東營地區(qū)哮喘患兒血清過敏原特異性IgE和總IgE檢測分析

彭 瑜，李澤焰，周明琪

(1勝利油田濱海醫(yī)院，山東東營257237;2勝利油田中心醫(yī)院)

支氣管哮喘是兒童常見的呼吸道疾病，過敏原是兒童哮喘發(fā)作的常見觸發(fā)因素［1］。早期檢測過敏原并采取相應(yīng)防護措施，避免哮喘兒童與之接觸或進行針對性脫敏治療，是哮喘病防治的最有效方法。為探討東營地區(qū)兒童支氣管哮喘與常見過敏原的關(guān)系，本文對126例哮喘患兒進行了血清過敏原特異性IgE(sIgE)和總IgE(TIgE)測定?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1．1 臨床資料 選擇2011年12月～2012年12月勝利油田濱海醫(yī)院、勝利油田中心醫(yī)院確診的支氣管哮喘患兒126例，男67例、女59例，均符合兒童哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］。根據(jù)年齡將患兒分為嬰幼兒組(＜3歲)和兒童組(3～14歲)各63例。嬰幼兒哮喘表現(xiàn)為喘息發(fā)作≥3次，發(fā)作時雙肺聞及呼氣相哮鳴音、呼氣相延長，且無其他引起喘息的疾病。兒童哮喘表現(xiàn)為喘息反復(fù)發(fā)作，發(fā)作時雙肺聞及呼氣相哮鳴音、呼氣相延長，支氣管舒張劑有明顯療效，無其他引起喘息、胸悶和咳嗽的疾病。

1．2 檢測方法 采集受試者靜脈血2．5 mL，分離血清后檢測或-20℃保存?zhèn)溆?。血清sIgE和TIgE由Allergy Screen過敏原檢測系統(tǒng)完成，試劑由MEDIWISSAnalytic GmbH公司提供，采用免疫印跡方法，血清sIgE＞0．35 IU/mL為檢測結(jié)果陽性。檢測的sIgE過敏原包括吸入性過敏原如戶塵螨、屋塵、桑樹、貓毛皮屑、狗毛皮屑、蟑螂、筧、點青/分枝/煙曲/交鏈霉、矮豚草/篙/葎草/藜、柏/榆/柳/樺/楓/胡桃/梧桐/楊以及食入性過敏原如雞蛋白、牛奶、蝦、牛肉、貝、蟹、芒果、腰果、菠蘿共19項。檢測步驟:①將試劑盒恢復(fù)到室溫(20～22℃);②用蒸餾水稀釋洗脫液(洗脫液∶蒸餾水為1∶25);③用清洗液濕潤硝酸纖維素膜，在檢測板上加入血清標(biāo)本，在混勻器上室溫孵育45 min;④沖洗，手持反應(yīng)槽上下翻轉(zhuǎn)讓清洗液充分流過;⑤加入250μL標(biāo)記生物素的抗人IgE抗體，在混勻器上室溫孵育45 min;⑥沖洗，加入250μL鏈霉親和素標(biāo)記物，在混勻器上室溫孵育20 min;⑦沖洗，加入250μL底物酶作用底物，在混勻器上室溫孵育20 min;⑧流水沖洗，終止底物酶反應(yīng);⑨完全干燥后，將帶檢測條的反應(yīng)槽插入專用閱讀儀測量，使用數(shù)字成像系統(tǒng)和配套軟件進行分析。先用專用CCD相機進行攝影讀取結(jié)果，再用專用軟件分析相應(yīng)的過敏原條帶顏色，計算得出每一條帶的面積積分，再與軟件中已存儲的標(biāo)準(zhǔn)曲線作對比，以此得出血清sIgE、TIgE濃度。

1．3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS11．5統(tǒng)計軟件，率和構(gòu)成比以百分比表示，組間比較采用χ2檢驗。P≤0．05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2．1 兩組各類過敏原致敏情況 126例哮喘患兒中，84例呈 1種或多種 sIgE陽性，陽性率為66．67%;其中嬰幼兒組sIgE陽性36例(57．14%)，兒童組sIgE陽性48例(76．19%)，兩組sIgE陽性率比較P＜0．05。19種過敏原中，戶塵螨陽性率最高，其次為貓毛皮屑、狗毛皮屑及矮豚草/篙/葎草/藜，再次為牛奶、雞蛋白和霉菌。見表1。

表1 兩組各類過敏原陽性致敏結(jié)果(n=63)

2．2 嬰幼兒組與兒童組sIgE陽性患兒吸入性和食入性過敏原構(gòu)成情況 兩組sIgE陽性患兒吸入性、食入性過敏原構(gòu)成比較，P＜0．05。見表2。

