；相同條件下，超微飲片水溶性浸出物量較原藥材多（P＜0.05）；相同溶劑量下超微飲片總黃酮、黃芩苷溶出量較原藥材大（P＜0.05）。結(jié)論 超微飲片對(duì)原有藥材的藥效學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)予以了保留，且有效成分溶出量得到顯著增加，值得臨床應(yīng)用。

中藥超微飲片；原藥材；定性鑒別；有效成分；差異

近幾年超微粉碎技術(shù)在中藥材加工中得到了廣泛的應(yīng)用，使得中藥超微飲片在臨床上得到了應(yīng)用。本次研究中出于對(duì)中藥超微飲片的成分組成與原藥材成分的差異進(jìn)行對(duì)比分析的目的，采取薄層色譜法、紫外分光光度法、高效液相色譜法對(duì)不同飲片展開了定性鑒別和溶出物重量進(jìn)行了測定，現(xiàn)匯報(bào)如下。

1 材 料

1.1 藥品與試劑

小柴胡湯超微飲片與傳統(tǒng)飲片，處方組成：柴胡24g、黨參9g、黃芩9g、半夏9g、大棗9g、甘草9g、生姜9g。黃芩苷對(duì)照品，高效液相用甲醇（色譜純），其他試劑均為分析純，高純水為實(shí)驗(yàn)室自制。

1.2 儀器

UV-2401PC分光光度儀；UltiMate-3000型高效液相色譜儀；GLIOM高速冷凍離心機(jī)；HHS-4S型電子恒溫不銹鋼水浴鍋；766-1型遠(yuǎn)紅外輻射干燥箱；CP225D型電子天平；Nikon Ecl ipse E600生物顯微鏡；Nikon Coolpix 4500數(shù)碼相機(jī)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

研究中相關(guān)數(shù)據(jù)資料采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理，水溶性溶出物重量、總黃酮溶出量測量結(jié)果采用均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差（）進(jìn)行表示，分別展開t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)，在P＜0.05時(shí)，視為差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 小柴胡湯供試品制備

以處方比例稱取小柴胡湯超微飲片和傳統(tǒng)飲片，分別加入含有藥材總量5、10、20倍的水。將超微飲片在100℃的水浴鍋中浸泡2次，傳統(tǒng)飲片則是經(jīng)回流提取2次，每次持續(xù)30min，而后在5000rpm，25℃條件下離心10min，取上清液，濃縮至250mL，備用。

2.2 小柴胡湯超微飲片粒度測定

取小柴胡湯超微飲片樣品少許，將其制成臨時(shí)水裝片，而后在顯微鏡下對(duì)粒徑的大小進(jìn)行觀察與測量，同時(shí)注意細(xì)胞破壁情況。

2.3 小柴胡湯超微飲片與傳統(tǒng)飲片定性鑒別

小柴胡超微飲片樣品、傳統(tǒng)飲片樣品、對(duì)照品試液以及陰性樣品的制備均按照《中華人民共和國藥典》（2010版）所著方法進(jìn)行[1]。

2.4 水溶性浸出物測定

以《中華人民共和國藥典》（2010版）所著水溶性浸出物測定方法中熱浸法展開測定[2]。

2.5 小柴胡湯超微飲片與傳統(tǒng)飲片總黃酮溶出量測定

2.5.1 樣品制備

取2.1所制備的樣品溶液50mL，濃縮至15mL后加入35mL濃度為95%的乙醇進(jìn)行沉淀，靜置過夜后進(jìn)行抽濾，在濾液中加入濃度為70%的乙醇定容至50mL，精密移取1.0mL放置在蒸發(fā)皿中揮干，而后采取濃度為50%的甲醇進(jìn)行溶解，定容至100mL作為供試液。

2.5.2 總黃酮溶出量測定

將濃度為50%的甲醇溶液作為空白對(duì)照，對(duì)基線進(jìn)行調(diào)整，取2.5.1所制備的供試液采取紫外分光光度計(jì)在277nm處進(jìn)程吸光度測定，而后依照標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)小柴胡湯超微飲片與傳統(tǒng)飲片每克藥材中總黃酮的溶出量進(jìn)行計(jì)算。

2.6 小柴胡湯超微飲片與傳統(tǒng)飲片黃芩苷溶出量測定

2.6.1 高效液相色譜法的色譜條件

色譜柱為：C18Kromasil柱，規(guī)格為4.6×250mm；流動(dòng)相為：甲醇-水-磷酸(v∶v∶v，47∶53∶0.2)；流速為：1.0mL/min；進(jìn)樣量為：10μL；檢測波長為315nm；柱溫為25℃。

