翅萼石斛脂溶性成分的GC-MS研究

郝普彥，郭力，石媛慧，許莉，陳佳江，韋練，張廷模

石斛為蘭科（Orchidaceae）石斛屬（Dendrobium Sw.）多年生草本植物，首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品，于《本草綱目》亦作為一種名貴中藥有所收錄[1]，其功效[2～3]主要為滋陰清熱、益胃生津、潤(rùn)肺止咳，在我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中已有2000多年的應(yīng)用歷史。石斛屬植物的化學(xué)成分類型多樣，主要有生物堿、Stilbenoids類、芴酮、香豆素、多糖等[4]，然而石斛種類繁多，僅我國國內(nèi)石斛種類就有76種[5]之多，不同種石斛所含化學(xué)成分類型不同，同種不同產(chǎn)地、不同采收期的石斛，其化學(xué)成分也有較大差異，為此本實(shí)驗(yàn)采用了GC-MS聯(lián)用技術(shù)[6]對(duì)翅萼石斛進(jìn)行了脂溶性化學(xué)成分研究，為進(jìn)一步研究翅萼石斛的化學(xué)成分提供相應(yīng)的依據(jù)。

1 儀器、試藥和方法

1.1 儀器

Agilent 7890A/5975C氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀。

1.2 試藥

翅萼石斛由四川萬安石斛產(chǎn)業(yè)開發(fā)有限公司提供，并經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室李敏教授鑒定確認(rèn)，所用試劑均為AR級(jí)。

1.3 供試品溶液的制備

取藥材粉末5.0 g，精密稱定，加入石油醚（60～90℃）100 mL，浸漬過夜，超聲30 min，過濾，揮干，殘?jiān)訜o水乙醇溶解，并定容至5 mL，即得。

1.4 GC-MS分析條件

HP-5 MS型石英毛細(xì)管色譜柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；程序升溫，初始溫度50 ℃，以7 ℃.min-1速率升溫至150 ℃，保持2 min，再以2 ℃.min-1速率升溫至250 ℃，保持14 min；進(jìn)樣口溫度280℃；載氣為高純度氦氣（99.999%），柱前壓7.65 psi，載氣流速1.0 mL.min-1；進(jìn)樣量1 μL；不分流。離子源為EI源；離子源溫度230 ℃；四極桿溫度150 ℃；溶劑延遲4 min；質(zhì)量范圍20～800 amu。

2 結(jié)果

供試品溶液經(jīng) GC-MS 聯(lián)用分析，得到總離子流圖（見圖1），將所得各組分的質(zhì)譜數(shù)據(jù)通過Agilent 5975C MSD化學(xué)工作站檢索Nist標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫進(jìn)行檢索，結(jié)合有關(guān)的文獻(xiàn)進(jìn)行圖解，確認(rèn)翅萼石斛石油醚部位的化學(xué)成分。通過Agilent 5975C MSD化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，按峰面積歸一化法進(jìn)行計(jì)算，求出各化學(xué)成分的峰面積相對(duì)百分含量，結(jié)果見表1。

表1 翅萼石斛GC-MS分析結(jié)果表

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圖1 翅萼石斛脂溶性化學(xué)成分GC-MS總離子流色譜圖

翅萼石斛中解析出 34個(gè)色譜峰，相對(duì)含量占總含量的71.859%，質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于1%的化學(xué)成分有九個(gè)，分別為棕櫚酸甲酯（3.913%）、鄰苯二甲酸二丁酯（37.174%）、硬脂酸甲酯（2.526%）、十七烷（1.446%）、9 - 辛基十七烷（1.133%）、四十四烷（1.078%）、二十五烷（6.158%）、鄰苯二甲酸二異辛酯（4.757%）、二十一烷（3.767%）。

3 討論

3.1 本研究首次采用GC-MS聯(lián)用技術(shù)對(duì)翅萼石斛的脂溶性成分進(jìn)行了分析鑒定，共鑒定出34種化合物，主要為烷烴類和酯類，為進(jìn)一步了解翅萼石斛化學(xué)成分提供了一定的理論依據(jù)。

3.2 本實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果，翅萼石斛以鄰苯二甲酸二丁酯相對(duì)百分含量為最高，與藥典石斛脂溶性成分GC-MS對(duì)比（文章已錄用）相比較，存在較大差異，金釵中并未檢測(cè)到該成分，而鼓槌和流蘇中雖然存在該成分，但含量并不如翅萼石斛中高，其他成分亦存在顯著性差異。幾種石斛尚需進(jìn)行全面系統(tǒng)的對(duì)比研究，將在以后的工作中進(jìn)行完善。

3.3 GC-MS聯(lián)用技術(shù)一般用于揮發(fā)油成分的分析，但揮發(fā)油提取所需樣本量較大，而石斛為瀕危植物，資源有限，因此本次試驗(yàn)僅對(duì)其脂溶性成分進(jìn)行了分析，在后期工作中將進(jìn)一步完善。

[1] 宋經(jīng)元,郭順星,肖培根.近十年來石斛屬植物的研究進(jìn)展[J].中國藥學(xué)雜志, 2004, 39(10):725.

[2] 鄧銀華,徐康平,譚桂山.石斛屬植物化學(xué)成分與藥理活性研究進(jìn)展[J].中藥材, 2002, 25(9): 677.

[3] 王康正,高文遠(yuǎn).石斛屬藥用植物研究進(jìn)展[J].中草藥,1997,28(10):633.

[4] 張光濃,畢志明,王崢濤,等.石斛屬植物化學(xué)成分研究進(jìn)展[J].中草藥,2003,34(6):附5.

[5] 中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會(huì).中國植物志[M]:第6(2)卷.北京 :科學(xué)出版社,2000:116.

[6] 欒陽,張慧, 康廷國.掌葉半夏脂溶性成分GC-MS研究[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2013,19(2):298.