表2 兩組sIgE陽性患兒吸入性和食入性過敏原構(gòu)成［例(%)］

2．3 sIgE水平與TIgE的相關(guān)性分析 見表3。sIgE 水平與 TIgE 存在相關(guān)性(χ2=13．536，P ＜0．01)

表3 TIgE水平與sIgE陽性的關(guān)系［例(%)］

3 討論

近年來，兒童支氣管哮喘發(fā)病率逐年上升，其中80%為過敏性哮喘。支氣管哮喘患兒氣道存在對各種觸發(fā)因素的高反應(yīng)性，避免接觸相應(yīng)過敏原或特異性脫敏治療對哮喘患兒的預(yù)防和治療極為重要。

多數(shù)文獻認為，Immuno CAP是血清學(xué)特異性IgE檢測的“金標(biāo)準(zhǔn)”。黎明等［3］在小兒Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)研究中采用Allergy Screen和Immuno CAP兩個系統(tǒng)檢測 sIgE，兩者符合率達90%。本研究采用Allergy Screen過敏原檢測系統(tǒng)對126例哮喘患兒進行血清 sIgE和TIgE檢測。結(jié)果顯示，東營地區(qū)50%以上的兒童哮喘與接觸過敏原有關(guān)，與文獻報道基本一致［4］。其中嬰幼兒組sIgE陽性檢出率明顯低于兒童組，其原因與病毒感染是嬰幼兒時期哮喘最主要的觸發(fā)因子有關(guān)。過敏原種類分布分析顯示，嬰幼兒以食物過敏原為主，此可能與嬰幼兒胃腸功能發(fā)育不完善、免疫功能不健全、對某些消化酶的合成和分泌不夠完善、食物性過敏原經(jīng)消化后仍能產(chǎn)生致敏作用有關(guān)。隨著年齡增長，免疫功能不斷完善，活動范圍擴大，接觸各種過敏原的機會增加，致使兒童吸入性過敏原sIgE檢出率較高。

研究顯示，我國哮喘患兒螨蟲皮試陽性率為69．7%，正常兒童為12．1%。本研究顯示，東營地區(qū)小兒哮喘過敏原中塵螨陽性率為31．21%，較全國報道低，可能與該地區(qū)天氣多風(fēng)、空氣干燥不利于塵螨生長繁殖有關(guān)。但本研究中塵螨仍是所測19項過敏原中陽性率最高者，說明塵螨仍為本地區(qū)最重要的過敏原。塵螨包括屋塵螨和戶塵螨，常居生于床墊、毛毯、地毯、沙發(fā)類家具中，其螨蟲體和螨的排泄物是許多過敏原的來源。陰暗潮濕環(huán)境最適宜螨蟲生長、繁殖［5］，故對于螨蟲過敏者應(yīng)通風(fēng)，保持室內(nèi)干燥，避免使用毛毯等物品。

正常人血清TIgE＜100 IU/mL、＞200 IU/mL一般表明機體處于致敏狀態(tài)。本研究結(jié)果表明，小兒哮喘TIgE＞200 IU/mL者與同組sIgE陽性檢出率有明顯相關(guān)性，提示TIgE＞200 IU/mL可作為判定過敏狀態(tài)的良好指標(biāo)。但在TIgE＞200 IU/mL的87例患者中仍有20例sIgE檢測呈陰性。其原因可能是患兒存在某種sIgE，而這些sIgE未包含在本研究所檢測的19項sIgE中。

本研究結(jié)果提示，對兒童支氣管哮喘應(yīng)針對不同年齡分期、不同過敏原組成應(yīng)用不同的預(yù)防方法。嬰幼兒期應(yīng)多尋找食物性過敏原，注意食物和日常用品中過敏物質(zhì)的存在，去除食物過敏原，進行飲食指導(dǎo);較大兒童應(yīng)注意環(huán)境衛(wèi)生、改善居住環(huán)境，注意減少對塵螨的暴露。

［1］余勝華．吸入性糖皮質(zhì)激素治療兒童哮喘的臨床應(yīng)用［J］．實用兒科臨床雜志，2004，19(12):1081-1020．

［2］薛辛東．兒科學(xué)［M］．北京:人民衛(wèi)生出版社，2006:294．

［3］黎明，沈錚，沈霞．Allergy Screen系統(tǒng)在兒童Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)中的應(yīng)用［J］．上海第二醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2004，24(9):785-787．

［4］Soderstrom L，Kober A，Ahlstedt S，et al．A further evaluation of the clinical use of specific IgE antibody testing in allergic diseases［J］．Allergy，2003，58(4):921-928．

［5］周曉慶，金永堂，何興周．環(huán)境因素致皮膚過敏與支氣管哮喘發(fā)病之間關(guān)系的分析［J］．衛(wèi)生研究，2004，33(2):236-238．