酸漿對高脂血癥大鼠的抗氧化功能研究

王冬梅，安 英，徐 斌 (吉林醫(yī)藥學院，吉林 吉林 132013)

酸漿為茄科酸漿屬多年生草本，酸漿果具有清熱利尿之藥效，外敷可消炎。另外，其囊狀宿萼中含植物甾醇，味淡而微苦，泡水飲用有清咽、化痰、利尿的作用。在民間，人們將酸漿宿萼或葉曬干當茶飲，可清熱去火。酸漿籽中含亞油酸、亞麻酸等人體所需的必需脂肪酸，對于調(diào)節(jié)血脂有非常重要的幫助。近年來國內(nèi)外對酸漿屬植物的研究較多，已報道從酸漿中分離得到一系列酸漿苦素類化合物，酸漿苦素類成分是目前發(fā)現(xiàn)我國僅有的醉茄內(nèi)酯藥物資源，該類化合物的抗腫瘤活性引起了學者的高度重視和研究［1］?，F(xiàn)代科學分析，酸漿中含有18種氨基酸，鈣、鎂、硼、鋅、硒、鍺等21種微量元素和礦物質(zhì)，還有8種維生素［2］，酸漿果實和宿萼中含豐富的黃酮類物質(zhì)。黃酮類化合物具有顯著的抗氧化性，并且它還是一種有效的自由基清除劑，具有抗腫瘤、抗糖尿病、抗菌及抗病毒等方面的功能。但對于這方面的功效缺乏深入的研究，本實驗通過酸漿提取物對高血脂大鼠血清丙二醛(MDA)含量、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性測定，與模型組進行比較來研究此類提取物對高血脂大鼠抗氧化能力的影響。

1 資料與方法

1.1 實驗材料

酸漿鮮果購于藥材市場，由吉林醫(yī)藥學院雷鈞濤教授鑒定為正品并制備成提取液;高脂飼料:基礎(chǔ)飼料94%(玉米粉52%，大豆粉23%，麥麩11%，面粉9%，鈣鹽2%，混合維生素，膽固醇1%，豬油5%)。

漩渦混合器(XW-891永嘉華聯(lián)科學儀器廠);分析天平(FA1104N上海精密科學儀器有限公司);離心機(TD-5A湖南凱達科學儀器有限公司);HHS型電熱恒溫水浴鍋(上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠);可見分光光度計(722上海菁華科技儀器有限公司);架盤藥物天平(HC-TP11-5上海精密科學儀器有限公司);自動平衡微型離心機(LDZ4-0.8北京醫(yī)用離心機廠制造)。

SOD、MDA、羥自由基(·OH)試劑盒(南京建成生物工程研究所)。

1.2 實驗動物處理

Wistar大鼠50只，雌雄各半，體重150～200 g(購于吉林大學白求恩醫(yī)學部動物飼養(yǎng)中心)，隨機分為5組，每組10只，即空白組(基礎(chǔ)飼料)，高脂組(高脂飼料)，酸漿提取液高、中、低劑量組，空白組喂養(yǎng)基礎(chǔ)飼料，其余各組均喂養(yǎng)高脂飼料，連續(xù)喂養(yǎng)30 d，自由飲水，建立高脂模型。之后酸漿提取液低、中、高三組分別按大鼠體重3 g/70 kg、15 g/70 kg、75 g/70 kg給予酸漿提取液灌胃，空白組和高脂組灌蒸餾水，各組均灌胃1.5 mL連續(xù)30 d，各組均喂養(yǎng)基礎(chǔ)飼料，實驗結(jié)束時末次給藥后24 h禁食禁水。

1.3 血樣的采集及處理

實驗結(jié)束時用水合氯醛(3 mL/kg)麻醉大鼠后，從腹主動脈取血分離血清(3 000 r/min離心10 min)，按照試劑盒說明測定SOD和MDA含量。

1.4 酸漿體外清除·OH的測定

將酸漿提取液及VC配制成濃度為1～9 mg/mL。取10 mL具塞試管，按順序加入6 mmol/L FeSO42 mL，6 mmol/L水楊酸2 mL，酸漿提取液濃度分別為8.57 mg/mL、42.85 mg/mL、214.25 mg/mL溶液各2 mL，最后加6 mmol/L H2O22 mL啟動反應，37℃下反應1 h。在510 nm下測量各濃度的吸光度，空白對照組以蒸餾水代替樣品。以6 mmol/L FeSO42 mL，6 mmol/L水楊酸2 mL，三種濃度的酸漿提取液2 mL和2 mL蒸餾水混合作為樣品的本底吸收。將測定值代入下式計算清除率。

Ao:空白對照液的吸光度;Ax:加入酸漿提取液后的吸光度;Axo:不加顯色劑H2O2樣品溶液本底的吸光度。

1.5 統(tǒng)計方法

采用Spss17.0軟件包，對數(shù)據(jù)進行顯著性檢驗。

2 結(jié)果

2.1 SOD活性和MDA含量的測定

酸漿提取液對高血脂大鼠血清SOD活性和MDA含量的影響見表1。由表中可看出酸漿提取液中、高劑量組大鼠血清SOD活性與高脂組大鼠相比，顯著增加(P＜0.05)，酸漿提取液低、中、高劑量組大鼠血清MDA含量與高脂組大鼠相比，顯著下降(P＜0.05)。

表1 酸漿提取液對大鼠SOD和MDA的影響±S，n=10)