2.6.2 樣品供試液制備

取2.1所制備的樣品溶液50mL，濃縮至15mL后加入35mL濃度為95%的乙醇進(jìn)行沉淀，靜置過夜后進(jìn)行抽濾，取濾液1.0mL，各4份，而后采取濃度為70%的乙醇定容至10mL，備用。

2.6.3 黃芩苷含量測定

在上述色譜條件下對(duì)個(gè)樣品供試液進(jìn)行測定。以峰面積，依照標(biāo)準(zhǔn)缺陷對(duì)小柴胡湯超微飲片與傳統(tǒng)飲片每克藥材中黃芩苷含量進(jìn)行計(jì)算。

3 結(jié) 果

3.1 超微飲片粒徑檢測

在顯微鏡下可發(fā)現(xiàn)超微飲片樣品絕大多數(shù)呈現(xiàn)為顆粒狀物質(zhì)，細(xì)胞破壁率占視野的95%以上，直徑在5～38μm之間。

3.2 小柴胡湯超微飲片與傳統(tǒng)飲片黃芩苷薄層色譜鑒別

經(jīng)觀察發(fā)現(xiàn)，在黃芩苷對(duì)照品相同位置上超微飲片與與傳統(tǒng)飲片均存在墨綠色斑點(diǎn)，并且超微飲片的顏色更為明顯，陰性樣品為產(chǎn)生干擾。

3.3 水溶性浸出物重量測定結(jié)果

經(jīng)統(tǒng)計(jì)得知，在相同溶劑中超微飲片水溶性浸出物重量大于傳統(tǒng)飲片（P＜0.05），且隨著溶劑量的增加，浸出物重量也隨之加重，詳見表1。

表1 超微飲片與傳統(tǒng)飲片水溶性浸出物重量測定結(jié)果統(tǒng)計(jì)

3.4 總黃酮溶出量

相同溶劑量下，超微飲片的總黃酮溶出量較傳統(tǒng)飲片大（P＜0.05），隨著溶劑量的增加溶出量也隨之增多，詳見表2。

表2 超微飲片與傳統(tǒng)飲片總黃酮溶出量比較結(jié)果統(tǒng)計(jì)

3.5 黃芩苷溶出量比較

相同溶劑量下，超微飲片的黃芩苷溶出量較傳統(tǒng)飲片大（P＜0.05），隨著溶劑量的增加溶出量也隨之增多，詳見表3。

表3 超微飲片與傳統(tǒng)飲片黃芩苷溶出量比較結(jié)果統(tǒng)計(jì)

4 討 論

近年來中醫(yī)藥水平得到了飛速的發(fā)展，中藥的臨床價(jià)值越來越受到重視，然隨著科技的進(jìn)步，醫(yī)療水平的提高，中藥飲片煎煮麻煩、質(zhì)量不穩(wěn)定、服用與攜帶不方便以及衛(wèi)生狀況不佳等缺點(diǎn)逐漸暴漏出來，使中醫(yī)藥的發(fā)展受到了一定的影響[3]。隨著超微粉碎技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用，使中藥超微飲片在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用，本次試驗(yàn)通過對(duì)比分析超微飲片與傳統(tǒng)飲片的定性鑒別結(jié)果、水溶性浸出物重量、總黃酮與黃芩苷溶出量的測定結(jié)果得知，超微飲片可以對(duì)原有藥材的藥效學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)予以保留，且水溶性浸出物重量、總黃酮與黃芩苷等有效成分的溶出量均較傳統(tǒng)飲片高，由此可知，超微飲片在臨床上具有較高的應(yīng)用價(jià)值，值得關(guān)注。

[1] 蔡光先,鄭雪花,劉塔斯,等.桑葉超微粉的粒徑檢測及顯微特征觀察[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2009,17(2):246-247.

[2] 李志猛,王躍生,李曉明,等.甘草飲片超微粉碎前后甘草酸溶出行為的比較研究[J].中國中藥雜志,2009,28(11):1030-0133.

[3] 司南,楊健,邊寶林.不同粒度麻杏石甘湯配方藥材超微粉中麻黃堿及偽麻黃堿的溶出率比較[J].中國中藥雜志,2009,31(11): 884.

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1671-8194（2013）20-0085-02