表1 酸漿提取液對大鼠SOD和MDA的影響±S，n=10)

與高脂組相比較，*:P＜0.05，＊＊:P＜0.01

組別 SOD活力(U/mL)MDA含量(μmol/L)空白組 34.4±4.2＊＊ 9.5±4.3＊＊高脂組 30.6±5.0 52.4±8.2低劑量組 38.3±4.1* 27.2±3.7中劑量組 47.8±6.1＊＊ 21.1±3.0＊＊高劑量組 62.8±7.6＊＊ 11.6±2.6＊＊

2.2 體外·OH清除率的測定

酸漿提取液對·OH的體外清除作用結(jié)果為:8.57 mg/mL劑量組清除率50.69%，42.85 mg/mL劑量組清除率62.81%，214.25 mg/mL劑量組清除率87.16%，可見酸漿提取液對·OH的清除率隨酸漿濃度升高而增加，與空白對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。

3 討論

機體過量的自由基可以引發(fā)生物膜不飽和脂肪酸發(fā)生脂質(zhì)過氧化，產(chǎn)生MDA和過氧化脂質(zhì)，它們的含量變化可定量反映生物膜如線粒體膜、細胞膜等的受損程度。膜的完整性受損，從而使膜的通透性增加，引起膜內(nèi)外物質(zhì)的外泄和內(nèi)流，造成如紅細胞溶血和線粒體膨脹等現(xiàn)象的發(fā)生［3］。破壞正常的氧化和抗氧化平衡，造成機體的氧化應激［4］，進而損壞各器官和酶等系統(tǒng)，引起衰老、腫瘤、動脈粥樣硬化等疾病。越來越多的研究顯示抗氧化是預防衰老的重要步驟，因為自由基或氧化劑會將稀薄和組織分解，影響代謝功能，并會引起不同的健康問題。如果能夠消除過多的氧化自由基，對于許多自由基引起的及老化相關(guān)疾病都能夠預防。補充抗氧化物質(zhì)有利于運動機體減少自由基的產(chǎn)生或加速其清除，以對抗自由基的副作用，因而對一般人或者動物的健康都有益，可能延緩運動性疲勞發(fā)生和加快體能恢復。

SOD是生物體產(chǎn)生的一種天然抗氧化酶，它通過歧化反應清除體內(nèi)生成的氧自由基，阻斷脂質(zhì)過氧化連鎖反應。而MDA是脂質(zhì)過氧化物的分解產(chǎn)物，其含量反映了脂質(zhì)過氧化反應程度的強弱和機體細胞受自由基攻擊的程度。因此測定高血脂大鼠血清中的SOD活性和MDA的含量，可以從兩個方面提示機體的氧化損傷情況。

·OH是目前所知活性氧中對生物體危害最大的一種自由基，對細胞內(nèi)DNA的破壞作用最大?；钚匝跛鶎е碌腄NA損傷在細胞里的積累被認為是機體老化的主要原因［4］。因此研究·OH的清除作用具有重要的應用價值。

本研究顯示，酸漿提取液無論是高劑量組還是低劑量組都能增強高血脂大鼠血清SOD活性，都能使血清MDA含量下降。其中高劑量組大鼠血清SOD活性明顯強于高脂組大鼠，高劑量組大鼠血清MDA含量明顯低于高脂組大鼠。酸漿體外抗氧化說明酸漿提取液對·OH有很好的清除作用，研究表明酸漿提取液對高血脂大鼠具有抗氧化作用，在一定范圍內(nèi)，酸漿劑量越高，抗氧化作用效果越明顯。酸漿提取液具有抗氧化作用，但是具體是什么物質(zhì)起到抗氧化作用還有待研究。

近年來，隨著物質(zhì)生活的逐步提高，人們對高質(zhì)量生活的追求越來越強烈。保健養(yǎng)生、合理膳食、營養(yǎng)搭配、食藥兩用的研究逐漸嶄露頭角，成為醫(yī)學領(lǐng)域中的新寵。同時隨著近年來人們生活方式和飲食結(jié)構(gòu)的改變，飲食中脂肪攝入的增多及運動量的減少，使得高脂血癥的發(fā)病率在不斷增加。酸漿的多種營養(yǎng)成分和生物活性使其成為無污染、風味獨特、營養(yǎng)豐富的天然食品［5］，并以其安全有效、副作用小可為治療高脂血癥開辟新的領(lǐng)域，研究酸漿的抗氧化作用，必將產(chǎn)生一定的社會效益和經(jīng)濟效益。

［1］ 陳 榮，梁敬鈺，楊 洋，等.酸漿化學成分及酸漿苦素G的結(jié)構(gòu)訂正［J］.中國天然藥物，2007，5(3):187-189.

［2］ 王家東，王曉聞.酸漿營養(yǎng)成分的分析［J］.山西農(nóng)業(yè)大學學報:自然科學版，2005，25(4):376-379.

［3］ 楊建雄，朱淑云，李發(fā)榮.連翹葉茶的體外抗氧化活性［J］.食品科學，2002，23(12):120-122.

［4］ 高曉黎，季興梅.葡聚糖凝膠柱色譜法測定脂質(zhì)體包封率的條件篩選［J］.中國藥學雜志，2003，38(7):515-517.

［5］ 張 娜，別智敏，秦文靜，等.酸漿的化學成分及生理功效［J］.吉林醫(yī)藥學院學報，2008，29(2):104-106.